目的:探討蛇葡萄素（AMP）對(duì)人前列腺癌DU145細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響,研究其對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGF-β）誘導(dǎo)的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）模型的作用。方法:用不同濃度的AMP處理DU145細(xì)胞,采用CCK-8法和克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖情況;Transwell法檢測(cè)細(xì)胞的遷移和侵襲能力;細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)表征不同濃度TGF-β處理后細(xì)胞內(nèi)E-cadherin和Vimentin表達(dá)情況,確定EMT模型最佳誘導(dǎo)濃度;Western blot法進(jìn)一步檢測(cè)加藥后EMT模型E-cadherin和Vimentin表達(dá)情況。結(jié)果:AMP對(duì)DU145細(xì)胞增殖具有顯著的抑制作用,24、48、72 h的IC50分別為35.62、32.71、28.43μg·mL^-1;Transwell實(shí)驗(yàn)顯示AMP處理后穿膜細(xì)胞數(shù)明顯減少,顯著抑制細(xì)胞的遷移和侵襲能力;細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)表征發(fā)現(xiàn)TGF-β誘導(dǎo)后細(xì)胞內(nèi)E-cadherin表達(dá)下調(diào),Vimentin表達(dá)上調(diào),確定10ng·mL^-1為TGF-β誘導(dǎo)EMT模型的最佳濃度。Western blot法檢測(cè)顯示,與對(duì)照組相比,... 

【文章來源】：藥學(xué)與臨床研究. 2020,28(04)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

蛇葡萄素對(duì)人前列腺癌DU145細(xì)胞增殖能力的影響

AMP是藥食兩用植物藤茶中含量甚高的一種黃酮類化合物，其食用的安全性也已得到證明[6]。大量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，AMP作為藤茶中的主要生物活性成分，具有安全有效、多途徑多靶點(diǎn)的藥理作用，雖與楊梅素的結(jié)構(gòu)相似，但對(duì)前列腺上皮細(xì)胞的毒性低于楊梅素[7]。在本研究中，AMP可有效抑制前列腺癌DU145細(xì)胞的增殖和集落形成，并呈現(xiàn)一定的濃度和時(shí)間依賴性，提示AMP可能對(duì)前列腺癌具有一定的治療價(jià)值。侵襲和轉(zhuǎn)移是前列腺癌惡化的重要指標(biāo)，也是導(dǎo)致前列腺癌患者死亡的主要原因，因此，抑制癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移成為治療前列腺癌的潛在靶點(diǎn)之一[8]。腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲是一種復(fù)雜的生物學(xué)行為，主要包括細(xì)胞黏附、基質(zhì)降解和遷移運(yùn)動(dòng)等多個(gè)環(huán)節(jié)[9,10]。而且腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲速度越快，腫瘤轉(zhuǎn)移能力越強(qiáng)，其惡性程度越高。本研究結(jié)果顯示，在Transwell實(shí)驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，經(jīng)AMP處理后，從上室穿過基底膜的細(xì)胞數(shù)均顯著減少，并且隨著AMP濃度增加穿膜細(xì)胞數(shù)也依次減少，表明了AMP能夠有效抑制DU145細(xì)胞的遷移和侵襲。

1982年Greenburg和Hay首次提出上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）這一概念，是指上皮細(xì)胞在一定條件下轉(zhuǎn)化成間質(zhì)細(xì)胞的過程，使之具有更強(qiáng)的遷移、侵襲及抗凋亡能力，并以上皮表型的缺失和間質(zhì)表型的獲得為主要特征[11]。上皮源性的惡性腫瘤發(fā)生EMT能夠使腫瘤細(xì)胞擺脫細(xì)胞-細(xì)胞間連接而更具侵襲性，因此在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中起著重要作用。EMT的主要特點(diǎn)是上皮表型標(biāo)志物E-cadherin表達(dá)減少和間質(zhì)表型標(biāo)志物N-cadherin、Vimentin表達(dá)增加[12]。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）已被證實(shí)為多種腫瘤EMT發(fā)生的主要誘導(dǎo)劑，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移[13]。本研究采用TGF-β為誘導(dǎo)劑，以E-cadherin表達(dá)下調(diào)和Vimentin表達(dá)上調(diào)為指標(biāo)，建立了人前列腺癌DU145細(xì)胞的EMT模型。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3387019