發(fā)布時間：2021-04-02 07:13

　　一、研究背景與目的大黃素是存在于大黃和何首烏等藥材中的天然蒽醌類物質(zhì),具瀉下、抗菌、抗炎、抗腫瘤和保護肝腎等作用,因而受到了廣泛的關(guān)注和研究。然而大黃素對肝臟具雙重作用,小劑量起保護作用,大劑量產(chǎn)生毒性。目前關(guān)于大黃素代謝與毒性的關(guān)系尚不明確,本研究主要考察以下科學(xué)問題:①大黃素的肝細胞毒性及細胞色素P450（Cytochromes P450,CYPs）介導(dǎo)的I相代謝對毒性的影響;②葡萄糖醛酸化轉(zhuǎn)移酶（UDP-glucuronosyltransferases,UGTs）介導(dǎo)的Ⅱ相代謝對毒性的影響及轉(zhuǎn)錄因子對關(guān)鍵UGT酶的調(diào)控;③大鼠長期攝入大黃素致肝毒性具性別差異的機制;④丙磺舒合用大黃素對大鼠肝毒性的影響及機制。為大黃素的臨床合理使用提供一定的理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。二、研究方法1.采用HepG2細胞模型探討大黃素的肝細胞毒性,并采用CYP1A2/3A4的抑制劑和誘導(dǎo)劑,考察Ⅰ相代謝對毒性的影響。2.結(jié)合體外UGTs純酶實驗、55例人肝/36例人腎樣本的基因組和轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)探究參與大黃素Ⅱ相代謝的體內(nèi)主要UGT酶。分別敲低HepG2細胞中UGT2B7和轉(zhuǎn)錄因子HNF4A,探討Ⅱ相代謝與毒... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：161 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１大黃素對ＨｅｐＧ２?（Ａ）和Ｌ０２?（Ｂ）細胞的生存抑制率（《?＝?５）??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ?ｅｆｆｅｃｔ?（％）?ｏｆ?ｅｍｏｄｉｎ?ｏｎ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＨｅｐＧ２?ａｎｄ?Ｌ０２?ｃｅｌｌｓ?｛ｎ?＝?５）??

Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（＾ｉＭ）?Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（＾ｉＭ）??圖２－１大黃素對ＨｅｐＧ２?（Ａ）和Ｌ０２?（Ｂ）細胞的生存抑制率（《?＝?５）??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ?ｅｆｆｅｃｔ?（％）?ｏｆ?ｅｍｏｄｉｎ?ｏｎ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＨｅｐＧ２?ａｎｄ?Ｌ０２?ｃｅｌｌｓ?｛ｎ?＝?５）??將不同濃度的大黃素（６．２５－２００?＾Ｍ）同時作用于ＨｅｐＧ２細胞４８?ｈ，采用ＳＰＳＳ??１９．０軟件中獨立樣本ｔ檢驗對各組細胞生存率進行兩組間的差異比較，Ｐ?＜?０．０５??認為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果如圖２－２所示，可觀察到低濃度大黃素（６．２５－２５?ｐＭ）??促進細胞的生長，使細胞生存率高于對照組，而高濃度大黃素（５０－２００?ｐＭ）卻??抑制細胞生長，降低細胞的生存率，因此大黃素對ＨｅｐＧ２細胞的毒性具有濃度??依賴性。??ＨｅｐＧ２??１５０－??｜１〇〇－｜｜｜｜??二??１?ＩＨＩｎｕｉｉ??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（從?Ｍ＞??圖２－２大黃素作用于ＨｅｐＧ２細胞后的生存率（《?＝?５，與對照組比，＞＜０．０５／＞＜０．０１，??＊＊＞＜０．００１）??１６??

