糖尿�。―M）是一類最常見的綜合征,是由于代謝的紊亂而引起的,其特征主要為高血糖和血脂異常。糖尿病主要分為以下兩種類型:1型糖尿病,它是胰島素依賴型糖尿病,得病人群多為青少年;2型糖尿病,源于人體無法有效的利用胰島素,即:非胰島素依賴型糖尿病,得病人群多為成年人。截止到目前為止,大約有20萬人以上被正式確認(rèn)患有糖尿病,其中2型糖尿病的人數(shù)占80%-90%。目前為止,重要的治療藥物開發(fā)靶標(biāo)是蛋白酪氨酸磷酸酶（PTPs）,將其作為治療藥物研發(fā)的目標(biāo)。PTP的作用機(jī)制:通過去磷酸化催化機(jī)制調(diào)節(jié)細(xì)胞中的不同酶。大多數(shù)的的PTP與2型糖尿病有著密切的聯(lián)系,例如SHP-1,PTP1B,在調(diào)節(jié)胰島素信號傳導(dǎo)中起著關(guān)鍵的抑制作用,因此備受關(guān)注。丁香（Clove）（桃金娘科蒲桃屬植物丁香的花蕾）,是一味食藥兩用的中藥,丁香可以起到殺菌、抗凝血的作用。在本論文中,首先我們分離純化SHP-1的催化結(jié)構(gòu)域△SHP-1及PTP1B的催化結(jié)構(gòu)域△PTP1B,然后對160種中藥進(jìn)行篩選,篩選出對SHP-1、PTP1B的抑制率＞90%的中藥--丁香。并且檢測了丁香水提液對SHP-1、PTP1B的抑制效果,結(jié)果發(fā)現(xiàn)丁香... 

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 前言
    1.1 糖尿病概述
        1.1.1 糖尿病的現(xiàn)狀
        1.1.2 糖尿病的定義
        1.1.3 糖尿病的類型
        1.1.4 糖尿病治療
    1.2 蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶概述
        1.2.1 含SH2結(jié)構(gòu)域的酪氨酸磷酸酶1(SHP-1)
        1.2.2 蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)
    1.3 SHP-1、PTP1B與2型糖尿病
    1.4 丁香
    1.5 超濾質(zhì)譜
    1.6 本論文的研究目的與意義
第二章 丁香中SHP-1抑制劑的篩選
    2.1 實(shí)驗(yàn)用品
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑及材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 試劑的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 △SHP-1的表達(dá)及分離純化
        2.2.2 △PTP1B的表達(dá)及分離純化
        2.2.3 蛋白質(zhì)濃度測定
        2.2.4 蛋白質(zhì)純度測定
        2.2.5 酶活力表征
        2.2.6 靶標(biāo)酶中藥抑制劑篩選
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 PTP1B及SHP-1催化結(jié)構(gòu)域的表達(dá)及分離純化結(jié)果.
        2.3.2 靶標(biāo)酶中藥抑制劑篩選
        2.3.3 丁香水提液對胰島素信號通路相關(guān)酪氨酸磷酸酶抑制效果的研究
        2.3.4 抑制類型的測定
    本章小結(jié)
第三章 具有協(xié)同作用多組分抑制率化合物的篩選
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2 具有協(xié)同作用多組分抑制率化合物的篩選
    本章小結(jié)
第四章 單體A對SHP-1、PTP1B抑制效果的研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)用品
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑及材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 試劑的配制
        4.2.2 對PTP的半數(shù)抑制濃度(IC50)
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 單體A對胰島素信號通路中酪氨酸磷酸酶的抑制作用研究
        4.3.2 單體A對SHP-1、PTP1B抑制類型的評價
    本章小結(jié)
第五章 丁香及其主要成分單體A在細(xì)胞水平上對酪氨酸磷酸酶的磷酸化影響
    5.1 實(shí)驗(yàn)用品
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑及材料
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 試劑的配制
        5.2.2 用單體A細(xì)胞培養(yǎng)和刺激
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 蛋白質(zhì)磷酸化水平
        5.3.2 單體A酪氨酸磷酸化水平對胰島素信號通路關(guān)鍵蛋白的影響
    本章小結(jié)
第六章 結(jié)果與討論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]東亞人群2型糖尿病易感基因的研究進(jìn)展[J]. 高帆,韓睿,宋滇平.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2015(06)
[2]Recent advances in the molecular genetics of type 2 diabetes mellitus[J]. Antonio Brunetti,Eusebio Chiefari,Daniela Foti.  World Journal of Diabetes. 2014(02)



本文編號：3719221