加味丹參飲基于自噬干預(yù)大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的研究
發(fā)布時間:2023-02-26 02:07
目的觀察加味丹參飲預(yù)處理對離體大鼠心臟缺血再灌注調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞自噬相關(guān)基因蛋白表達(dá)的影響。方法將60只SD大鼠隨性別隨機分為6組:空白組,缺血預(yù)適應(yīng)組,模型組,全方組(加味丹參飲組),全方+自噬抑制劑組,全方+雷帕霉素組,實驗2周前予以灌胃處理,換算預(yù)處理200g大鼠每日灌胃藥量為1.2g,藥物濃度1g/ml,每日劑量1.2ml,分兩次灌胃?瞻捉M、模型組、缺血預(yù)適應(yīng)組予以等量生理鹽水,全方組、自噬抑制劑組、雷帕霉素組均灌胃中藥,自噬抑制劑組同時予以腹腔注射3-MA(2mmol/L),給藥劑量3.0mg/200g,其余各組等量腹腔注射生理鹽水;雷帕霉素組同時予以灌胃雷帕霉素,濃度0.2mg/ml,給藥劑量0.4mg/200g,其余各組灌胃等量生理鹽水。采用Langendorff灌流系統(tǒng)建立離體心臟心肌缺血再灌注模型,對照組:大鼠心臟用K-H液平衡灌注180 min;缺血再灌注模型組:大鼠心臟先預(yù)灌注20 min,然后再無氧、無灌流液的情況下停止灌流40 min(缺血),心臟始終保持在37℃恒溫槽中,之后再復(fù)灌2小時(再灌);缺血預(yù)適應(yīng)組:大鼠心臟預(yù)灌注平衡20 min,缺血5 min,再...
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮寫
前言
第一部分 材料和方法
1 實驗材料
1.1 實驗動物
1.2 實驗藥物
1.3 實驗試劑
1.4 實驗儀器
2 實驗方法
2.1 離體心臟缺血再灌注模型建立
2.2 大鼠離體心臟缺血再灌注模型制備成功的入選標(biāo)準(zhǔn)
2.3 實驗動物分組及處理
2.4 實驗動物給藥
3 指標(biāo)檢測及方法
3.1 血清心肌酶測定
3.2 心功能評價
3.3 光鏡觀察心肌組織病理標(biāo)本的制作
3.4 透射電子顯微鏡檢測的標(biāo)本制作
3.5 實時熒光定量RT-PCR法檢測自噬相關(guān)基因Beclin-1、Atg5m RNA的表達(dá)
3.6 免疫印跡法檢測自噬體膜標(biāo)志性蛋白質(zhì)LC3,Beclin-1 表達(dá)
3.7 統(tǒng)計學(xué)處理
第二部分 結(jié)果
1 實驗結(jié)果
1.1 實驗大鼠的情況
1.2 大鼠心肌缺血再灌注損傷心功能評價
1.3 實驗各組K-H液中心肌酶的變化
1.4 大鼠心肌病理形態(tài)學(xué)觀察
1.5 透射電鏡下觀察心肌細(xì)胞超顯微結(jié)構(gòu)
1.6 加味丹參飲對離體大鼠缺血再灌注中心肌細(xì)胞自噬Beclin-1、Atg5 m RNA的表達(dá)
1.7 加味丹參飲對離體大鼠缺血/再灌注心肌自噬Beclin-1、LC3B蛋白表達(dá)量的影響
第三部分 討論
1、心肌缺血再灌注損傷的認(rèn)識
1.1 西醫(yī)對心肌缺血再灌注損傷的認(rèn)識
1.2 中醫(yī)對心肌缺血再灌注損傷的認(rèn)識
2、自噬的認(rèn)識
2.1 西醫(yī)對細(xì)胞自噬的認(rèn)識
2.2 中醫(yī)對細(xì)胞自噬的認(rèn)識
2.3 自噬對心肌細(xì)胞的作用
3、加味丹參飲
3.1 加味丹參飲由來方解
3.2 加味丹參飲現(xiàn)代藥理研究
3.3 加味丹參飲前期研究
4、小結(jié)
4.1 改善心功能降低CK、LDH的釋放
4.2 心肌缺血再灌注中Beclin-1、Atg5 m RNA的表達(dá)及Beclin-1、LC3B蛋白的表達(dá)
5、結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
本文編號:3749591
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮寫
前言
第一部分 材料和方法
1 實驗材料
1.1 實驗動物
1.2 實驗藥物
1.3 實驗試劑
1.4 實驗儀器
2 實驗方法
2.1 離體心臟缺血再灌注模型建立
2.2 大鼠離體心臟缺血再灌注模型制備成功的入選標(biāo)準(zhǔn)
2.3 實驗動物分組及處理
2.4 實驗動物給藥
3 指標(biāo)檢測及方法
3.1 血清心肌酶測定
3.2 心功能評價
3.3 光鏡觀察心肌組織病理標(biāo)本的制作
3.4 透射電子顯微鏡檢測的標(biāo)本制作
3.5 實時熒光定量RT-PCR法檢測自噬相關(guān)基因Beclin-1、Atg5m RNA的表達(dá)
3.6 免疫印跡法檢測自噬體膜標(biāo)志性蛋白質(zhì)LC3,Beclin-1 表達(dá)
3.7 統(tǒng)計學(xué)處理
第二部分 結(jié)果
1 實驗結(jié)果
1.1 實驗大鼠的情況
1.2 大鼠心肌缺血再灌注損傷心功能評價
1.3 實驗各組K-H液中心肌酶的變化
1.4 大鼠心肌病理形態(tài)學(xué)觀察
1.5 透射電鏡下觀察心肌細(xì)胞超顯微結(jié)構(gòu)
1.6 加味丹參飲對離體大鼠缺血再灌注中心肌細(xì)胞自噬Beclin-1、Atg5 m RNA的表達(dá)
1.7 加味丹參飲對離體大鼠缺血/再灌注心肌自噬Beclin-1、LC3B蛋白表達(dá)量的影響
第三部分 討論
1、心肌缺血再灌注損傷的認(rèn)識
1.1 西醫(yī)對心肌缺血再灌注損傷的認(rèn)識
1.2 中醫(yī)對心肌缺血再灌注損傷的認(rèn)識
2、自噬的認(rèn)識
2.1 西醫(yī)對細(xì)胞自噬的認(rèn)識
2.2 中醫(yī)對細(xì)胞自噬的認(rèn)識
2.3 自噬對心肌細(xì)胞的作用
3、加味丹參飲
3.1 加味丹參飲由來方解
3.2 加味丹參飲現(xiàn)代藥理研究
3.3 加味丹參飲前期研究
4、小結(jié)
4.1 改善心功能降低CK、LDH的釋放
4.2 心肌缺血再灌注中Beclin-1、Atg5 m RNA的表達(dá)及Beclin-1、LC3B蛋白的表達(dá)
5、結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
本文編號:3749591
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