目的研究杜仲葉提取物對人牙周膜干細胞(hPDLSCs)體外增殖與成骨分化的影響。方法原代培養(yǎng)hPDLSCs,分別將含10^-4,10^-5,10^-6 g/ml杜仲葉提取物的傳統(tǒng)礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)基與hPDLSCs作用作為實驗組,以DMEM完全培養(yǎng)基為空白對照組,以傳統(tǒng)礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)基為陽性對照組。四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測各組細胞的增殖活性、檢測堿性磷酸酶(ALP)活性、RT-PCR法檢測各組細胞成骨相關(guān)基因(Runx2,OPN,OCN)的表達。結(jié)果 MTT結(jié)果顯示,5組細胞分別培養(yǎng)1 d后,OD值均較小,組間無顯著差異(P>0.05)。各組細胞OD值在3～7 d持續(xù)增加,實驗組顯著高于空白對照組和陽性對照組(P<0.05)。濃度為10^-4,10^-5,10^-6 g/ml的杜仲葉提取物均可促進hPDLSCs的增殖,且各實驗組OD值隨著杜仲葉提取物質(zhì)量濃度的增加而增加,存在劑量依賴效應(yīng)。3個實驗組和陽性對照組ALP活性均明顯增高,且各實驗組與陽性對照組差異...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料和儀器
    1.2 杜仲葉提取物的配制
    1.3 人牙周膜干細胞分離培養(yǎng)
        1.3.1 標本納入標準
        1.3.2 酶解組織塊法原代培養(yǎng)、分離純化hPDLSCs
    1.4 免疫熒光染色鑒定細胞來源
    1.5 實驗分組
    1.6 細胞增殖能力檢測
    1.7 ALP活性測定
    1.8 RT-PCR
    1.9 統(tǒng)計分析
2 結(jié) 果
    2.1 原代培養(yǎng)hPDLSCs的形態(tài)學觀察
    2.2 免疫熒光染色鑒定hPDLSCs的來源
    2.3 細胞增殖情況
    2.4 ALP活性測定
    2.5 RT-PCR檢測成骨相關(guān)基因的表達
3 討 論



本文編號：3755237