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真武湯對cTnT R141W 轉(zhuǎn)基因擴張型心肌病小鼠的心肌保護作用及其機制的研究

發(fā)布時間:2021-01-08 22:53
  目的:本實驗通過觀察中藥復方真武湯對擴張型心肌病小鼠的影響,從多個層次探討其對轉(zhuǎn)基因擴張型心肌病小鼠作用機制的研究,為治療擴張型心肌病提供新的思路和理論依據(jù)。材料與方法:選用cTnTR141W轉(zhuǎn)基因擴張型心肌病小鼠60只和C57BL/6J正常小鼠15只,均購于中國醫(yī)學科學院實驗動物研究所,飼養(yǎng)于遼寧中醫(yī)藥大學動物實驗中心。4個月齡C57BL/6J正常小鼠15只作為正常組,4個月齡cTnTR141W轉(zhuǎn)基因擴張型心肌病小鼠60只,按照體重隨機分為4組,模型組、卡托普利組、真武湯高劑量組及真武湯中劑量組,每組各15只。正常組及模型組給予等量生理鹽水灌胃,按人和小鼠之間等效劑量換算方法,計算出小鼠灌胃劑量分別是:中藥組予真武湯灌胃,真武湯中劑量組用藥量為18.2g/kg/d(生藥);真武湯高劑量組用藥量為36.4g/kg/d(生藥);卡托普利組予卡托普利灌胃,卡托普利用藥量為10mg/kg/d。每日2次灌胃,每次0.3ml,連續(xù)給藥1個月。實驗一采用切片掃描及光鏡下觀察心臟病理改變;透射電鏡下觀察心肌細胞的超微結構;HpaII酶切和RT-PCR鑒定各... 

【文章來源】:遼寧中醫(yī)藥大學遼寧省

【文章頁數(shù)】:106 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

真武湯對cTnT R141W 轉(zhuǎn)基因擴張型心肌病小鼠的心肌保護作用及其機制的研究


掃描光鏡下5個月齡小鼠全心縱切面:A、正常組;B、模型組;C、真武湯中劑量組ABC

左心室,月齡,光鏡,心肌


1、切片掃描及光鏡下觀察心臟病理改變對 5 月齡野生型(正常組)、cTnTR141W轉(zhuǎn)基因小鼠(模型組)和真武湯組小鼠取出心臟進行觀察:掃描切片觀察顯示,模型組 cTnTR141W轉(zhuǎn)基因小鼠的心臟與正常鼠心臟相比較,明顯增大,左心室明顯擴張,室壁變薄;真武湯給藥后小鼠的心臟左心室腔較模型組減小,室壁相對厚度變大(圖 1.1);光鏡下左心室心肌 HE 染色模型組小鼠心肌與正常組小鼠心肌相比排列紊亂,真武湯給藥后心肌細胞排列較(圖 1.2)。圖 1.1 掃描光鏡下 5 個月齡小鼠全心縱切面:A、正常組;B、模型組;C、真武量組A BC

透射電鏡,肌細胞,超微結構,透射電鏡


A B C D圖 1.3 透射電鏡下心肌細胞超微結構:A、正常組;B、模型組;C、真武湯中劑量組;D、卡托普利組3、HpaII 酶切和 RT-PCR 鑒定轉(zhuǎn)基因小鼠 cTnTR141W的表達水平:因為 cTnTR141WmRNA 與內(nèi)源性 cTnTmRNA 分子量接近,所以利用 RT-PCR 和 HpaII 酶切驗證轉(zhuǎn)基因的表達水平。正常組經(jīng)酶切后未檢測到轉(zhuǎn)基因cTnTR141W,模型組轉(zhuǎn)基因cTnTR141W是內(nèi)源性 cTnT 的 1.13 倍(圖 1.4)。圖 1.4 cTnTR141W轉(zhuǎn)基因小鼠基因的表達4、RT-PCR 和 HpaII 酶切鑒定真武湯給藥后心肌組織中 cTnTR141W的表達水平:內(nèi)源性 cTnT轉(zhuǎn)基因 cTnT


本文編號:2965460

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