發(fā)布時(shí)間：2021-04-27 17:05

　　目的:通過體外細(xì)胞培養(yǎng)以及相關(guān)干預(yù),探討葛根素對(duì)高濃度糖皮質(zhì)激素環(huán)境下MC3T3-E1生物學(xué)性能的影響。方法:體外培養(yǎng)MC3T3-E1前成骨細(xì)胞,分為一對(duì)照組與五組實(shí)驗(yàn)組,在高濃度糖皮質(zhì)激素(10^-6 mmol/L)環(huán)境下使用梯度濃度葛根素(0、1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8、1×10^-9 mol/L)進(jìn)行干預(yù);使用CCK-8試劑盒分別檢測(cè)培養(yǎng)1 d、4 d、7 d時(shí)的細(xì)胞增殖、堿性磷酸酶試劑盒檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)1 d、4 d、7 d時(shí)的ALP活性,培養(yǎng)7 d時(shí)實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)細(xì)胞OPG mRNA的表達(dá),培養(yǎng)24 h鬼筆環(huán)肽染色并在激光共聚焦顯微鏡下觀察細(xì)胞骨架形態(tài)變化。結(jié)果:CCK-8結(jié)果顯示,對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,培養(yǎng)4 d時(shí)各實(shí)驗(yàn)組之間比較1×10^-7mol/L組細(xì)胞增殖最明顯（P<0.05）;ALP檢測(cè)結(jié)果顯示,同一時(shí)間點(diǎn)各實(shí)驗(yàn)組ALP表達(dá)均有提升,且與對(duì)照組差異有... 

【文章來源】：口腔醫(yī)學(xué)研究. 2020,36(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要儀器和材料
    1.2 MC3T3-E1細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 葛根素培養(yǎng)液的配制
    1.4 細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖
    1.5 堿性磷酸酶(ALP)活性檢測(cè)
    1.6 實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)細(xì)胞成骨相關(guān)基因OPG mRNA表達(dá)
    1.7 羅丹明-鬼筆環(huán)肽染色觀察細(xì)胞骨架形態(tài)變化
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 CCK-8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖
    2.2 堿性磷酸酶(ALP)活性測(cè)定
    2.3 OPG mRNA表達(dá)情況
    2.4 細(xì)胞骨架形態(tài)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Puerarin prevents bone loss in ovariectomized mice and inhibits osteoclast formation in vitro[J]. YUAN Si-Yuan,SHENG Tong,LIU Lian-Qi,ZHANG Yun-Ling,LIU Xue-Mei,MA Tao,ZHENG Hong,YAN Yan,ISHIMI Yoshiko,WANG Xin-Xiang.  Chinese Journal of Natural Medicines. 2016(04)
[2]長(zhǎng)期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素對(duì)大鼠骨組織中HMGB1、RAGE、OPG和RANKL表達(dá)的影響[J]. 張彥秋,王春生,王坤正,蔣朝龍.  吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015(05)
[3]葛根素、柚皮苷對(duì)成骨細(xì)胞增值及分化的影響[J]. 趙剛,付月明,李德超,蔣麗妍,刁天嬌.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2015(02)
[4]葛根素對(duì)人牙周膜干細(xì)胞成骨分化的作用[J]. 吳琳琳,王彥,鄭雅心,蘭澤棟.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2013(05)



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