目的:本研究選取益氣養(yǎng)陰方及其拆方干預人急性髓系白血�。ˋML）KG-1a細胞中6種線粒體融合與分裂蛋白表達,探討中醫(yī)扶正與祛邪療法通過線粒體途徑誘導白血病細胞凋亡的作用機制,為靶向治療急性白血病提供理論依據(jù),并為提高白血病的臨床療效提供新的思路和方法。方法:1.培養(yǎng)AML KG-1a細胞作為模型。2.CCK-8法檢測不同濃度、不同時間益氣養(yǎng)陰方對KG-1a細胞體外生長的抑制作用,由此確定益氣養(yǎng)陰方的IC₅₀值和最佳干預時間。3.Annexin V/PI雙染法流式細胞術（FCM）檢測細胞凋亡情況,計算細胞凋亡率;PI單染法FCM檢測細胞周期分布情況。4.透射電鏡觀察細胞超微結構與線粒體形態(tài)學變化。5.Western blot法檢測各組Mfn-1、Mfn-2、Opa-1、Drp-1、Fis-1、Mff的蛋白表達水平。6.RT-qPCR法檢測各組Mfn-1、Mfn-2、Opa-1、Drp-1、Fis-1、Mff的mRNA表達水平。結果:1.CCK-8法示益氣養(yǎng)陰方可抑制KG-1a細胞增殖（P<0.05）,并且具有良好的時間濃度依賴效應。根據(jù)所獲IC_50... 

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
提要
abstract
中英文對照詞
引言
第一部分 實驗研究
    實驗一 細胞培養(yǎng),藥物制備與CCK-8法
        1.細胞培養(yǎng)
        2.藥物制備
        3.CCK-8法檢測細胞抑制率
    實驗二 流式細胞術檢測細胞周期與細胞凋亡率
        1.所需設備試劑：
        2.PI單染法FCM檢測細胞周期
        3.Annexin V/PI雙染法FCM檢測細胞凋亡
        4.實驗結果
    實驗三 透射電鏡觀察細胞超微結構與線粒體形態(tài)學變化
        1.實驗器材與設備
        2.主要實驗試劑
        3.透射電鏡制片步驟
        4.觀察結果
    實驗四 Western Blot檢測細胞線粒體融合與分裂蛋白的表達
        1.實驗設備
        2.實驗試劑
        3.實驗步驟
        4.實驗結果
    實驗五 RT-qPCR檢測細胞線粒體融合與分裂蛋白的m RNA表達
        1.主要實驗設備及耗材
        2.RT-qPCR實驗步驟
        3.實驗結果
第二部分 討論
    一、中醫(yī)學對急性白血病的認識
        1.歷代醫(yī)家對急性白血病的認識
        2.現(xiàn)代中醫(yī)學對急性白血病的認識
        3.AL的臨床辨證治療
        4.益氣養(yǎng)陰方簡介及組方分析
    二、益氣養(yǎng)陰方藥物的功能研究
        1.太子參
        2.黃芪
        3.白術
        4.茯苓
        5.甘草
        6.黃精
        7.女貞子
        8.墨旱蓮
        9.天冬
        10.麥冬
        11.生地黃
        12.半枝蓮
        13.白花蛇舌草
        14.蒲公英
        15.小薊
    三、線粒體融合與分裂
        1.概述
        2.線粒體融合與分裂蛋白的結構和功能
        3.線粒體融合與分裂的功能
    四、線粒體調(diào)控細胞凋亡
        1.線粒體形態(tài)結構改變與細胞凋亡
        2.線粒體融合/分裂與細胞凋亡
        3.線粒體融合與分裂蛋白對腫瘤發(fā)生和治療的作用
    五、結果探討
        1.益氣養(yǎng)陰方對KG-1a細胞生長的影響
        2.益氣養(yǎng)陰方對KG-1a細胞周期和凋亡率的影響
        3.益氣養(yǎng)陰方對KG-1a細胞超微結構和線粒體形態(tài)學的影響
        4.益氣養(yǎng)陰方對KG-1a細胞線粒體融合與分裂蛋白表達水平的影響
        5.益氣養(yǎng)陰方對KG-1a細胞線粒體融合與分裂蛋白m RNA表達水平的影響
結語
參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄
致謝
查新報告
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本文編號：3673023