目的:研究脈絡寧注射液于SD大鼠神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞在糖氧剝奪/復供損傷后發(fā)揮的保護作用和抗炎機制。方法:將神經(jīng)元和星形膠質(zhì)進行分離提取及鑒定,運用Transwell建立二者的共培養(yǎng)體系。通過顯微鏡下觀察細胞形態(tài),用共聚焦顯微鏡對神經(jīng)元和星形膠質(zhì)進行鑒定。用物理法(95%N₂+5%CO₂)建立SD大鼠神經(jīng)元與星形膠質(zhì)糖氧剝奪/復供損傷模型.用CCK-8法篩選脈絡寧最佳保護濃度并測定脈絡寧不同濃度的干預對糖氧剝奪/復供損傷后的神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞保護作用。用試劑盒法測不同濃度的脈絡寧預處理后對神經(jīng)元和星形膠質(zhì)漏出量的影響。采用western blot檢測GLT-1及加入其抑制劑DHK后GLT-1的蛋白表達量。試劑盒法測糖氧剝奪/復供損傷后神經(jīng)元和星形膠質(zhì)共培養(yǎng)分泌的上清液中TNF-α、IL-1β的表達量。蛋白免疫印跡法檢測各個濃度的脈絡寧預處理的星形膠質(zhì)細胞糖氧剝奪/復供損傷后p-NF-κB p65及IκBα蛋白表達的變化。結果:提取分離并培養(yǎng)出了高純度的SD大鼠的神經(jīng)元和星形膠質(zhì),神經(jīng)元和星形膠質(zhì)共培養(yǎng)的體系成功得以建立;脈絡寧干預過的糖氧剝...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英漢縮略詞名詞對照
前言
第一部分 SD大鼠星形膠質(zhì)與神經(jīng)元的共培養(yǎng)體系的建立
    1 引言
    2 實驗材料
        2.1 實驗動物
        2.2 試劑與藥品
        2.3 主要儀器
        2.4 試劑與藥品的配制方法
    3 實驗方法
        3.1 SD大鼠神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細胞的分離方法
        3.2 神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細胞的鑒定
        3.3 神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細胞共培養(yǎng)體系的建立
    4 結果
        4.1 神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細胞的細胞形態(tài)的觀察
        4.2 SD大鼠神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞的鑒定
    5 討論
    6 小結
第二部分 脈絡寧對SD大鼠神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復供損傷的保護作用
    1 引言
    2 實驗材料
        2.1 試劑
        2.2 儀器
        2.3 試劑與藥品的配制方法
    3 實驗方法
        3.1 CCK-8 法檢測脈絡寧對星形膠質(zhì)的毒性影響
        3.2 脈絡寧對神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞糖氧剝奪/復供損傷的保護作用
        3.3 脈絡寧對SD大鼠神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復供損傷的保護作用
        3.4 統(tǒng)計學處理
    4 實驗結果
        4.1 脈絡寧對星形膠質(zhì)細胞的毒性試驗
        4.2 脈絡寧對星形膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元糖氧剝奪/復供損傷的保護作用
        4.3 脈絡寧對SD大鼠神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復供損傷的保護作用
    5 討論
    6 小結
第三部分 脈絡寧對SD大鼠神經(jīng)元細胞與星形膠質(zhì)細胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復供損傷的保護機制研究
    引言
    第一節(jié) 脈絡寧對星形膠質(zhì)細胞谷氨酸轉運體表達的研究
        1 實驗材料
        2 實驗方法
        3 實驗結果
        4 討論
        5 小結
    第二節(jié) 脈絡寧對神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復供損傷時IL-1β、TNF-α炎癥因子的影響
        1 實驗材料
        2 實驗方法
        3 實驗結果
        4 討論
    第三節(jié) 谷氨酸轉運體抑制劑DHK對神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復供損傷時TNF-α、IL-1β 炎癥因子的影響
        1 實驗材料
        2 實驗方法
        3 實驗結果
        4 討論
        5 小結
第四部分 脈絡寧對星形膠質(zhì)細胞糖氧剝奪/復供損傷時p-NF-κB p65和IκBα 蛋白表達的影響
    1 引言
    2 實驗材料
        2.1 試劑與儀器
        2.2 試劑與藥品的配制方法
    3 實驗方法
        3.1 脈絡寧對星形膠質(zhì)細胞糖氧剝奪/復供損傷模型IκBα 和p-NF-κB p65蛋白表達的影響
        3.2 BCA蛋白定量
        3.3 western blot檢測目的蛋白的表達量
        3.4 數(shù)理統(tǒng)計
    4 實驗結果
        4.1 脈絡寧對星形膠質(zhì)細胞糖氧剝奪/復供損傷IκBα 蛋白表達的影響
        4.2 脈絡寧對星形膠質(zhì)細胞糖氧剝奪/復供損傷p-NF-κB p65蛋白表達的影響
    5 小結
全文總結
參考文獻
致謝



本文編號：3745486