目的探討芍藥苷-6′-O-苯磺酸酯(CP-25)對(duì)胰島素抵抗人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(HASMC)的作用及部分機(jī)制。方法 1μmol/L胰島素誘導(dǎo)建立胰島素抵抗HASMC模型;葡萄糖氧化酶法檢測(cè)CP-25對(duì)胰島素抵抗HASMC葡萄糖消耗量的影響;CCK-8法、Transwell、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的增殖、遷移和凋亡變化;Western blot法測(cè)定G蛋白偶聯(lián)受體激酶2(GRK2)、胰島素受體(INSR)、磷酸化胰島素受體底物(p-IRS)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體4(GLUT4)的表達(dá);免疫共沉淀法測(cè)定GRK2與INSR、GRK2與p-IRS的相互作用。結(jié)果與胰島素模型組相比,CP-25可增加HASMC的葡萄糖消耗,抑制其異常增殖和遷移、促進(jìn)凋亡;1μmol/L胰島素作用細(xì)胞后,CP-25下調(diào)胰島素所致的GRK2的胞膜表達(dá)增高,上調(diào)IR-HASMC時(shí)INSR、p-IRS、PI3K的表達(dá)和GLUT4的胞膜表達(dá);CP-25下調(diào)IR-HASMC時(shí)增高的GRK2與INSR、GRK2與p-IRS的共表達(dá)。結(jié)論 CP-25可能通過(guò)抑制GRK2的膜轉(zhuǎn)位和表達(dá)水平,促進(jìn)INSR/IR...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞
        1.1.2 主要試劑及儀器
    1.2 方法
        1.2.1 IR模型的建立
        1.2.2 葡萄糖消耗量的檢測(cè)
        1.2.3 增殖檢測(cè)
        1.2.4 遷移檢測(cè)
        1.2.5 凋亡檢測(cè)
        1.2.6 蛋白表達(dá)檢測(cè)
        1.2.7 免疫共沉淀(CO-immunoprecipitation, CO-IP)檢測(cè)蛋白相互作用
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 CP-25對(duì)IR-HASMC葡萄糖消耗的影響
    2.2 CP-25對(duì)IR-HASMC增殖、遷移及凋亡的影響
    2.3 CP-25對(duì)IR-HASMC GRK2胞膜表達(dá)的影響
    2.4 CP-25對(duì)IR-HASMC GLUT4胞膜表達(dá)水平、INSR、PI3K、IRS和p-IRS表達(dá)水平的影響
    2.5 CP-25 對(duì)IR-HASMC GRK2 與INSR和GRK2與p-IRS相互作用的影響
3 討論



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