目的:構(gòu)建體外人牙髓細(xì)胞（human dental pulp cells,h DPCs）炎癥模型,研究姜黃素對(duì)該模型h DPCs炎癥相關(guān)細(xì)胞因子m RNA表達(dá)水平及成骨分化的影響。方法:1、CCK8法檢測(cè)不同濃度大腸桿菌來(lái)源的LPS（Escherichia coli lipopolysaccharide,E.coli LPS）對(duì)h DPCs的細(xì)胞毒性作用。2、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR）檢測(cè)不同濃度E.coli LPS刺激h DPCs 3、6、12、24h后炎癥相關(guān)因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及COX-2的m RNA表達(dá)水平,ELISA檢測(cè)E.coli LPS刺激h DPCs其IL-6的蛋白表達(dá)水平,從而篩選構(gòu)建體外h DPCs炎癥環(huán)境最適宜的E.coli LPS濃度及相應(yīng)刺激時(shí)間。3、CCK8法檢測(cè)不同濃度姜黃素作用h DPCs 24、48h后細(xì)胞活力值。4、Real-time PCR檢測(cè)姜黃素對(duì)炎癥環(huán)境下h DPCs IL-... 

【文章來(lái)源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CCK8檢測(cè)LPS對(duì)人牙髓細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用

18圖 1-2 RT-PCR 檢測(cè) LPS 刺激人牙髓細(xì)胞不同時(shí)間后炎癥因子的 mRNA 表達(dá)。（*表示該組與不含 LPS 對(duì)照組比較，p＜0.05）3.2 LPS 刺激 hDPCs 24 h 后細(xì)胞上清液中 IL-6 的蛋白表達(dá)水平。0，1 或 10 μg/ml E.coli LPS 分別刺激 hDPCs 24 h，通過(guò) ELISA 檢測(cè)細(xì)胞上清

圖 1-3 ELISA 檢測(cè) LPS 刺激 hDPCs 24 h 后 IL（*表示該組與 control 組比較， p＜討論感染根管及壞死牙髓中�？蓹z出革蘭陰性菌（gram- 研究表明 G－菌常引起牙髓炎癥反應(yīng)[38]。組織學(xué)證據(jù)顯示織前，就可引發(fā)牙髓疾病，表明牙髓炎癥的發(fā)生不僅由產(chǎn)物也參與炎癥的發(fā)生[39]。LPS，是 G－菌內(nèi)毒素，具有破誘導(dǎo)宿主細(xì)胞的免疫應(yīng)答，從而參與牙髓炎癥的發(fā)生、發(fā)LPS 可通過(guò)上調(diào)牙髓細(xì)胞表達(dá)大量炎癥細(xì)胞因子而子是一類(lèi)小分子分泌性的可溶性蛋白質(zhì)，可促進(jìn)免疫活同作用。通過(guò)測(cè)量炎癥因子的表達(dá)水平，可反映牙IL-1β，TNF-a 及 IL-6 是參與各種急性期炎癥免疫反應(yīng)的

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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