小檗堿對人黑素瘤A375、A875細胞及相關LncRNA作用研究
發(fā)布時間：2021-01-10 09:27
目的:體外實驗研究小檗堿對皮膚黑素瘤A375、A875細胞以及人正常表皮黑素細胞HEM-M細胞增殖、周期、凋亡、侵襲的影響,并檢測與黑素瘤相關的LncRNA MALAT1、SPRY4-IT1及h-Linc-RP11-875O11.3-001（通過本課題組前期實驗基因測序所得）經(jīng)小檗堿作用后在以上三種細胞中的表達情況,闡明小檗堿抑制黑素瘤的作用及其可能機制,為開發(fā)中藥抗黑素瘤作用提供新的科學理論依據(jù)。方法:體外培養(yǎng)黑素瘤A375、A875細胞以及HEM-M細胞,經(jīng)不同濃度小檗堿（20,40,60,80,100uM）作用后進行后續(xù)實驗。倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)改變并通過cck8法檢測細胞增殖,計算半抑制濃度（IC50）;流式細胞術檢測細胞周期及凋亡;Transwell小室實驗檢測細胞侵襲;采用qRT-PCR法分析經(jīng)不同濃度小檗堿作用后LncRNA MALAT1、SPRY4-IT1及h-Linc-RP11-875O11.3-001的表達水平;用統(tǒng)計軟件SPSS22.0和graphpad prism7軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析及計算。結(jié)果:1、cck8法結(jié)果顯示小檗堿可抑制黑素瘤A375、A875...
【文章來源】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】：43 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
小檗堿化學結(jié)構
表 6 不同濃度 BBR 作用 HEM-M 細胞后 cck8 檢測結(jié)果（ ±s）HEM-M24h 48h 72hcontrol 組 0.56±0.04 0.55±0.02 0.52±0.0420umol/l 0.53±0.02 0.54±0.03 0.50±0.0340umol/l 0.51±0.02 0.53±0.01 0.49±0.0160umol/l 0.51±0.00 0.52±0.03 0.48±0.0280umol/l 0.52±0.04 0.51±0.04 0.47±0.02100umol/l 0.53±0.01 0.49±0.02 0.46±0.03F 1.68 1.881 2.013P 0.214 0.172 0.149表 7 A375 細胞、A875 細胞 IC50 值細胞 24h（uM） 48h（uM） 72h（uM）A375 38.14 34.32 23.62A875 31.63 22.29 20.25
c da：A375control 組；b：38.14uM（A375 IC50）；c：A875control 組；d：31.63μM（A圖 3 小檗堿作用后流式細胞凋亡實驗分析圖2.4 Transwell 小室實驗檢測 A375、A875 細胞侵襲將雙蒸水沖洗干凈的小室倒置晾干，置于顯微鏡下，選取 6 個視野集照片，結(jié)果顯示：A375、A875 細胞經(jīng) BBR 作用后，與對照組相比，隨穿膜細胞數(shù)逐漸減少，且具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）（詳見表 10、圖 5、表 10 小檗堿作用 A375 細胞、A875 細胞后的穿膜細胞數(shù)（ ±s分組 A375 Acontrol 組 178.67±4.16 169.020umol/l 157.67±7.51*129.640umol/l 110.00±8.72*103.360umol/l 83.67±3.21*75.6780umol/l 49.00±3.61*44.33
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Notch1調(diào)控PI3K/AKT信號通路促進黑素瘤細胞發(fā)展的研究[J]. 地里夏提·庫爾班,陳召. 中國美容醫(yī)學. 2019(01)
[2]黑色素瘤治療新進展[J]. 戰(zhàn)雪林,張瑜娟,閔衛(wèi)平. 南昌大學學報(醫(yī)學版). 2018(05)
[3]小檗堿抗腫瘤機制研究[J]. 于奇,馮海. 哈爾濱醫(yī)科大學學報. 2018(03)
[4]小檗堿抑制人黑素瘤A375細胞增殖的機制研究[J]. 任敏,李東霞,楊凌,蘇秀蘭. 中華皮膚科雜志. 2018 (06)
[5]長鏈非編碼RNA在皮膚病中的研究進展[J]. 劉洋,史丙俊,刁慶春. 臨床皮膚科雜志. 2017(05)
[6]小檗堿對人皮膚黑素瘤A375細胞周期相關miRNA的影響[J]. 楊歷輝,李東霞,蘇依拉,蘇秀蘭. 中國皮膚性病學雜志. 2016(11)
