柚皮素對神經(jīng)細胞糖氧剝奪/再灌注模型氧化應激作用影響的實驗研究
發(fā)布時間:2022-02-24 20:11
目的:為研究柚皮素(NAR)對處于腦缺血再灌注損傷中的神經(jīng)細胞的保護作用及其可能機制,以SD大鼠為實驗對象,采用體外原代大腦皮層神經(jīng)細胞培養(yǎng)氧糖剝奪/再灌注(oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/Rep)模型探索柚皮素干預對處于腦缺血缺氧再灌注損傷的神經(jīng)細胞在核因子E2相關因子(Nrf2)通路調控的抗氧化應激層面的作用關系,明確柚皮素在腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護作用方面的機制。方法:1、將培養(yǎng)好的在對數(shù)生長期的大鼠皮層神經(jīng)元細胞進行免疫熒光染色并進行鑒定。2、將SD大鼠的大腦皮層神經(jīng)細胞建立OGD/Rep模型。3、用不同濃度NAR干預48h后,檢測細胞活性及凋亡情況,檢測凋亡相關蛋白Capase-3、bax、bcl-2、CytC在蛋白和基因層面的表達水平。檢測各組細胞中ROS、MDA和GSH水平及SOD活性。4、通過轉染siRNA-Nrf2、OENrf2干擾Nrf2表達,進行OGD/Rep培養(yǎng)后,給予80μΜ的NAR處理48h后,檢測細胞活性及凋亡情況。檢測各組細胞ROS、MDA和GSH水平及SOD活性。檢測Nrf2蛋白核內(nèi)轉移情...
【文章來源】:廣西中醫(yī)藥大學廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
引言
1 柚皮素對神經(jīng)細胞氧糖剝奪/再灌注培養(yǎng)模型的線粒體結構及功能作用的實驗研究
1.1 材料與方法
1.1.1 材料
1.1.2 方法
1.2 結果
1.2.1 大鼠皮質神經(jīng)細胞元代培養(yǎng)及鑒定
1.2.2 柚皮素對氧糖剝奪/再灌注模型神經(jīng)元活力和凋亡的影響檢測
1.3 小結
2 基于NRF2通路的抗氧化作用研究柚皮素對氧糖剝奪/再灌注模型神經(jīng)細胞作用的實驗研究
2.1 材料與方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 結果
2.2.1 NRF2相關沉默及過度表達基因轉染效率鑒定
2.2.2 柚皮素預處理及NRF2表達水平對氧糖剝奪/再灌注大鼠大腦皮層神經(jīng)細胞活性的作用
2.2.3 柚皮素預處理及NRF2表達水平對氧糖剝奪/再灌注大鼠大腦皮層神經(jīng)細胞氧化應激作用的影響
2.2.4 柚皮素對氧糖剝奪/再灌注大鼠大腦皮層神經(jīng)細胞NRF2信號通路相關蛋白的影響
2.3 小結
3 討論
3.1 體外建立氧糖剝奪/再灌注模型的必要性
3.2 缺血性腦卒中神經(jīng)細胞缺血缺氧后再灌注中氧化應激損傷的機制
3.3 NRF2介導的抗氧化通路對缺血再灌注氧化應激中神經(jīng)細胞的的保護機制
3.4 柚皮素對缺血再灌注氧化應激中神經(jīng)細胞的的保護機制
3.5 中醫(yī)學對缺血性腦卒中及含有柚皮素相關方藥的認識
3.5.1 中醫(yī)學對于缺血性腦卒中病因病機的認識
3.5.2 溫膽湯對于風痰阻絡型中風病的治療
3.5.3 溫膽湯中含柚皮素的相關藥物對缺血性腦卒中的作用
3.6 不足與展望
全文總結
參考文獻
縮略詞表
綜述
參考文獻
致謝
個人簡歷及攻讀學位期間獲得的科研成果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]中國急性缺血性腦卒中早期血管內(nèi)介入診療指南[J]. 朱武生,劉文華,劉新峰. 中華神經(jīng)科雜志. 2015 (05)
[2]中國缺血性腦卒中和短暫性腦缺血發(fā)作二級預防指南2014[J]. 王擁軍,王春雪,繆中榮. 中華神經(jīng)科雜志. 2015 (04)
[3]尼莫地平對急性大腦中動脈M1段閉塞及其側枝循環(huán)的研究[J]. 張冰,盧振產(chǎn),王亞仙. 中風與神經(jīng)疾病雜志. 2013(05)
[4]小劑量尿激酶溶栓治腦梗死臨床療效觀察[J]. 程繼東. 當代醫(yī)學. 2013(05)
[5]淺談陳皮的藥理作用及臨床應用[J]. 王春燕. 中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠程教育. 2013(03)
[6]DWI/PWI在腦梗死缺血半暗帶量化評定中的應用[J]. 李鐵豐,謝平坤,白延軍,陳富星,李輝,鄒煜,湯升,丁穎. 中國現(xiàn)代醫(yī)生. 2012(36)
