我國(guó)海洋中蘊(yùn)含著充足的生物資源,由于生存環(huán)境的特殊性,海洋生物體內(nèi)多糖的合成過(guò)程與陸地生物存在差異,產(chǎn)生了很多結(jié)構(gòu)新穎,具有特殊生理功能的活性物質(zhì)�，F(xiàn)研究表明,海洋多糖因具有多種生物活性將可能作為藥物中有效成分克服某些疑難病癥。隨著對(duì)海膽多糖結(jié)構(gòu)研究的不斷深入,人們開(kāi)始關(guān)注海膽多糖的生物功能及其藥理活性,并在抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫活性等方面取得初步進(jìn)展。蝦夷馬糞海膽（Strongylocentrotus intermedius）生殖腺多糖（SUP）通過(guò)結(jié)構(gòu)解析,表明其分子量小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單穩(wěn)定,活性高,可能具有促進(jìn)細(xì)胞成熟分化的功能。在此基礎(chǔ)之上,本實(shí)驗(yàn)研究SUP協(xié)同重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（BMP-2）對(duì)體外培養(yǎng)小鼠顱頂前成骨細(xì)胞（MC3T3-E1細(xì)胞）成骨分化活性的影響。采用復(fù)合酶法、乙醇沉淀法以及超濾分級(jí)法提取海膽生殖腺多糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化法分析其單糖組成。以MC3T3-E1細(xì)胞模型測(cè)試SUP協(xié)同成骨活性能力,以不同濃度的SUP作用于MC3T3-E1細(xì)胞,用MTT法、BCIP/NBT組織染色法、茜紅素染色法以及Elisa法分別對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞的... 

【文章來(lái)源】：大連工業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．１?ＳＵＰ的單糖組成高效液相色譜圖??４??

ＱＤＯ?２００?４．００?６００?ＳＯＣ?１０．ＣＤ?２０３?１４００?１６０３?ＩＳ?００?２Ｑ０Ｃ?２２０３?Ｘ００?２￡??Ｍｎ＾ｅｓ??圖３．１?ＳＵＰ的單糖組成高效液相色譜圖??４??Ｆｉｇ．３．１?ＨＰＬＣ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ＳＵＰ?ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ?ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ??表３．１?ＳＵＰ的單糖組成高效液相色譜圖??Ｔａｂｌｅ．３．１?ＨＰＬＣ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ＳＵＰ?ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ?ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ??未知糖峰?出峰時(shí)間／ｍｉｎ??ａ?１０．１３７??ｂ?１２．１４２??ｃ?１９．５３９??Ｈ?ｌ??３（Ｘｈ?ｌ??ｓ?ｇ３??２９＞?＾?Ｓ??２０ＣＬ?人??－?Ｊ?！＼??Ｑ０Ｃ＞—■?Ｊ?，■■?■?．?７７＾．??Ｑ００?２００?４００?６００?８００?１Ｑ０Ｏ?１２００?１４?ＣＯ?ｉａ〇０?－Ｂ００?２ＱＣＤ?２２００?２４．０３?２６Ｃ??Ｍａｌｅｓ??圖３．２各標(biāo)準(zhǔn)單糖的液相色譜圖??Ｆｉｇ．３．２?ＨＰＬＣ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ?

