目的:體外研究草蓯蓉多糖（BRPS）對(duì)叔丁基過氧化氫（TBHP）引起血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)機(jī)制。方法:通過TBHP損傷內(nèi)皮細(xì)胞的方法構(gòu)建血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡模型,用四甲基偶氮唑鹽比色（MTT）法觀察BRPS對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的毒性作用;比色法觀察細(xì)胞內(nèi)丙二醛（MDA）、還原型谷胱甘肽（GSH）的含量以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性;采用DCFH-DA熒光染色法觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的活性氧（ROS）變化;采用Hoechst和TUNEL熒光染色觀察TBHP引起的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡;采用JC-1熒光染色方法來觀察內(nèi)皮細(xì)胞線粒體跨膜電位的改變;利用Western blot檢測(cè)細(xì)胞tBid、Bax、Bcl-2、Cleaved caspase3、Cleaved caspase8、Cleaved caspase9、Procaspase3、Procaspase8、Procaspase9和細(xì)胞色素c（Cyto c）蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:與TBHP損傷組比較,BRPS能明顯升高細(xì)胞存活率（P<0.05）;明顯降低內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)MDA水平（P<0.05）,提高內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)GSH水平與SOD活性（P<0.05... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．同一時(shí)間不同濃度的ＴＢＨＰ對(duì)ＨＵＶＥＣｓ細(xì)胞的影響??

圖１．同一時(shí)間不同濃度的ＴＢＨＰ對(duì)ＨＵＶＥＣｓ細(xì)胞的影響??３．?１．２同一濃度不同時(shí)間的ＴＢＨＰ對(duì)ＨＵＶＥＣｓ細(xì)胞的影響??如圖２所示，當(dāng)ＴＢＨＰ濃度相同時(shí)，隨著ＴＢＨＰ損傷時(shí)間的加長(zhǎng)，ＨＵＶＥＣｓ??細(xì)胞存活率逐漸降低，并且呈時(shí)間依賴性趨勢(shì)。當(dāng)ＴＢＨＰ損傷時(shí)間為０．５、２、４、８、??１６??

３．?３熒光顯微鏡觀察??３．?３．?１?ＨＵＶＥＣｓ?細(xì)胞?Ｈｏｃｈｅｓｔ３３３４２?染色結(jié)果??如圖３所示，正常組細(xì)胞染色均勻，數(shù)量較多并呈微弱藍(lán)色熒光。ＴＢＨＰ損傷??組可見細(xì)胞核發(fā)生碎裂、固縮、核內(nèi)呈顆粒狀明亮藍(lán)色熒光，細(xì)胞數(shù)量明顯減少，??細(xì)胞凋亡明顯增加。ＢＲＰＳ組隨著藥物濃度的升高，細(xì)胞數(shù)量逐漸恢復(fù)，核內(nèi)明亮??熒光逐漸減弱，凋亡呈降低趨勢(shì)。??１９??

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號(hào)：3596047