目的探討糖腎寧對KK-Ay小鼠足細胞上皮間質轉分化的影響。方法采用KK-Ay小鼠建立糖尿病腎病小鼠模型,隨機分為模型組、糖腎寧組及纈沙坦組,每組10只,并將10只C57BL/6J小鼠作為正常對照組。各組小鼠干預給藥12周后處死,心尖取血、摘取雙側腎臟,進行相應指標檢測。使用酶聯(lián)免疫法檢測血清肌酐及尿素氮水平,PAS染色觀察各組小鼠腎組織細胞外基質增生情況,免疫組化檢測各組小鼠腎組織Collagen I及FN蛋白表達,WB及RT-PCR檢測各組小鼠足細胞P-cadherin和FSP-1的蛋白及mRNA表達。結果 (1)與正常對照組相比,模型組小鼠血清肌酐、尿素氮水平明顯升高(P0.05);與模型組相比,糖腎寧組及纈沙坦組小鼠血清肌酐、尿素氮水平明顯降低(P0.05)。(2)與正常對照組相比,模型組小鼠腎小球細胞外基質明顯增生,基質蛋白Collagen I及FN表達上調(P0.05);與模型組相比,糖腎寧組及纈沙坦組小鼠腎小球細胞外基質增生減輕,基質蛋白Collagen I及FN表達明顯下調(P0.05)。(3)與正常對照組相比,模型組小鼠足細胞P-cadherin蛋白及mRNA表達明顯下調(P0.05),FSP-1蛋白及mRNA表達明顯上調(P0.05);與模型組相比,糖腎寧組及纈沙坦組小鼠足細胞P-cadherin蛋白及mRNA表達明顯上調(P0.05),FSP-1蛋白及mRNA表達明顯下調(P0.05)。結論糖腎寧能夠抑制糖尿病腎病小鼠足細胞上皮間質轉分化,可能是其減輕腎小球細胞外基質增生、延緩疾病進展的分子機制。
【部分圖文】：

使用PAS染色觀察各組小鼠腎組織細胞外基質增生情況。與正常對照組相比，模型組小鼠腎小球肥大，細胞外基質出現(xiàn)增生;與模型組相比，糖腎寧組及纈沙坦組小鼠腎小球減小，細胞外基質增生減輕。提示糖腎寧能夠減輕KK-Ay小鼠腎小球細胞外基質增生。見圖1。2.3 糖腎寧對KK-Ay小鼠腎小球細胞外基質蛋白Collagen I及FN蛋白表達的影響

應用免疫組化檢測各組小鼠腎組織細胞外基質蛋白Collagen I及FN蛋白表達情況。與正常對照組相比，模型組小鼠腎小球細胞外基質蛋白Collagen I及FN蛋白表達明顯增加;與模型組相比，糖腎寧組及纈沙坦組小鼠Collagen I及FN蛋白表達明顯減少。提示糖腎寧能夠減少KK-Ay小鼠腎小球細胞外基質蛋白Collagen I及FN蛋白表達。見圖2、表3。2.4 糖腎寧對KK-Ay小鼠足細胞EMT標志蛋白P-cadherin及FSP-1蛋白表達的影響

應用WB檢測各組小鼠腎組織P-cadherin蛋白及FSP-1蛋白表達情況。實驗結果顯示，與正常對照組相比，模型組小鼠腎組織P-cadherin蛋白表達明顯下調(P<0.05),FSP-1蛋白表達明顯上調(P<0.05);與模型組相比，糖腎寧組及纈沙坦組小鼠腎組織P-cadherin蛋白表達明顯上調(P<0.05),FSP-1蛋白表達明顯下調(P<0.05)。實驗結果表明，糖腎寧能夠上調KK-Ay小鼠足細胞表型標志蛋白P-cadherin表達，下調間充質表型標志蛋白FSP-1蛋白表達。見圖3、表4。2.5 糖腎寧對KK-Ay小鼠足細胞EMT標志蛋白P-cadherin及FSP-1基因mRNA轉錄水平的影響
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