實(shí)驗(yàn)?zāi)康?流感是一種由流感病毒引起的急性呼吸道感染疾病,嚴(yán)重危害人類的健康。板藍(lán)根是臨床常用的抗病毒中藥,具有清熱解毒、預(yù)防感冒及利咽等功效,用于溫?zé)岚l(fā)熱、發(fā)斑、風(fēng)熱感冒、咽喉腫爛、腮腺炎等病毒感染疾患。靛玉紅是板藍(lán)根的主要活性成分,但人們對(duì)靛玉紅的抗病毒作用和機(jī)制研究存在不足,其原因可能是缺乏合適的體內(nèi)及體外抗病毒活性評(píng)價(jià)模型。除了病毒因素外,宿主因素也在流感病毒感染過程中起著關(guān)鍵的作用,因此,建立與宿主因素相關(guān)的病毒易感模型有利于評(píng)價(jià)中藥和天然產(chǎn)物的抗病毒活性。本課題組前期利用拘束應(yīng)激小鼠建立體內(nèi)病毒易感性模型,發(fā)現(xiàn)拘束應(yīng)激能夠降低機(jī)體I型干擾素的分泌,增加小鼠對(duì)流感的易感性,并使用該模型成功評(píng)價(jià)了多種中藥及天然產(chǎn)物的抗流感病毒活性。課題組的前期研究結(jié)果提示拘束應(yīng)激導(dǎo)致的皮質(zhì)酮（Corticosterone,CORT）上升是增加小鼠對(duì)流感易感性的主要原因,因此,本研究采用CORT負(fù)荷的A549細(xì)胞建立體外病毒易感性模型。本文在前期工作基礎(chǔ)上,采用拘束應(yīng)激小鼠模型及CORT負(fù)荷的A549細(xì)胞模型評(píng)價(jià)靛玉紅的抗流感病毒作用,并探究其抗病毒機(jī)制,旨在深入揭示靛玉紅抗病毒作用和機(jī)制,為開發(fā)... 

【文章來源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一章 前言
    1.1 流感病毒與流感的防治
    1.2 機(jī)體對(duì)流感的防御機(jī)制
        1.2.1 非特異性免疫的抗流感作用
        1.2.2 后天免疫的抗流感作用
    1.3 線粒體抗流感病毒信號(hào)通路
    1.4 流感易感性
    1.5 靛玉紅可能的抗流感機(jī)理
    1.6 立題依據(jù)
第二章 靛玉紅改善拘束應(yīng)激小鼠流感易感性的研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 藥品與主要試劑
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.3 病毒
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.5 試劑配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 動(dòng)物分組及處理
        2.2.2 肺組織病理切片
        2.2.3 Western Blotting檢測(cè)炎癥因子的蛋白表達(dá)
        2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 靛玉紅對(duì)流感病毒感染應(yīng)激小鼠發(fā)病率和生存率的影響
        2.3.2 靛玉紅對(duì)流感病毒感染應(yīng)激小鼠肺指數(shù)的影響
        2.3.3 靛玉紅對(duì)流感病毒感染應(yīng)激小鼠肺組織的影響
        2.3.4 靛玉紅對(duì)流感病毒感染應(yīng)激小鼠肺組織炎癥因子的影響
    2.4 討論
第三章 靛玉紅降低流感易感性的作用機(jī)制研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 藥品與實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        3.1.4 病毒
        3.1.5 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.6 試劑配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 動(dòng)物分組及處理
        3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及處理
        3.2.3 MTT法檢測(cè)靛玉紅對(duì)細(xì)胞活力的影響
        3.2.4 細(xì)胞免疫熒光
        3.2.5 Western Blotting檢測(cè)蛋白表達(dá)
        3.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 靛玉紅對(duì)流感病毒感染應(yīng)激小鼠肺組織中NP、IFN-β 和IFITM3蛋白表達(dá)的影響
        3.3.2 靛玉紅對(duì)流感病毒感染應(yīng)激小鼠肺組織中MAVS、p-IRF3和NF-κB蛋白表達(dá)的影響
        3.3.3 靛玉紅對(duì)A549細(xì)胞及CORT負(fù)荷A549細(xì)胞增殖率的影響
        3.3.4 靛玉紅對(duì)流感病毒感染CORT負(fù)荷A549細(xì)胞的保護(hù)作用
        3.3.5 靛玉紅在CORT負(fù)荷A549細(xì)胞模型上的抗流感病毒機(jī)制研究
    3.4 討論
第四章 靛玉紅在線粒體抗病毒信號(hào)通路中靶標(biāo)蛋白的研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 藥品與試劑
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        4.1.3 病毒
        4.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
        4.2.2 Western Blotting檢測(cè)蛋白表達(dá)
        4.2.3 pAcGFP1-Mito轉(zhuǎn)染
        4.2.4 線粒體膜電位測(cè)定
        4.2.5 靛玉紅作用靶標(biāo)蛋白的預(yù)測(cè)及分子對(duì)接
        4.2.6 siRNA轉(zhuǎn)染
        4.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 靛玉紅對(duì)流感病毒感染應(yīng)激小鼠肺組織和CORT負(fù)荷A549細(xì)胞中Mfn2表達(dá)的影響
        4.3.2 靛玉紅對(duì)流感病毒感染CORT負(fù)荷A549細(xì)胞線粒體形態(tài)的影響
        4.3.3 靛玉紅對(duì)流感病毒感染CORT負(fù)荷A549細(xì)胞線粒體膜電位的影響
        4.3.4 靛玉紅作用MAVS通路的靶標(biāo)蛋白預(yù)測(cè)
        4.3.5 靛玉紅在CORT負(fù)荷A549細(xì)胞模型上調(diào)節(jié)STING促進(jìn)IFN-β 產(chǎn)生
    4.4 討論
第五章 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 創(chuàng)新和突破
    5.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間發(fā)表論文
附錄



本文編號(hào)：3077815