【目的】觀察消癖顆粒單藥及聯合他莫昔芬對乳腺癌細胞增殖、遷移、克隆、凋亡及細胞內DNA損傷程度的影響,探討消癖顆粒與他莫昔芬的協同抗癌作用�！痉椒ā窟x取雌激素受體(ER)+、孕激素受體(PR)+人源乳腺癌細胞MCF-7和T47D,將消癖顆粒、他莫昔芬單藥或聯合用藥加入對數生長期的MCF-7和T47D細胞中,以不加藥同期培養(yǎng)的細胞作為空白組。分別采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法、乳酸脫氫酶(LDH)實驗、酶聯免疫吸附測定法(ELISA)、劃痕實驗、球囊形成實驗、平板克隆實驗及原位末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)標記法(TUNEL)和Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)雙染色法檢測干預后乳腺癌細胞MCF-7和T47D的生物學表現�！窘Y果】消癖顆粒、他莫昔芬單藥或聯合用藥均有抑制乳腺癌細胞MCF-7和T47D增殖的作用,呈濃度依賴性,且聯合用藥組抑制率高于單藥組(P0.05)。與消癖顆粒、他莫昔芬單藥比較,聯合用藥顯著抑制乳腺癌細胞MCF-7和T47D球囊形成、克隆及遷移能力(P0.05),且能促進細胞內8-OHdG生成增多(P0.05),導致細胞內DNA氧化損傷,最后誘導乳腺癌細胞凋亡。消癖顆粒和他莫昔芬單藥或聯合用藥均可顯著增加MCF-7和T47D細胞凋亡率,且聯合用藥組凋亡細胞率明顯高于單藥組(P0.05)。【結論】消癖顆粒和他莫昔芬單藥或聯合用藥可抑制MCF-7和T47D細胞增殖并促進其凋亡,且聯合用藥可增強癌細胞對他莫昔芬的敏感性,效果優(yōu)于單藥作用。
【部分圖文】：

圖9結果顯示，相同的劃痕實驗檢測時間點，空白組的劃痕空間隨著細胞的生長距離逐漸變短，而消癖顆粒組、他莫昔芬組、聯合用藥組細胞向劃痕空間的生長速度顯著低于空白組，距離相較于空白組稍寬（P<0.05），其中，聯合用藥組細胞遷移能力明顯減弱（P<0.05）。上述實驗結果表明，消癖顆粒對乳腺癌MCF-7和T47D細胞的遷移侵襲能力有顯著影響，并且可以顯著提高他莫昔芬對乳腺癌細胞遷移侵襲能力的抑制作用。2.6 消癖顆粒、他莫昔芬單藥及聯合用藥對乳腺癌細胞MCF-7和T47D克隆能力的影響

將消癖顆粒聯合他莫昔芬（10μmol/L）干預細胞。從圖2結果可知，聯合用藥組細胞增殖抑制率優(yōu)于消癖顆粒單藥組，各組間細胞增殖抑制率有統(tǒng)計學差異（P<0.05）。消癖顆粒聯合用藥的最佳濃度中：MCF-7,800μg/m L;T47D,600μg/m L。消癖顆粒組、他莫昔芬組、聯合用藥組24 h的細胞存活率較空白組明顯降低（P<0.05），且聯合用藥組細胞存活率低于他莫昔芬組和消癖顆粒組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），消癖顆粒組和他莫昔芬組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。提示消癖顆粒與他莫昔芬聯合用藥對乳腺癌細胞的抑制作用明顯優(yōu)于消癖顆�；蛩舴覇斡谩D2 消癖顆粒聯合他莫昔芬對MCF-7和T47D細胞存活率的影響（±s,n=3)

圖4結果顯示：與空白組比較，消癖顆粒組、他莫昔芬組、聯合用藥組細胞內8-OHd G的含量均明顯升高（P<0.05），分別上升至空白組的2.40倍、2.80倍和3.60倍。表明消癖顆粒和他莫昔芬均能促進乳腺癌細胞MCF-7和T47D中8-OHd G的含量增加，增加氧化損傷誘導細胞凋亡，且消癖顆粒能增強他莫昔芬誘導氧化損傷的作用。2.3 消癖顆粒、他莫昔芬單藥及聯合用藥對乳腺癌細胞球囊形成的影響
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