[7]依達拉奉對大鼠XRCC1和細胞凋亡的影響[J]. 王智,薛榮亮,趙紅霞,高慧,魏欣. 實用藥物與臨床. 2012(09)
[8]可卡因-苯丙胺調節(jié)轉錄肽對腦缺血-再灌注損傷小鼠腦保護機制的研究[J]. 沙杜鵑,韓勇,顧雙雙,王璐娜,朱震寒,李瑾,李啟明,張均. 中國腦血管病雜志. 2012(08)
[9]依達拉奉治療急性腦梗死臨床觀察[J]. 謝瑞萍. 臨床醫(yī)藥實踐. 2012(06)
[10]辛伐他汀對局灶性腦缺血大鼠半暗帶區(qū)緩激肽受體mRNA表達的影響[J]. 張健穎,張穎冬,高麗,顧昊,蔣藤. 中國臨床神經(jīng)科學. 2011(06)
本文編號:3643433
【文章來源】:廣西中醫(yī)藥大學廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
引言
1 柚皮素對神經(jīng)細胞氧糖剝奪/再灌注培養(yǎng)模型的線粒體結構及功能作用的實驗研究
1.1 材料與方法
1.1.1 材料
1.1.2 方法
1.2 結果
1.2.1 大鼠皮質神經(jīng)細胞元代培養(yǎng)及鑒定
1.2.2 柚皮素對氧糖剝奪/再灌注模型神經(jīng)元活力和凋亡的影響檢測
1.3 小結
2 基于NRF2通路的抗氧化作用研究柚皮素對氧糖剝奪/再灌注模型神經(jīng)細胞作用的實驗研究
2.1 材料與方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 結果
2.2.1 NRF2相關沉默及過度表達基因轉染效率鑒定
2.2.2 柚皮素預處理及NRF2表達水平對氧糖剝奪/再灌注大鼠大腦皮層神經(jīng)細胞活性的作用
2.2.3 柚皮素預處理及NRF2表達水平對氧糖剝奪/再灌注大鼠大腦皮層神經(jīng)細胞氧化應激作用的影響
2.2.4 柚皮素對氧糖剝奪/再灌注大鼠大腦皮層神經(jīng)細胞NRF2信號通路相關蛋白的影響
2.3 小結
3 討論
3.1 體外建立氧糖剝奪/再灌注模型的必要性
3.2 缺血性腦卒中神經(jīng)細胞缺血缺氧后再灌注中氧化應激損傷的機制
3.3 NRF2介導的抗氧化通路對缺血再灌注氧化應激中神經(jīng)細胞的的保護機制
3.4 柚皮素對缺血再灌注氧化應激中神經(jīng)細胞的的保護機制
3.5 中醫(yī)學對缺血性腦卒中及含有柚皮素相關方藥的認識
3.5.1 中醫(yī)學對于缺血性腦卒中病因病機的認識
3.5.2 溫膽湯對于風痰阻絡型中風病的治療
3.5.3 溫膽湯中含柚皮素的相關藥物對缺血性腦卒中的作用
3.6 不足與展望
全文總結
參考文獻
縮略詞表
綜述
參考文獻
致謝
個人簡歷及攻讀學位期間獲得的科研成果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]中國急性缺血性腦卒中早期血管內(nèi)介入診療指南[J]. 朱武生,劉文華,劉新峰. 中華神經(jīng)科雜志. 2015 (05)
[2]中國缺血性腦卒中和短暫性腦缺血發(fā)作二級預防指南2014[J]. 王擁軍,王春雪,繆中榮. 中華神經(jīng)科雜志. 2015 (04)
[3]尼莫地平對急性大腦中動脈M1段閉塞及其側枝循環(huán)的研究[J]. 張冰,盧振產(chǎn),王亞仙. 中風與神經(jīng)疾病雜志. 2013(05)
[4]小劑量尿激酶溶栓治腦梗死臨床療效觀察[J]. 程繼東. 當代醫(yī)學. 2013(05)
[5]淺談陳皮的藥理作用及臨床應用[J]. 王春燕. 中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠程教育. 2013(03)
[6]DWI/PWI在腦梗死缺血半暗帶量化評定中的應用[J]. 李鐵豐,謝平坤,白延軍,陳富星,李輝,鄒煜,湯升,丁穎. 中國現(xiàn)代醫(yī)生. 2012(36)
[7]依達拉奉對大鼠XRCC1和細胞凋亡的影響[J]. 王智,薛榮亮,趙紅霞,高慧,魏欣. 實用藥物與臨床. 2012(09)
[8]可卡因-苯丙胺調節(jié)轉錄肽對腦缺血-再灌注損傷小鼠腦保護機制的研究[J]. 沙杜鵑,韓勇,顧雙雙,王璐娜,朱震寒,李瑾,李啟明,張均. 中國腦血管病雜志. 2012(08)
[9]依達拉奉治療急性腦梗死臨床觀察[J]. 謝瑞萍. 臨床醫(yī)藥實踐. 2012(06)
[10]辛伐他汀對局灶性腦缺血大鼠半暗帶區(qū)緩激肽受體mRNA表達的影響[J]. 張健穎,張穎冬,高麗,顧昊,蔣藤. 中國臨床神經(jīng)科學. 2011(06)
本文編號:3643433
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