Ｎ－乙酰半胱氨酸在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為谷胱甘肽，補充細胞內(nèi)源性谷胱甘肽，增??強細胞解毒功能。采用０．５?ｍＭＮ－乙酰半胱氨酸預(yù)處理ＨｅｐＧ２細胞，１?ｈ后再加??入大黃素，檢測各給藥組ＧＳＨ水平和細胞生存率情況。如圖２－５所示，單獨加??入５０?大黃素可降低ＧＳＨ水平。將Ｎ－乙酰半胱氨酸單獨加入至細胞內(nèi)，ＧＳＨ??水平明顯增加。采用Ｎ－乙酰半胱氨酸預(yù)處理細胞，再加入大黃素后，ＧＳＨ水平??雖高于對照組，但明顯低于單用Ｎ－乙酰半胱氨酸組，細胞生存率高于單用大黃??素組，這是由于大黃素消耗了由Ｎ－乙酰半胱氨酸轉(zhuǎn)化的谷胱甘肽，減少了對細??胞內(nèi)還原型谷胱甘肽的消耗，從而減輕了對細胞生長的抑制作用。??Ａ「ｎ?ＧＳＨ?Ｂ??料?方??ｐ?丁?ｅ丨仰－??卜?ＬＪｉ?＿??＾?＾ｊ＞ｃ?Ｎ－ａｃｅｌｙｌｃｙｓｔｅｉｎｅ?〇？Ｍ）：?＾?＾?＾??＾?＾?ｖ－＊＊－?Ｆｊｎｏｄｉｎ??１９??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]大黃牡蠣湯灌腸治療痛風(fēng)性腎病的臨床觀察[J]. 劉永紅,張琨.  云南中醫(yī)中藥雜志. 2017(07)
[2]三黃膠囊治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎20例[J]. 章懿婷,劉秋紅.  中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育. 2015(33)
[3]Emodin ameliorates lipopolysaccharides-induced corneal inflammation in rats[J]. Guo-Ling Chen,Jing-Jing Zhang,Xin Kao,Lu-Wan Wei,Zhi-Yu Liu.  International Journal of Ophthalmology. 2015(04)
[4]131I-標(biāo)記大黃素在動物體內(nèi)的藥物動力學(xué)和組織分布[J]. 杜丹,吳小艾,范成中,梁勇,辛光,張瑞,劉燕,吳曉華,何楊,黃文.  應(yīng)用基礎(chǔ)與工程科學(xué)學(xué)報. 2014(01)
[5]清開靈注射液提取物及清開靈注射液與抗生素聯(lián)合對含blaNDM-1超級細菌的抑菌效果[J]. 尚偉,王雪松,鄒大陽,張狀年,廖祥儒,袁靜.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2013(04)
[6]Inhibitory effect of emodin and Astragalus polysaccharide on the replication of HBV[J]. Shuang-Suo Dang, Xiao-Li Jia, Ping Song, Yan-An Cheng, Xin Zhang, Ming-Zhu Sun, Department of Infectious Diseases, the Second Affi liated Hospital of Medical School of Xi’an Jiao Tong University, Xi’an 710004, Shannxi Province, ChinaEn-Qi Liu, The Center of Experimental Animal, Xi’an Jiao Tong University, Xi’an 710004, Shannxi Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2009(45)
[7]Emodin protects rat liver from CCl4-induced fibrogenesis via inhibition of hepatic stellate cells activation[J]. Miao-Xian Dong, Ying-Bo Zhang, Cheng-Chong Li, Yu-Tao Geng, Li Zhou, Xue-Yan Li, Ji-Cheng Liu, Ying-Cai Niu, The Institute of Medicine, Qiqihar Medical University, Qiqihar 161042, Heilongjiang Province, China Yan Jia, Department of Pathophysiology, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, Heilongjiang Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2009(38)
[8]復(fù)方丹參注射液對冠心病患者硝酸酯耐藥的影響[J]. 王靜,吳時達,陳守春,閆亞非,吳昌碧,徐俊波,鄭鏗.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2005(01)
[9]小檗堿競爭血漿蛋白結(jié)合部位所致藥物相互作用的研究[J]. 譚毓治,伍愛嬋,譚炳炎,吳玨珩,湯麗芬,李娟好,黎元勛,張棟健.  中國藥理學(xué)通報. 2002(05)
[10]大黃素對人腎成纖維細胞增殖的影響[J]. 寧英遠,王儉勤,屈遂林.  中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2000(02)



本文編號：3114839