目的:本課題組在前期行體外實驗證實了片仔癀可以通過抑制骨肉瘤細胞中ABCB1、ABCG2的表達,有效抑制骨肉瘤的生長并逆轉(zhuǎn)其耐藥性的基礎(chǔ)上,通過體內(nèi)實驗進一步探討片仔癀對人骨肉瘤CSCs裸鼠移植瘤的作用及對ABCB1、ABCG2蛋白表達的影響。方法:1、人骨肉瘤腫瘤干細胞移植瘤模型的建立對數(shù)期MG63/ADM細胞胰酶消化制成單細胞懸液,采用無血清培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)的方式,連續(xù)傳代3次,富集MG63/ADM細胞中的腫瘤干細胞。48只裸鼠皮下接種腫瘤干細胞建立人骨肉瘤腫瘤干細胞移植瘤模型。依照隨機數(shù)字表法將其分為對照組、阿霉素組、片仔癀組、片仔癀與阿霉素聯(lián)合組。2、測量瘤體體積及稱重,計算腫瘤體積及重量抑制率末次給藥24h后頸椎脫臼處死裸鼠,剝離裸鼠皮下瘤體,測量瘤體體積及稱重,計算腫瘤體積、重量抑制率。3、HE觀察瘤體病理情況使用HE染色,在光鏡下觀察各組瘤體病理情況。4、免疫組織組化學(xué)法（SP法）及western blot檢測瘤體內(nèi)ABCB1、ABCGG2的表達。采用免疫組織化學(xué)法檢測不同組間瘤體中ABCB1、ABCG2陽性積分光密度的表達情況;Western blot法檢測不同組間瘤體中... 

【文章來源】：福建中醫(yī)藥大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞
引言
實驗內(nèi)容
    1 實驗材料
        1.1 細胞株
        1.2 實驗動物
        1.3 主要試劑
        1.4 主要儀器
        1.5 主要試劑配制
    2 實驗方法
        2.1 骨肉瘤干細胞的培養(yǎng)
        2.2 骨肉瘤腫瘤干細胞裸鼠移植瘤模型建立及分組
        2.3 標(biāo)本采集及計算腫瘤抑制率
        2.4 瘤體包埋、HE染色觀察瘤體病理情況
        2.5 免疫組化檢測移植瘤內(nèi)ABCB1、ABCG2的表達情況
        2.6 Westen blot檢測瘤體內(nèi)ABCB1、ABCG2的表達
        2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
        2.8 技術(shù)路線圖
    3 實驗結(jié)果
        3.1 片仔癀對骨肉瘤腫瘤干細胞裸鼠移植瘤體積及重量的影響
        3.2 HE下觀察骨肉瘤細胞的病理情況
        3.3 免疫組化檢測片仔癀對裸鼠移植瘤ABCB1、ABCG2表達的影響
        3.4 western blot檢測片仔癀對裸鼠移植瘤ABCB1、ABCG2表達的影響
    4 討論
        4.1 手術(shù)聯(lián)合新輔化療治療骨肉瘤
        4.2 腫瘤干細胞與骨肉瘤耐藥的關(guān)系
        4.3 ABCB1、ABCG2與骨肉瘤干細胞及其耐藥的關(guān)系
        4.4 中醫(yī)藥治療腫瘤多藥耐藥
        4.5 片仔癀在骨肉瘤治療的應(yīng)用
結(jié)論
參考文獻
文獻綜述 骨肉瘤耐藥機制及逆轉(zhuǎn)耐藥策略
    參考文獻
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]人甲狀腺癌中腫瘤干細胞樣細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[D]. 譚燦亮.南方醫(yī)科大學(xué) 2015
[3]片仔癀逆轉(zhuǎn)大腸癌多藥耐藥的作用機制研究[D]. 沈阿靈.福建中醫(yī)藥大學(xué) 2014



本文編號：3073370