目的:觀察蘇木提取物對體內(nèi)外膽固醇逆轉(zhuǎn)運及相關(guān)分子信號通路的影響,探討蘇木提取物抗動脈粥樣硬化的作用機制。方法:實驗一:人THP-1單核細胞PMA誘導(dǎo)分化為巨噬細胞,應(yīng)用50μg/ml ox-LDL和0.2μCi/ml ³H膽固醇孵育細胞,應(yīng)用不同濃度和不同作用時間的蘇木提取物含藥血清處理細胞。油紅O染色鑒定泡沫細胞的形態(tài);HPLC檢測細胞內(nèi)膽固醇水平;閃爍計數(shù)法檢測細胞內(nèi)膽固醇流出率。實驗二:40只雄性SD大鼠隨機分為空白組、模型組、蘇木組、辛伐他汀組,每組10只�？瞻捉M給予普通飼料喂養(yǎng),其余3組給予高脂飼料及腹腔注射維生素D₃復(fù)制動脈粥樣硬化模型,模型復(fù)制時間12周。第13周空白組及模型組大鼠給予等體積羧甲基纖維素鈉溶液灌胃;蘇木組給予蘇木提取物混懸劑灌胃;辛伐他汀組給予辛伐他汀混懸劑灌胃,連續(xù)給藥4周。第16周末,大鼠麻醉稱重取材,HE染色觀察大鼠主動脈及肝臟形態(tài)學(xué)變化;全自動生化儀測定血清TG、TC、LDL-C、HDL-C水平;ELISA法檢測血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平;免疫組化法觀察大鼠腹主動脈CD40L蛋白表達;We... 

【文章來源】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

ox-LDL處理組（×200）

黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文結(jié)果提取物含藥血清對泡沫細胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積的影響MA 誘導(dǎo) THP-1 單核細胞 24h 后可見細胞呈梭形貼壁生長巨噬細胞。分化成熟的巨噬細胞，應(yīng)用 ox-LDL（50μ，細胞油紅 O 染色，光鏡下可見細胞內(nèi)有大量紅色脂質(zhì)積增大，符合泡沫細胞的形態(tài)特點（圖 1）。20%蘇木理荷脂細胞 24h 后，光鏡下可見細胞中油紅 O 染色陽性細胞內(nèi)紅色脂質(zhì)顆粒明顯減少（圖 2）。

作用時間對細胞膽固醇含量的影響HP-1 單核細胞分化成巨噬細胞，應(yīng)用 導(dǎo)細胞形成荷脂巨噬泡沫細胞，應(yīng)用0h、6h、12h、24h，高效液相色譜檢測C，結(jié)果顯示蘇木提取物含藥血清呈時 2，圖 4。清不同作用時間對細胞膽固醇含量的 0.01vs6h； #P＜ 0.01,△ P＜ 0.05vs12h(mg/g) FC(mg/g) CE(m0±18.13 193.50±18.08 286.000±21.99 188.00±16.49 272.50±23.40*▲143.50±14.54*▲197.33±3±15.87*#121.33±13.44*△157.00±


本文編號：3388584