[目的]篩選和評價靈芝屬多糖對腎上腺酮(CORT)誘導神經(jīng)損傷的保護作用,為靈芝在抗抑郁功能方面的開發(fā)奠定基礎。[方法]以CORT誘發(fā)神經(jīng)細胞發(fā)生損傷后給予靈芝屬多糖提取物,分別通過MTT法、乳酸脫氫酶(LDH)胞外釋放法、總DNA定量分析法以及熒光標記法確定細胞毒性以及對損傷細胞的保護作用。[結果]結果顯示靈芝屬多糖在低作用濃度下對PC12細胞不具有毒性,在100μg/mL的作用濃度下靈芝孢子粉多糖(PGL)可以顯著提高損傷細胞存活率的比例為22%,減少LDH的釋放比例為11.08%,增加胞內(nèi)總DNA含量14.65%,是所有待測多糖中作用最佳的。[結論]PGL對細胞具有低毒的特點,顯著改善CORT對細胞的損傷作用,具有明顯的神經(jīng)保護作用,可作為抗抑郁藥物進行研究和開發(fā)。 

【文章來源】：生物技術. 2020年03期 第269-274頁

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

靈芝屬多糖提取物的細胞毒性檢測

通過檢測受損神經(jīng)細胞胞外乳酸脫氫酶(LDH)的活性也可以體現(xiàn)靈芝屬多糖的保護作用。其結果與細胞存活(MTT)檢測結果相一致。與對照組相比較CORT可以顯著增加LDH的胞外釋放，釋放率為22.29%(圖3)，說明CORT能夠使細胞發(fā)生裂解，導致胞內(nèi)LDH的流出。靈芝屬多糖可以保護細胞的完整性，減少LDH的向外釋放，其中PGL的效果最顯著，可以使釋放率降低到11.21%，接近于正常對照組的釋放量。其次PLE、PLU和PSI處理組的釋放量分別為12.89%、15.96%和16.36%。結果證明靈芝屬多糖對神經(jīng)損傷細胞具有顯著的保護作用。圖3 靈芝屬多糖提取物減少LDH釋放的保護作用

圖2 靈芝屬多糖提取物對損傷神經(jīng)的保護作用為了進一步證明靈芝屬多糖的神經(jīng)保護作用，定量檢測細胞中總DNA的含量可以直觀地反映出細胞的數(shù)量。熒光燃料標記DNA，通過熒光強度可以定量的地分析完整DNA的含量從而反映活細胞的數(shù)量�？侱NA檢測結果如圖4所示，從結果中可以發(fā)現(xiàn)CORT可以使細胞內(nèi)DNA的數(shù)量明顯下降，僅為對照組的86.57%，與模型組相比較PGL和PLE處理組可以提高受損細胞的存活，保持細胞DNA的結構，總DNA的含量分別可以提高14.65%和6.8%，而PSI和PLU的處理組雖然可以提高總DNA的含量，但是提升效果與模型對照組未達到顯著性差異的程度。定量分析結果說明PGL和PLE的效果優(yōu)于PSI和PLU。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]靈芝多糖的結構及其表征方法研究進展[J]. 張匯,聶少平,艾連中,夏永軍,熊智強,王光強.  中國食品學報. 2020(01)
[2]靈芝防治高血壓的研究進展[J]. 趙順菊,付立忠.  食用菌. 2019(06)
[3]赤芝、紫芝和鹿角靈芝醇提物的活性成分及生物活性研究[J]. 陳建飛,周愛珠,程萱,童文彬,劉玉柱,張海燕,胡玉梅,練明姿,周晶,呂國英,張作法.  食藥用菌. 2019(04)
[4]西藏白肉靈芝段木栽培技術[J]. 何煥清,陳淑娟,黃育江,肖自添,劉明,徐江,邱遠輝.  中國食用菌. 2019(05)
[5]紫芝子實體活性多糖的純化和結構解析[J]. 應一君,劉艷芳,張勁松,唐慶九,楊焱,周帥,顏夢秋,張忠,韓偉.  食品與生物技術學報. 2019(01)
[6]靈芝多糖對脂多糖誘導的巨噬細胞TLR4/NF-κB通路調(diào)控及下游炎癥因子的影響[J]. 楊燕燕,謝金東,周建華,林瑋,王訓立.  實驗動物與比較醫(yī)學. 2018(06)
[7]靈芝的扶正固本及對“亞健康”者的保健作用[J]. 李衛(wèi)東,林志彬.  食藥用菌. 2016(01)
[8]不同生長期靈芝子實體三萜酸和多糖含量測定[J]. 李保明,華正根,王洪慶,劉超,李曄,陳若蕓.  食藥用菌. 2016(01)



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