３．１＿２?ＳＵＰ白勺純度鑒定??本實(shí)驗(yàn)按照２．２．５中的方法進(jìn)行高效液相色譜分析（ＨＰＬＣ）法鑒定ＳＵＰ的純度及??相對(duì)分子量大小，ＳＵＰ的液相色譜圖結(jié)果如圖３．３－３．５所示。ＳＵＰ色譜峰的保留時(shí)間為??２５．５?ｍｉｎ?（圖３．３所示），圖譜呈現(xiàn)狹窄單一對(duì)稱(chēng)性較好的對(duì)稱(chēng)峰，分子量分布范圍較??小，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)中所得ＳＵＰ分子量較均一，是較純的均一組分。采用ＨＰＬＣ法測(cè)得的??相對(duì)分子質(zhì)量為ｌｋＤ標(biāo)準(zhǔn)品的液相色譜圖（圖３．４所示），保留時(shí)間為２７?ｍｉｎ；采用??ＨＰＬＣ法測(cè)得的相對(duì)分子質(zhì)量為５?ｋＤ標(biāo)準(zhǔn)品的液相色譜圖（圖３．５所示），保留時(shí)間為??２４．５?ｍｉｎ。該實(shí)驗(yàn)中所得ＳＵＰ色譜峰出峰位置在１?ｋＤ和５?ｋＤ之間，曹月剛［８４Ｈ侖文中所??得ＳＵＰ的相對(duì)分子質(zhì)量為４４３６?Ｄ，與本實(shí)驗(yàn)中所得結(jié)果一致。因此，該多糖ＳＵＰ可用??于后續(xù)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)各指標(biāo)的檢測(cè)。??ｚ叫??Ｏｆｉ？Ｔ???ａｏｏ?２〇〇?４．（〇?６．ｃｏ?ｔｏｏ?ｉｓ．ｅｃ?ｉｒｃｏ?ｍ．ｏｏ?＜ａｏｃ?ｕ．ｃｏ?ｘａｏ?？ｏｃ?７＊．ｃｃ?＾?？ｅｏ?２？ｏｃ?ｗｏｏ?？〇〇?ｍｏｃ?ｍｃｃ?ｍｃｏ?＜ｏｅｃ?＊３００?？〇〇?？〇〇?４？ｏｃ?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]蝦夷馬糞海膽不同家系和性別間性腺性狀的比較[J]. 常亞青,張偉杰,丁君,石生寶,趙沖,張勃.  水產(chǎn)學(xué)報(bào). 2010(07)
[2]馬糞海膽殼棘多糖的分離、純化和抗腫瘤活性的研究[J]. 白日霞,王長(zhǎng)海.  大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào). 2010(02)
[3]海膽黃多糖SEP酶解及產(chǎn)物免疫活性測(cè)定[J]. 徐張展,邢瑩瑩,周長(zhǎng)林,奚濤.  藥物生物技術(shù). 2009(04)
[4]BMP-2信號(hào)通路與成骨細(xì)胞分化[J]. 王霖霞,李玉坤.  國(guó)際骨科學(xué)雜志. 2009(02)
[5]骨形態(tài)發(fā)生蛋白信號(hào)傳導(dǎo)和功能調(diào)節(jié)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)[J]. 王弘毅,張偉濱.  國(guó)際骨科學(xué)雜志. 2008(06)
[6]淫羊藿甙對(duì)體外培養(yǎng)大鼠成骨細(xì)胞Ⅰ型膠原表達(dá)和BGP影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 肖強(qiáng)兵,鄒季.  中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志. 2007(09)
[7]一氧化氮對(duì)成骨細(xì)胞樣細(xì)胞系MC3T3-E1的礦化調(diào)控[J]. 黃湛,劉洪臣,王東勝,賈靜.  中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2007(02)
[8]黃芪多糖對(duì)糖尿病鼠T細(xì)胞亞群的免疫調(diào)節(jié)作用[J]. 陳蔚,李益明,俞茂華,施小梅.  中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2007(01)
[9]硫酸酯化茶多糖的制備及降血糖活性的研究[J]. 彭永華,金征宇,王元鳳.  食品工業(yè)科技. 2006(11)
[10]海膽的研究進(jìn)展及其應(yīng)用現(xiàn)狀[J]. 王冬,王政乾,田紅偉,邵香芝,魏麗娟.  中國(guó)海洋藥物. 2006(04)

碩士論文
[1]金絲桃苷通過(guò)BMP和Wnt/β-catenin信號(hào)通路調(diào)控成骨細(xì)胞MC3T3-E1增殖分化的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 林思儉.南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院 2015
[2]蝦夷馬糞海膽生殖腺多糖的提取、分離純化及結(jié)構(gòu)研究[D]. 曹月剛.大連工業(yè)大學(xué) 2014



本文編號(hào)：2993357