目的探究腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞保護(hù)作用。方法甘油制備大鼠急性腎衰模型,檢測(cè)成功后提取腎小管上皮細(xì)胞,分為模型組、（100、200、300、400）μg·mL^-1腎茶黃酮組,其中（100、200、300、400）μg·mL^-1腎茶黃酮組分別添加對(duì)應(yīng)劑量腎茶黃酮,對(duì)照組未經(jīng)處理的正常腎小管上皮細(xì)胞,對(duì)照組和模型組正常培養(yǎng)。分別在培養(yǎng)（0、3、6、12、24、36）h Cell Counting Kit-8（CCK-8）法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力;各組細(xì)胞處理24h流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡能力,超氧化物歧化酶（SOD）活性檢測(cè)試劑盒、丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒分別檢測(cè)SOD活性、MDA水平,蛋白免疫印跡（WB）檢測(cè)細(xì)胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）3、caspase9、B淋巴細(xì)胞瘤-2基因（BCL2）、Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）、Sma和Mad相關(guān)蛋白3（Smad3）蛋白水平。結(jié)果與對(duì)照組相比,模型組在細(xì)胞培養(yǎng)（3、6、12、24、36）h OD₄₅₀降低（P <0.... 

【文章來(lái)源】：世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2020年06期 北大核心

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腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響

與對(duì)照組相比，模型組、（100、200、300、400）μg·m L-1腎茶黃酮組SOD活性（669.61±81.02 VS 1659.52±395.16、1342.03±286.51、1156.19±199.65、923.51±52.06、747.62±36.88）升高；模型組、（100、200）μg·mL-1腎茶黃酮組MDA活性（543.16±62.35 VS 225.51±43.41、394.13±54.69、456.47±69.87）降低（P<0.05）。與模型組相比，（100、200、300、400）μg·mL-1腎茶黃酮組細(xì)胞MDA水平（225.51±43.41 VS 394.13±54.69、456.47±69.87、498.68±56.52、526.16±48.77）升高（P<0.05);(200、300、400）μg·mL-1腎茶黃酮組細(xì)胞SOD水平（1659.52±395.16 VS 1156.19±199.65、923.51±52.06、747.62±36.88）降低（P<0.05），呈劑量依賴效應(yīng)。見(jiàn)表2。2.4 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡蛋白caspase3、caspase9、BCL2、BAX蛋白水平的影響

BAX與BCL2都為BCL2家族成員，其中BAX作為促凋亡基因、BCL2作為抗凋亡基因，二者相互作用影響細(xì)胞凋亡[16-17]。在腎小管上皮細(xì)胞損傷中，凋亡蛋白caspase-3[18]、caspase-9[19]水平升高可促進(jìn)細(xì)胞凋亡；caspase3、caspase9、BCL2、BAX作為凋亡蛋白，水平均可反映腎小管上皮細(xì)胞凋亡狀態(tài)[20]。TGF-β1/Smad3通路TGF-β1可以活化下游Smad3誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，同時(shí)可介導(dǎo)凋亡相關(guān)蛋白誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡影響疾病，在高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞中表達(dá)升高可加重疾病進(jìn)程[21]；可抑制氧化應(yīng)激保護(hù)大鼠糖尿病心臟組織從而實(shí)現(xiàn)對(duì)糖尿病的緩解作用[22]。本研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，模型組caspase3、caspase9、BAX、TGF-β1、Smad3水平升高，BCL2水平降低；提示腎衰竭中腎小管上皮細(xì)胞中促凋亡蛋白水平升高、抗凋亡蛋白水平升高，TGF-β1/Smad3通路蛋白水平升高從而加速腎小管上皮細(xì)胞凋亡，加重病情。與模型組相比，腎茶黃酮各劑量組隨著劑量的增加，caspase3、caspase9、BAX、TGF-β1、Smad3水平降低，BCL2水平升高，可能腎茶黃酮通過(guò)抑制TGF-β1表達(dá)從而抑制Smad3活化從而抑制凋亡蛋白表達(dá)、促進(jìn)抗凋亡蛋白表達(dá)，實(shí)現(xiàn)抑制細(xì)胞凋亡、降低細(xì)胞氧化應(yīng)激，同時(shí)促進(jìn)細(xì)胞增殖可能從而緩解BUN、Cr水平、使電解質(zhì)平衡逐漸恢復(fù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)急性腎衰腎小管上皮細(xì)胞的保護(hù)。圖4 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1/Smad3通路的影響

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