目的:1.研究越鞠甘麥大棗湯對(duì)皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系（HT22）細(xì)胞損傷的神經(jīng)保護(hù)作用。2.研究越鞠甘麥大棗湯對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)的HT22細(xì)胞損傷的神經(jīng)保護(hù)作用。3.研究越鞠甘麥大棗湯對(duì)脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞（BV2）炎癥模型的保護(hù)作用。方法:HT22細(xì)胞系、BV2細(xì)胞系無(wú)菌培養(yǎng),制備越鞠甘麥大棗湯水提液和含藥血清,實(shí)驗(yàn)包括3個(gè)部分:1.以高濃度皮質(zhì)酮（CORT）建立細(xì)胞損傷模型,實(shí)驗(yàn)分為5組:正常組（不含皮質(zhì)酮的正常細(xì)胞組）、模型組（皮質(zhì)酮損傷的細(xì)胞組）、越鞠甘麥大棗湯含藥血清組（1%、5%、10%）,四甲基偶氮唑鹽法（MTT）檢測(cè)實(shí)驗(yàn)各組細(xì)胞存活率,酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）檢測(cè)實(shí)驗(yàn)各組乳酸脫氫酶（LDH）漏出量,蛋白免疫印跡法（Westernblot）檢測(cè)各組細(xì)胞AKT、p-AKT蛋白的表達(dá)。2.以高濃度谷氨酸建立細(xì)胞損傷模型,實(shí)驗(yàn)分為7組:正常組、模型組、越鞠甘麥大棗湯含藥血清組（1%、5%、10%）、越鞠甘麥大棗湯水煎劑組、尼莫地平組。MTT法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)各組細(xì)胞存活率;ELISA法檢測(cè)乳酸脫氫酶（LDH）釋放率及細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基（ROS）的水平;Wester... 

【文章來(lái)源】：南京中醫(yī)藥大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１不同濃度的ＣＯＲＴ對(duì)ＨＴ２２細(xì)胞成活率的影響

＾?＾?＾?＾??ＣＯＲＴ?Ｍｍ〇ｌ／Ｌ??圖２．１不同濃度的ＣＯＲＴ對(duì)ＨＴ２２細(xì)胞成活率的影響。與正常組相比，采用單因素方差分析結(jié)果顯示，不同濃度的ＣＯＲＴ??組成活率顯著降低，＊＊＊＊Ｐ＜〇．〇〇〇１。??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＯＲＴ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｓｕｒｖｉｖａｌ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ＨＴ２２?ｃｅｌｌｓ．?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ?ｎｏｒｍａｌ?ｇｒｏｕｐ，?ｔｈｅ??ｏｎｅ－ｗａｙ?ＡＮＯＶＡ?ｓｈｏｗｅｄ?ｔｈａｔ?ｔｈｅ?ｓｕｒｖｉｖａｌ?ｒａｔｅ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＯＲＴ?ｗａｓ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ?ｒｅｄｕｃｅｄ．?＊＊＊＊?Ｐ＜０．０００１．??２．?３．?２越鞠甘麥大棗湯含藥血清對(duì)ＣＯＲＴ誘導(dǎo)損傷的ＨＴ２２細(xì)胞存活率的影響??按照“２．２．４”項(xiàng)下分組方法共培養(yǎng)各組細(xì)胞２４ｈ后，采用ＭＴＴ法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)各組ＨＴ２２細(xì)??胞的活性，并計(jì)算各組成活率，結(jié)果如圖２．２所示。與正常組相比，ＣＯＲＴ誘導(dǎo)損傷的模??型組細(xì)胞成活率顯著下降（Ｐ０．０００１）；與模型組相比，不同濃度的越鞠甘麥大棗湯含藥??血清組細(xì)胞存活率顯著上升（Ｐ＜〇．〇〇〇ｌ），且呈濃度依賴(lài)性。??＊＊＊＊??１?？０１?＃＃＃＃??？ｆ?審?Ｘ?＿??Ｊ?０?５?■??＊０）??°??０．０?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??，，＃，，??ＣＯＲＴ（７０〇Ｍｍｏｌ／Ｌ）??圖２．２不同濃度的越鞠甘麥大棗湯對(duì)細(xì)胞成活率的影響。與正常組相比

?２．?３．?３越鞠甘麥大棗湯含藥血清對(duì)ＣＯＲＴ損傷的ＨＴ２２細(xì)胞ＬＤＨ漏出量的影響??分別測(cè)定各組細(xì)胞上清中和細(xì)胞內(nèi)ＬＤＨ的值，結(jié)果如圖２．３所示；按照“２．２．６”項(xiàng)下公??式計(jì)算各組細(xì)胞ＬＤＨ漏出量，結(jié)果如圖２．４所示。與正常組相比，ＣＯＲＴ模型組ＬＤＨ漏??出量顯著增加（Ｐ＜〇．〇】）；與模型組相比，越鞠甘麥大棗湯含藥血清組ＬＤＨ漏出量顯著減??少（尸＜０．０００１）。??Ａ??６－Ｊ?＿＾??＃＃＃＃?Ｂ??．４。１??ｔ＾－?＾?Ｉ?，?？??ｃｂ?干丁丁??〇?．?三３０－?？＿?邋丄羼?下?”??〇�。�，?１，．１?１?，?２５?’?＞?？??圖２．３上清中和細(xì)胞內(nèi)ＬＤＨ值。Ａ：實(shí)驗(yàn)各組細(xì)胞上清中ＬＤＨ含量，與正常組相比，模型組細(xì)胞上清中ＬＤＨ含量顯著??上升，＊＊Ｐ＜０．０１；與模型組相比，不同濃度越鞠Ｉｔ麥大棗湯含藥血清組細(xì)胞上清中ＬＤＨ含量顯著下降，＃＃＃＃／＞＜０．０００１；??Ｂ：實(shí)驗(yàn)各組細(xì)胞內(nèi)ＬＤＨ含量

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]產(chǎn)后抑郁子代行為的分子機(jī)制及越鞠甘麥大棗湯快速干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 吳如燕.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[2]越鞠甘麥大棗湯對(duì)產(chǎn)后抑郁模型小鼠的快速抗抑郁作用及機(jī)制研究[D]. 夏寶妹.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3620749