蕨類植物在中草藥領域應用廣泛。一段時期以來,全球各地對新藥的開發(fā)工作越來越得到眾人的重視,對藥用蕨類植物更是青睞有加。在眾多的蕨類植物中,猴腿蹄蓋蕨作為生長在長白山地區(qū)的中草藥,是能夠同時滿足藥用和食用兩方面需求的重要蕨類植物。相關研究顯示,該種藥用蕨類植物能夠起到抗氧化以及抑制細菌增長等作用,然而國內外尚無有關蕨類植物-猴腿蹄蓋蕨抗炎作用及其機制的系統(tǒng)研究。本文為探討猴腿蹄蓋蕨乙醇提取物對LPS刺激誘導的小鼠肺損傷的抗炎功效和對LPS刺激的小鼠腹腔巨噬細胞的影響,借助信號轉導通路平臺,探析其對相關的關鍵蛋白分子以及炎性因子蛋白表達的作用,研究猴腿蹄蓋蕨乙醇提取物對小鼠體內外抗炎作用,對猴腿蹄蓋蕨的抗炎免疫功效給出科學合理的解釋,為猴腿蹄蓋蕨的開發(fā)與利用提供可靠的理論參考。本文采用MTT方法,深入分析猴腿蹄蓋蕨乙醇提取物對小鼠腹腔巨噬細胞的毒害影響;借助ELISA方法,探討猴腿蹄蓋蕨乙醇提取物對LPS引發(fā)的TNF-α以及IL-6分泌情況的作用;結合Western blot方法,研究炎癥信號通路中相關的關鍵蛋白分子的影響。通過仔細的研究發(fā)現(xiàn):當猴腿蹄蓋蕨乙醇提取物的濃度處于0-200.0... 

【文章來源】：延邊大學吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２．?ＡＭ提取物對于經(jīng)ＬＰＳ所刺激之后的ＮＯ小鼠腹腔巨噬細胞的分泌的具體??影響??

的ＰＧＥ２究竟有無相應的抑制作用加以明確，使用ＬＰＳ刺激細胞并用不同濃度??ＡＭ提取物分別處理細胞２４?ｈ，采納ＥＬＩＳＡ法來針對細胞上清液之中所具的??ＰＧＥ２含量加以檢測，詳情見圖３。一經(jīng)ＬＰＳ的具體處理之后，在細胞上清液之??中的ＰＧＥ２其具體含量顯著攀升（６０ｐｇ／ｍＬ），在己被ＡＭ提取物經(jīng)正式處理之??后，其實際含量顯見地降低且具特定程度的濃度依賴性，ＰＧＥ２受到來自于最高??劑量組之中的ＡＭ提取物所施以的抑制，而此抑制率具體達５９％。??８０－．??ｌｌｉｌｌ??ＬＰＳ?（０．１?＾ｉｇ／ｍＬ）?－?＋?？?＋?＋?＋??ＡＭ?（＾ｉｇ／ｍＬ）?０?０?１００?２５?５０?１００??圖３．經(jīng)ＬＰＳ的刺激之后小鼠腹腔巨噬細胞的ＰＧＥ２分泌受ＡＭ提取物的影響的??不意圖??注：和?ｌｐｓ?組加以比較，＊＊＊／７＜０．洲／??Ｆｉｇ?３．?Ａｔｈｙｒｉｕｍ?ｍｕｌｔｉｄｅｎｔａｔｕｍ?ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ?ｔｈｅ?ｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆ?ＰＧＥ２ｉｎ?ＬＰＳ－ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ?ｍｏｕ??ｅ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ??Ｎｏｔｅ：?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ＬＰＳ?ｇｒｏｕｐ，?＊ｐ＜０．０５ｙ?＊＊ｐ＜０．０１，?＊＊＊ｐ＜０．００１??３．２．２ＡＭ提取物對ＬＰＳ刺激誘導ｉＮＯＳ、ＣＯＸ－２蛋白表達的影??響??見下圖（圖４）可知，較之于正常的細胞來講，ＬＰＳ給了?ＰＭ細胞以特定的??刺激后這顯見地加大了?ｉＮＯＳ的分泌量，并且對細胞的總的活力并未有影響。但??是用ＡＭ提取物加以處理之后

Ｎｏｔｅ：＊ｐ＜０．０５，?０１，?＾＾＜０．００１??３．３．２人１＾提取物對￡１１１＜：、卩－￡１１１＜蛋白表達的影響??如圖９所示，經(jīng)ＬＰＳ誘導后，ＰＭ細胞的ＥＲＫ磷酸化明顯增加。但是經(jīng)ＡＭ??提取物的事先預處理之后，相較與單純的ＬＰＳ組而言，這種ＥＲＫ磷酸化水平明??顯增加的現(xiàn)象發(fā)生顯見地減弱，并且還表現(xiàn)出一定程度的劑量依賴性。所說明的??是ＡＭ提取物對ＬＰＳ效應中的ＥＲＫ途徑有抑制作用。Ｉｍａｇｅｎ?Ｊ軟件分析結果也??提示，ＡＭ在抑制ＬＰＳ的至炎作用中，對ｐ－ＥＲＫ蛋白的表達抑制作用在高劑量??組甚至可以達到６５％。??４６??

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本文編號：2904995