五谷蟲及其提取物對H22荷瘤小鼠的抗腫瘤機制研究
發(fā)布時間:2021-01-26 08:33
目的:研究五谷蟲及其提取物對H22荷瘤小鼠的抑瘤作用,探討五谷蟲抗腫瘤的分子機制。方法:構建H22荷瘤小鼠模型,隨機分為正常組、模型組、CTX組、五谷蟲低、高劑量(0.75、1.5 g/kg)組和五谷蟲提取物低、高劑量(0.75、1.5g/kg)組,連續(xù)給藥10天,觀察各組小鼠狀態(tài)及腫瘤生長情況,計算腫瘤抑制率;檢測小鼠肝腎功能指標;Western blotting檢測瘤組織中p38MAPK和p-p38MAPK的蛋白表達水平;ELISA法檢測瘤組織中的IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF水平。重新構建H22荷瘤小鼠模型,除調整給藥組為五谷蟲提取物低、中、高劑量(0.375、0.75、1.5g/kg)組,其余實驗條件不變;記錄各組小鼠腫重、胸腺和脾臟的重量,計算腫瘤抑制率和免疫器官指數(shù);用ELISA法檢測荷瘤小鼠腫瘤組織中IL-2、IgG、IFN-γ等細胞因子的活性水平;使用流式細胞儀檢測小鼠外周血和脾臟中T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)。結果:五谷蟲勻漿在0.75、1.5 g/kg給藥量時沒有抗腫瘤...
【文章來源】:廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:87 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
五谷蟲及其提取物對H22荷瘤小鼠瘤重的影響
**與模型組相比較,P<0.01。圖1-3 五谷蟲提取物對H22荷瘤小鼠腫瘤組織中IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF水平的影響Figure 1-3 The effect of Chrysomya megacephala (Fab.)extracts on the levels of IL-1β, IL-6, TNF-α, andVEGF in tumors of H22 tumor-bearing mice*P<0.05,vs the model;**P<0.01,vs the model.IL-6IL-6(pg/ml)modelCTXCMextracts0.75g/kgCMextracts1.5g/kg0100020003000* **TNF-aTNF-a(pg/ml)modelCTXCMextracts0.75g/kgCMextracts1.5g/kg0200400600*****
分離液液面上方,不要破壞淋巴細胞分離液和細胞懸液的界面,室溫下400g水平離心15 min,另取干凈的做好標記的10 mL離心管,每管加入4 mL生理鹽水備用。離心完成后,小心的取出離心管,管內分層如圖2-1,取圖中PBMC層細胞。加至之前準備好的對應的生理鹽水管中。充分混勻后,2000rpm離心20 min。棄去上清液,沉淀用Lysing cytometry staining buffer洗滌2次后,加入300 μLLysing cytometry staining buffer,并進行細胞計數(shù),并調整濃度為1*106個/mL[32-34]。圖2-1 小鼠淋巴細胞分離液使用示意圖Figure 2-1 The diagram of uselymphocyte separation media(2)荷瘤小鼠脾臟淋巴細胞懸液中T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)的測定取100 μL細胞懸液置于相對應的1.5 mL離心管中,按照離心管上標記次加入2 μL CD4、2 μL CD8抗體和2 μL CD4、2 μL CD3抗體,空白管不加抗
本文編號:3000801
【文章來源】:廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:87 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
五谷蟲及其提取物對H22荷瘤小鼠瘤重的影響
**與模型組相比較,P<0.01。圖1-3 五谷蟲提取物對H22荷瘤小鼠腫瘤組織中IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF水平的影響Figure 1-3 The effect of Chrysomya megacephala (Fab.)extracts on the levels of IL-1β, IL-6, TNF-α, andVEGF in tumors of H22 tumor-bearing mice*P<0.05,vs the model;**P<0.01,vs the model.IL-6IL-6(pg/ml)modelCTXCMextracts0.75g/kgCMextracts1.5g/kg0100020003000* **TNF-aTNF-a(pg/ml)modelCTXCMextracts0.75g/kgCMextracts1.5g/kg0200400600*****
分離液液面上方,不要破壞淋巴細胞分離液和細胞懸液的界面,室溫下400g水平離心15 min,另取干凈的做好標記的10 mL離心管,每管加入4 mL生理鹽水備用。離心完成后,小心的取出離心管,管內分層如圖2-1,取圖中PBMC層細胞。加至之前準備好的對應的生理鹽水管中。充分混勻后,2000rpm離心20 min。棄去上清液,沉淀用Lysing cytometry staining buffer洗滌2次后,加入300 μLLysing cytometry staining buffer,并進行細胞計數(shù),并調整濃度為1*106個/mL[32-34]。圖2-1 小鼠淋巴細胞分離液使用示意圖Figure 2-1 The diagram of uselymphocyte separation media(2)荷瘤小鼠脾臟淋巴細胞懸液中T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)的測定取100 μL細胞懸液置于相對應的1.5 mL離心管中,按照離心管上標記次加入2 μL CD4、2 μL CD8抗體和2 μL CD4、2 μL CD3抗體,空白管不加抗
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