[7]長鏈非編碼RNA對腫瘤轉(zhuǎn)移調(diào)控的研究進展[J]. 張蕊,鄧俊麗,孫紅,王果,朱院山. 中國臨床藥理學與治療學. 2016(09)
[8]長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1在惡性腫瘤中的研究進展[J]. 戴超,劉芳騰,張發(fā)鵬,周凡. 臨床與實驗病理學雜志. 2016(07)
[9]長鏈非編碼RNA調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移的研究進展[J]. 王會麗,王棟. 生命科學. 2016(06)
[10]長鏈非編碼RNA在腫瘤轉(zhuǎn)移研究中的進展[J]. 楊鵬,何震宇. 中國腫瘤. 2016(05)
本文編號：2968475
【文章來源】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】：43 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
小檗堿化學結(jié)構
表 6 不同濃度 BBR 作用 HEM-M 細胞后 cck8 檢測結(jié)果（ ±s）HEM-M24h 48h 72hcontrol 組 0.56±0.04 0.55±0.02 0.52±0.0420umol/l 0.53±0.02 0.54±0.03 0.50±0.0340umol/l 0.51±0.02 0.53±0.01 0.49±0.0160umol/l 0.51±0.00 0.52±0.03 0.48±0.0280umol/l 0.52±0.04 0.51±0.04 0.47±0.02100umol/l 0.53±0.01 0.49±0.02 0.46±0.03F 1.68 1.881 2.013P 0.214 0.172 0.149表 7 A375 細胞、A875 細胞 IC50 值細胞 24h（uM） 48h（uM） 72h（uM）A375 38.14 34.32 23.62A875 31.63 22.29 20.25
c da：A375control 組；b：38.14uM（A375 IC50）；c：A875control 組；d：31.63μM（A圖 3 小檗堿作用后流式細胞凋亡實驗分析圖2.4 Transwell 小室實驗檢測 A375、A875 細胞侵襲將雙蒸水沖洗干凈的小室倒置晾干，置于顯微鏡下，選取 6 個視野集照片，結(jié)果顯示：A375、A875 細胞經(jīng) BBR 作用后，與對照組相比，隨穿膜細胞數(shù)逐漸減少，且具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）（詳見表 10、圖 5、表 10 小檗堿作用 A375 細胞、A875 細胞后的穿膜細胞數(shù)（ ±s分組 A375 Acontrol 組 178.67±4.16 169.020umol/l 157.67±7.51*129.640umol/l 110.00±8.72*103.360umol/l 83.67±3.21*75.6780umol/l 49.00±3.61*44.33
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Notch1調(diào)控PI3K/AKT信號通路促進黑素瘤細胞發(fā)展的研究[J]. 地里夏提·庫爾班,陳召. 中國美容醫(yī)學. 2019(01)
[2]黑色素瘤治療新進展[J]. 戰(zhàn)雪林,張瑜娟,閔衛(wèi)平. 南昌大學學報(醫(yī)學版). 2018(05)
[3]小檗堿抗腫瘤機制研究[J]. 于奇,馮海. 哈爾濱醫(yī)科大學學報. 2018(03)
[4]小檗堿抑制人黑素瘤A375細胞增殖的機制研究[J]. 任敏,李東霞,楊凌,蘇秀蘭. 中華皮膚科雜志. 2018 (06)
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[7]長鏈非編碼RNA對腫瘤轉(zhuǎn)移調(diào)控的研究進展[J]. 張蕊,鄧俊麗,孫紅,王果,朱院山. 中國臨床藥理學與治療學. 2016(09)
[8]長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1在惡性腫瘤中的研究進展[J]. 戴超,劉芳騰,張發(fā)鵬,周凡. 臨床與實驗病理學雜志. 2016(07)
[9]長鏈非編碼RNA調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移的研究進展[J]. 王會麗,王棟. 生命科學. 2016(06)
[10]長鏈非編碼RNA在腫瘤轉(zhuǎn)移研究中的進展[J]. 楊鵬,何震宇. 中國腫瘤. 2016(05)
本文編號：2968475
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