發(fā)布時(shí)間：2021-11-18 16:53

　　背景:血管緊張素II（Angiotensin II,AngII）誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞（Vascular smooth muscle cell,VSMC）異常增殖、遷移和表型轉(zhuǎn)化,是高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化等血管重構(gòu)性疾病發(fā)生發(fā)展的重要病理性基礎(chǔ)。最近有文獻(xiàn)報(bào)道,AngII誘導(dǎo)的VSMC增殖和遷移改變與激活NF-κB途徑上調(diào)縫隙連接蛋白43（Connexin43,Cx43）表達(dá)有關(guān)。中藥有效成分吳茱萸次堿（Rutaecarpine,Rut）作為一種降壓藥物被發(fā)現(xiàn)有抑制血管重構(gòu)效應(yīng)。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),Rut可抑制Ox-LDL誘導(dǎo)的VSMC增殖,其機(jī)制與激活辣椒素受體（Transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1）抑制Cx43的表達(dá)有關(guān)。近來,AngII誘導(dǎo)的VSMC衰老在各種血管重構(gòu)性疾病中的作用也引起廣泛關(guān)注,其機(jī)制與下調(diào)長(zhǎng)壽蛋白SIRT1表達(dá)有關(guān)。我們前期還發(fā)現(xiàn),Rut可抑制高糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞衰老,其機(jī)制與激活TRPV1上調(diào)SIRT1的表達(dá)有關(guān)。目的:探究吳茱萸次堿對(duì)AngII誘導(dǎo)的VSMC增殖、遷移和表型改變的影響及其機(jī)制是否涉及激活T... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
第2章 材料與試劑
    2.1 主要的材料與試劑
    2.2 主要儀器和設(shè)備
    2.3 主要試劑的配制
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.1 大鼠原代胸主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞獲取及培養(yǎng)：組織塊貼壁法
        3.1.2 細(xì)胞復(fù)蘇
        3.1.3 細(xì)胞傳代
    3.2 實(shí)驗(yàn)分組與處理方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)分組與內(nèi)容
        3.2.2 原代細(xì)胞的鑒定
        3.2.3 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力
        3.2.4 EdU試劑盒檢測(cè)VSMC內(nèi)DNA復(fù)制活性
        3.2.5 流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞周期變化
        3.2.6 劃痕愈合實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞遷移
        3.2.7 Transwell小室(孔徑8μm)遷移實(shí)驗(yàn)
        3.2.8 SA-β-Gal染色
        3.2.9 細(xì)胞內(nèi)活性氧的檢測(cè)
        3.2.10 Western blot 檢測(cè)平滑肌細(xì)胞中 α-SMA、Calponin、Cx43、Cyclin D1SIRT1、P53、P21 及 P-AMPK 蛋白表達(dá)水平
        3.2.11 Westernblot結(jié)合免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)P65核轉(zhuǎn)位
        3.2.12 數(shù)據(jù)處理
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    第一部分 TRPV1介導(dǎo)Rut抗VSMC增殖、遷移和表型轉(zhuǎn)化：抑制NF-κB/Cx43途徑
        4.1 培養(yǎng)原代VSMC及鑒定
        4.2 Rut對(duì)AngII誘導(dǎo)的VSMC增殖的影響
        4.3 Rut對(duì)AngII誘導(dǎo)的VSMC周期分布的影響
        4.4 Rut對(duì)AngII誘導(dǎo)的VSMC遷移的影響
        4.5 Rut對(duì)AngII誘導(dǎo)的VSMC表型的影響
        4.6 Rut抑制AngII誘導(dǎo)的Cx43表達(dá)上調(diào)
        4.7 Rut抑制AngII誘導(dǎo)的NF-κBP65轉(zhuǎn)位
    第二部分 TRPV1介導(dǎo)Rut的抗VSMC衰老：激活A(yù)MPK/SIRT1途徑
        4.8 Rut對(duì)AngII誘導(dǎo)的VSMC衰老的影響
        4.9 Rut抑制AngII誘導(dǎo)的VSMC衰老的機(jī)制：上調(diào)SIRT1表達(dá)而抑制P53/P21通路
        4.10 Rut通過AMPK通路上調(diào)SIRT1表達(dá)
第5章 討論
第6章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 下一步研究方向
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]p38-p53-p21信號(hào)通路參與調(diào)控血管緊張素-Ⅱ誘導(dǎo)的人血管平滑肌細(xì)胞衰老[J]. 廉亞茹,劉新華,韓苗,潘禮龍,胡金鋒,魏剛,倪挺.  復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(06)
[2]Rutaecarpine Inhibits Angiotensin Ⅱ-Induced Proliferation in Rat Vascular Smooth Muscle Cells[J]. 李艷菊,張鋒,龔其海,吳芹,余麗梅,孫安盛.  Chinese Journal of Integrative Medicine. 2014(09)
[3]Losartan reduced connexin43 expression in left ventricular myocardium of spontaneously hypertensive rats[J]. Li-li ZHAO,Hong-juan CHEN,Jun-zhu CHEN,Min YU,Yun-lan NI,Wei-fang ZHANG(Department of Cardiology,the First Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310003,China).  Journal of Zhejiang University（Science B:An International Biomedicine & Biotechnology Journal）. 2008(06)



本文編號(hào)：3503257