黃精是我國(guó)衛(wèi)生部認(rèn)定的藥食同源資源,在天然藥物和功能食品等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。皂苷是黃精中的主要活性物質(zhì),由于結(jié)構(gòu)多樣,其抗菌、抗腫瘤的機(jī)制也各不相同。對(duì)這些機(jī)制進(jìn)行研究,將為黃精資源的綜合利用提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。本論文以九華黃精為原料,制備了高純度的薯蕷皂苷和甲基原薯蕷皂苷,并研究了其抑癌活性及相關(guān)分子機(jī)制,主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:（1）黃精皂苷的分離純化。使用單因素和響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn),確定了超聲輔助提取黃精皂苷的最佳工藝條件:乙醇濃度78%、料液比1:20 g/mL、超聲溫度58°C、超聲時(shí)間75 min,在此條件下的皂苷得率為2.72%;在此基礎(chǔ)上,利用硅膠色譜柱、葡聚糖凝膠柱層析技術(shù)對(duì)提取物中的皂苷進(jìn)行分離,得到純度分別為98.05%和95.13%的薯蕷皂苷和甲基原薯蕷皂苷,并使用UPLC-TOF-MS/MS和NMR技術(shù)對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定。（2）薯蕷皂苷對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2的抑制及分子機(jī)制。細(xì)胞活性及周期分析表明,薯蕷皂苷對(duì)HepG2細(xì)胞的半抑制濃度為8.34μM,可將細(xì)胞周期阻滯在G2/M期;當(dāng)處理濃度為9μM時(shí),早期凋亡細(xì)胞比率可達(dá)34.0%。薯蕷皂苷通過(guò)調(diào)節(jié)CHK... 

【文章來(lái)源】：合肥工業(yè)大學(xué)安徽省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

薯蕷皂苷元標(biāo)準(zhǔn)曲線

（3）超聲溫度對(duì)黃精皂苷提取得率的影響在料液比為 1:20 g/mL、乙醇濃度 80%、超聲時(shí)間 50 min 的條件下，比較不同的超聲溫度（30、40、50、60、70 ℃）對(duì)黃精皂苷提取得率的影響，結(jié)果如圖 2.2C 所示。結(jié)果表明，在 60 ℃之前，隨著溫度的升高，黃精皂苷的得率不斷升高，當(dāng)超聲溫度達(dá)到 60 ℃時(shí)，皂苷的提取得率達(dá)到最大值 1.73%。而溫度高于 60 ℃時(shí)，得率開(kāi)始呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，可能是溫度過(guò)高導(dǎo)致皂苷的結(jié)構(gòu)受到了一定程度的破壞。因此，本試驗(yàn)中選取的最佳超聲溫度為 60 ℃。（4）超聲時(shí)間對(duì)黃精皂苷提取得率的影響在料液比為 1:20 g/mL、乙醇濃度 80%和超聲溫度 60 ℃條件下，比較不同的超聲時(shí)間（40、50、60、70、80 min）對(duì)黃精皂苷得率的影響，結(jié)果如圖 2.2D所示，隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)，黃精皂苷得率先逐步升高后略有降低，70 min 時(shí)，達(dá)到最高值。這是因?yàn)槌晻r(shí)間的增加可以使黃精粉末與乙醇溶液更充分地接觸從而促進(jìn)皂苷的溶出，但當(dāng)處理時(shí)間過(guò)長(zhǎng)時(shí)，分子量較大、不穩(wěn)定的皂苷易發(fā)生分解，且伴隨著其他醇溶物質(zhì)的不斷溶出，從而降低了黃精皂苷的提取得率。因此，試驗(yàn)選取 70 min 作為黃精皂苷的最佳超聲時(shí)間。

的提取得率隨乙醇濃度的升高先上升后平緩下降，并隨超聲時(shí)間的不斷增加而呈現(xiàn)緩慢上升后逐步下降的趨勢(shì)。超聲時(shí)間越長(zhǎng)，會(huì)有更多的物質(zhì)溶出，但同時(shí)，長(zhǎng)時(shí)間的超聲影響可能會(huì)使皂苷的內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，其他物質(zhì)的溶出也限制了皂苷得率的提高。如圖 2.3D，料液比和超聲時(shí)間也會(huì)影響黃精皂苷的提取得率。由于雜質(zhì)的不斷溶出，黃精皂苷的提取得率隨液料比的增加呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，超聲時(shí)間延長(zhǎng)時(shí)也呈現(xiàn)出相似的趨勢(shì)。料液比和超聲溫度對(duì)黃精皂苷提取得率的影響如圖 2.3E。當(dāng)物料質(zhì)量一定時(shí)，適度提高的乙醇溶液的體積和超聲溫度會(huì)使皂苷的提取得率上升，然而過(guò)多的乙醇溶液和過(guò)高的超聲溫度會(huì)對(duì)黃精皂苷的提取得率產(chǎn)生一定影響。黃精皂苷提取得率隨超聲溫度升高及超聲時(shí)間延長(zhǎng)變化的趨勢(shì)如圖 2.3F 所示。適宜條件下的超聲輔助可以有效提高提取的質(zhì)量和效率，但過(guò)高的超聲溫度和過(guò)長(zhǎng)的超聲時(shí)間不能將提取得率無(wú)限提高，反而會(huì)導(dǎo)致目標(biāo)提取物結(jié)構(gòu)的破壞和提取得率的降低。如圖所示，皂苷的提取得率在超聲溫度的升高時(shí)呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，此外，當(dāng)超聲時(shí)間延長(zhǎng)時(shí)，得率先上升后下降。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號(hào)：3472760