中藥飲片在生長環(huán)境、采收加工、運(yùn)輸存儲等過程中都容易攜帶或引入大量微生物,影響中藥材的質(zhì)量穩(wěn)定性。中藥飲片中的微生物種類的檢測,目前是按照2015版《中國藥典》四部通則中“1105非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查:微生物計(jì)數(shù)法”、“1106非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查:控制菌檢查法”及“1107非無菌藥品微生物限度標(biāo)準(zhǔn)”中要求執(zhí)行。傳統(tǒng)培養(yǎng)法存在檢測時(shí)間長、準(zhǔn)確率差、效率低、工作量大等缺點(diǎn),并且由于微生物本身的特性,大部分微生物無法在實(shí)驗(yàn)室條件下培養(yǎng)。同時(shí),藥典中微生物限度標(biāo)準(zhǔn)只規(guī)定研粉口服用貴細(xì)飲片、直接口服及泡服飲片不得檢出沙門菌/10 g,耐膽鹽革蘭陰性菌應(yīng)小于104cfu/1 g,而沒有明確規(guī)定其他中藥飲片及其限度標(biāo)準(zhǔn)。因此,研究中藥飲片中微生物種類的快速檢測技術(shù),將其應(yīng)用于特定中藥飲片樣本的檢測,獲得其微生物群體信息,不僅對中藥飲片的微生物污染風(fēng)險(xiǎn)評估具有重要意義,還可為中藥飲片中微生物的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的制定提供參考數(shù)據(jù)。本文將高通量基因檢測技術(shù)應(yīng)用于中藥飲片中微生物種類的檢測,不依賴微生物的分離培養(yǎng)而直接對微生物DNA進(jìn)行基因檢測,大大縮短了檢測時(shí)間,同時(shí)可獲得微生物的群體構(gòu)成和多樣性。... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１樣本添加示意圖??

２．４．２中藥飲片中微生物種類檢測結(jié)果??２．４．２．１每種飲片中檢出的微生物種類數(shù)量??對１１種中藥飲片的微生物檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析（見圖２．４），郁金中的微??生物種類數(shù)量最多，有１１８種；其次是山藥和白芍，山藥中有６８種微生物，白??芍中有５２種微生物；麥冬和醋延胡索中檢測到的微生物種類數(shù)量最少，均為４??種；玄參中微生物種類數(shù)量也較少，為６種。由此可見，飲片中微生物檢出的種??類數(shù)量與飲片不同的來源部位（根、莖、花、果實(shí)）相關(guān)性不大，而與具體的飲??片種類相關(guān)。??１４０?１??１１８??１２０?■??ｉ?１００??＾?８０?ｊ?Ｉ?６８??＾?６０?ｊ?５２?Ｉ?■??Ｉ?４０?｜?３：?Ｉ?２８?Ｉ?２８??３?＂〇，?Ｉ?１，１，?－，?Ｉ?１，１，?Ｍ?，?■?■，?Ｍ??中藥飲片櫸本??圖２．４中藥飲片中微生物數(shù)量統(tǒng)計(jì)??Ｆｉｇｕｒｅ?２．４?Ｔｈｅ?ｎｕｍｂｅｒ?ｏｆ?ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ?ｉｎ?ＣＨＭ??２１??

２高通量基因微陣列方法檢測中藥飲片中的微生物??ｂｐ?Ｍ?１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１?１??圖２．３中藥飲片ＤＮＡ電泳檢測結(jié)果??Ｆｉｇｕｒｅ?２．３?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＤＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ??Ｍ：?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?１：菊花；２：金銀花；３：砂仁；４：山藥；５：麥冬；６：浙貝母；７：醋??延胡索；８：玄參；９：白芍；１０：白術(shù)；１１：郁金??２．４．２中藥飲片中微生物種類檢測結(jié)果??２．４．２．１每種飲片中檢出的微生物種類數(shù)量??對１１種中藥飲片的微生物檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析（見圖２．４），郁金中的微??生物種類數(shù)量最多，有１１８種；其次是山藥和白芍，山藥中有６８種微生物，白??芍中有５２種微生物；麥冬和醋延胡索中檢測到的微生物種類數(shù)量最少，均為４??種；玄參中微生物種類數(shù)量也較少，為６種。由此可見，飲片中微生物檢出的種??類數(shù)量與飲片不同的來源部位（根、莖、花、果實(shí)）相關(guān)性不大，而與具體的飲??片種類相關(guān)。??１４０?１??１１８??１２０?■??ｉ?１００??＾?８０?ｊ?Ｉ?６８??＾?６０?ｊ?５２?Ｉ?■??Ｉ?４０?｜?３：?Ｉ?２８?Ｉ?２８??３?＂〇，?Ｉ?１，１，?－，?Ｉ


本文編號：2943132