目的探討補(bǔ)腎壯筋湯抑制炎癥介導(dǎo)骨關(guān)節(jié)炎軟骨基質(zhì)降解的作用機(jī)制研究方法1.選取2月齡SPF級(jí)雄性SD大鼠共45只,采用隨機(jī)數(shù)字法將所選取的大鼠均分為三組,即空白組（15只）和造模組（30只）,空白組行假手術(shù)（生理鹽水灌胃）,造模組采用改良Hulth法建立動(dòng)物模型,隨機(jī)數(shù)字表法分為模型組（15只,生理鹽水灌胃）和補(bǔ)腎壯筋湯組（15只,補(bǔ)腎壯筋湯灌胃）,灌胃1次/日,連續(xù)灌胃12周。HE染色觀察關(guān)節(jié)軟骨組織形態(tài)、結(jié)構(gòu)的變化,通過甲苯胺藍(lán)染色法檢測(cè)關(guān)節(jié)軟骨中軟骨細(xì)胞數(shù)量以及蛋白多糖等相應(yīng)改變,采用ELISA法檢測(cè)關(guān)節(jié)滑膜組織中IL-1β、TNF-α、MMP-13的表達(dá)量。2.機(jī)械-II型膠原酶消化法,消化SPF級(jí)四周齡SD大鼠,分離出軟骨細(xì)胞,LPS誘導(dǎo)大鼠軟骨細(xì)胞體建立炎癥細(xì)胞模型。體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞,分為空白組、模型組（10ng/ml LPS）、抑制劑組（10 ng/ml U0126干預(yù)30 min后加入10 ng/ml LPS）、氨基葡萄糖組（10 ng/ml LPS+1.35μg/ml氨基葡萄糖）、補(bǔ)腎壯筋湯組（10 ng/mlLPS+200μg/ml補(bǔ)腎壯筋湯）,干預(yù)8 h。II型膠... 

【文章來源】：福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
實(shí)驗(yàn)一 補(bǔ)腎壯筋湯對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨基質(zhì)降解的影響
    研宄目的
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑、耗材
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    3 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
        3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模、分組與給藥
        3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取材
        3.3 指標(biāo)檢測(cè)
        3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 HE染色觀察膝關(guān)節(jié)軟骨組織形態(tài)
        4.2 甲苯胺藍(lán)染色觀察關(guān)節(jié)軟骨蛋白多糖變化
        4.3 ELISA檢測(cè)滑膜組織IL-1 β、TNF-α、MMP-13表達(dá)
    5. 討論
        5.1 改良Hulth法建立骨關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型
        5.2 軟骨退變與軟骨基質(zhì)穩(wěn)態(tài)失衡的關(guān)系
        5.3 滑膜炎癥與軟骨基質(zhì)穩(wěn)態(tài)失衡的關(guān)系
        5.4 補(bǔ)腎壯筋湯調(diào)控軟骨基質(zhì)穩(wěn)態(tài)失衡抑制軟骨退變的作用機(jī)制
    6. 小結(jié)
實(shí)驗(yàn)二 補(bǔ)腎壯筋湯對(duì)軟骨基質(zhì)降解蛋白MMPs與ADAMTS表達(dá)的影響
    研宄目的
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
        2.1 實(shí)驗(yàn)試劑的配制
        2.2 大鼠軟骨細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定
        2.3 補(bǔ)腎壯筋湯干預(yù)炎癥性軟骨細(xì)胞模型濃度的確立
        2.4 實(shí)驗(yàn)分組及干預(yù)方法的確立
        2.5 補(bǔ)腎壯筋湯對(duì)炎癥性軟骨細(xì)胞模型影響的檢測(cè)
        2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 軟骨細(xì)胞鑒定
        3.2 補(bǔ)腎壯筋湯干預(yù)LPS誘導(dǎo)炎癥性軟骨細(xì)胞模型濃度的確定
        3.3 補(bǔ)腎壯筋湯干預(yù)后各組軟骨細(xì)胞相關(guān)蛋白表達(dá)
        3.4 補(bǔ)腎壯筋湯干預(yù)后各組軟骨細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)
    4 討論
        4.1 軟骨細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定
        4.2 LPS介導(dǎo)軟骨細(xì)胞表達(dá)軟骨基質(zhì)降解蛋白的作用途徑
        4.3 炎癥因子介導(dǎo)軟骨基質(zhì)降解的作用途徑
        4.4 基于骨關(guān)節(jié)炎中醫(yī)病理特點(diǎn)的補(bǔ)腎壯筋湯組方依據(jù)
        4.5 補(bǔ)腎壯筋湯調(diào)節(jié)炎癥介導(dǎo)軟骨基質(zhì)降解蛋白表達(dá)抑制骨關(guān)節(jié)炎筋骨失養(yǎng)的作用機(jī)制
    5. 小結(jié)
結(jié)論
不足與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3635550