目的:體外研究莪術(shù)醇對(duì)人鼻咽癌CNE-2細(xì)胞中IGF-1R/PI3K/Akt/GSK-3β通路及其下游分子的影響;探究莪術(shù)醇誘導(dǎo)的CNE-2細(xì)胞增殖抑制、周期阻滯、細(xì)胞凋亡效應(yīng)及其潛在分子機(jī)制,為開(kāi)發(fā)IGF-1R新型抑制劑,鑒定鼻咽癌分子靶向治療的有效靶點(diǎn)奠定基礎(chǔ),并為提高莪術(shù)醇在腫瘤臨床治療應(yīng)用中的有效性提供科學(xué)依據(jù)。方法:將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的CNE-2細(xì)胞接種于培養(yǎng)板中,施以濃度遞增的莪術(shù)醇（12.5、25、50、100μg/mL）進(jìn)行干預(yù),同時(shí)設(shè)置陰性對(duì)照組;MTT法評(píng)估不同濃度的莪術(shù)醇處理CNE-2細(xì)胞24、48、72、96h后細(xì)胞增殖活力的變化;平板克隆形成實(shí)驗(yàn)評(píng)估不同濃度的莪術(shù)醇處理CNE-2細(xì)胞后克隆形成及增殖能力的差異;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)莪術(shù)醇作用48h后CNE-2細(xì)胞的周期進(jìn)程及凋亡情況;Q-PCR、Western blotting分別檢測(cè)莪術(shù)醇處理48h后CNE-2細(xì)胞中IGF-1R/PI3K/Akt/GSK-3β通路及其下游周期相關(guān)因子和凋亡相關(guān)因子的mRNA和蛋白表達(dá)水平。莪術(shù)醇（50μg/mL）與IGF-1（50ng/mL）分別處理及聯(lián)合處理CNE-2細(xì)胞,同時(shí)設(shè)置陰性... 

【文章來(lái)源】：桂林醫(yī)學(xué)院廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

莪術(shù)醇誘導(dǎo)CNE-2細(xì)胞增殖抑制Figure1CurcumolinducedproliferationinhibitiononCNE-2cells

莪術(shù)醇（12.5、25、50、100μg/mL）處理細(xì)胞 15 天后，評(píng)估克隆增殖情況結(jié)果顯示，莪術(shù)醇處理組的細(xì)胞克隆形成能力顯著低于對(duì)照組，且在檢測(cè)濃度范圍內(nèi)，CNE-2 細(xì)胞的克隆數(shù)量與莪術(shù)醇的濃度負(fù)相關(guān)（圖 2A 和 B）表明莪術(shù)醇能抑制 CNE-2 細(xì)胞的克隆形成，即誘導(dǎo)細(xì)胞增殖抑制。形態(tài)學(xué)上同樣可以看出，莪術(shù)醇誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞失去原有的細(xì)胞形態(tài)，胞體皺縮，核破裂，胞漿內(nèi)顆粒增多（圖 2C）。

2.2 莪術(shù)醇誘導(dǎo) CNE-2 細(xì)胞周期阻滯2.2.1 莪術(shù)醇誘導(dǎo) CNE-2 細(xì)胞發(fā)生 G0/G1 期阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程的變化是細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化最基本的表現(xiàn)。我們采用 PI 單染色法，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)莪術(shù)醇對(duì)鼻咽癌 CNE-2 細(xì)胞周期進(jìn)程的影響。結(jié)果顯示，莪術(shù)醇處理 CNE-2 細(xì)胞 48h 后，隨著莪術(shù)醇濃度的增加，G0/G1 期細(xì)胞比例增多，G2/M 期、S 期細(xì)胞比例減少（圖 3A 和 B）。表明莪術(shù)醇以劑量依賴(lài)性的方式誘導(dǎo) CNE-2 細(xì)胞發(fā)生 G0/G1 期阻滯，導(dǎo)致DNA 合成障礙，從而引起增殖抑制。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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