目的:建立高相液相色譜法測定苦檀子中β-谷甾醇含量,并對提取方法進(jìn)行優(yōu)化。方法:采用C18反相色譜柱對β-谷甾醇含量進(jìn)行測定,流動相為甲醇-乙腈（60∶40）,檢測波長210 nm,柱溫箱溫度40℃,流速1.2 mL/min;以皂化時間（1、2、3、4 h）、皂化溫度（70、80、90、100℃）、皂化液加入體積（4、6、8、10 mL）為正交試驗考察因素和水平,優(yōu)選苦檀子的皂化方法。結(jié)果:β-谷甾醇在0.05～1μg范圍內(nèi),質(zhì)量濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系（R2=0.9995）,儀器檢出限為0.027μg,精密度（RSD）為0.51%;由正交試驗直觀分析可知,各因素對提取工藝的影響順序為皂化液加入體積>皂化時間>皂化溫度;根據(jù)直觀分析K值確定最佳制備工藝條件為:加入10 mL皂化液,皂化時間2 h,皂化溫度80℃。測得苦檀子中β-谷甾醇含量為0.020%,方法平均回收率為118.8%。結(jié)論:基于正交試驗確定的皂化反應(yīng)法用HPLC測定苦檀子中β-谷甾醇含量,操作簡便快速,可為苦檀子中β-谷甾醇含量測定提供依據(jù)。 

【文章來源】：北方藥學(xué). 2020,17(07)

【文章頁數(shù)】：3 頁

【部分圖文】：

β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品（A）、苦檀子皂化后收集的正己烷液（B）以及乙醇超聲處理得到的苦檀子樣品（C）的HPLC圖譜

根據(jù)“1.2.2”，考察皂化液加入體積對β-谷甾醇提取量的影響，結(jié)果見圖2。由圖2可知，隨著加入皂化液的體積逐漸增大，β-谷甾醇的提取量逐漸升高。當(dāng)加入的皂化液體積達(dá)到10 m L時，β-谷甾醇的提取量最大。繼續(xù)加入皂化液，β-谷甾醇的提取量降低并趨于平穩(wěn)。因此，選擇最佳加入皂化液體積為10 mL。

根據(jù)“1.2.2”，考察皂化時間對β-谷甾醇提取量的影響，結(jié)果見圖3。由圖3可知，當(dāng)加入皂化液的體積為10 mL，皂化溫度為80℃時，隨著皂化時間的延長，β-谷甾醇的提取量先升高；當(dāng)皂化時間為2 h時，β-谷甾醇的提取量最大；繼續(xù)延長皂化時間，β-谷甾醇提取量呈現(xiàn)下降趨勢并趨于平穩(wěn)。因此，選擇最佳皂化時間為2 h。


本文編號：3524009