目的:腦缺血再灌注損傷(Cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)是導(dǎo)致缺血性腦卒中(Ischemic stroke,IS)進(jìn)一步惡化的重要原因,其病理改變涉及復(fù)雜的時(shí)間、空間級(jí)聯(lián)反應(yīng),最終導(dǎo)致腦穩(wěn)態(tài)失調(diào)。以往的研究只從單一環(huán)節(jié)入手,忽視腦的整體性,神經(jīng)血管單元(Neurovascular Unit,NVU)穩(wěn)態(tài)的治療策略強(qiáng)調(diào)從整體研究腦神經(jīng)血管系統(tǒng)的損傷及其機(jī)制,以維持腦微環(huán)境的整體穩(wěn)定,促進(jìn)神經(jīng)元存活和神經(jīng)功能的恢復(fù),以期達(dá)到降低IS致殘率和死亡率的目標(biāo)。課題組前期研究表明,天麻乙酸乙酯提取物具有顯著抗CIRI的作用,其所含的酚性成分D、H能通過(guò)血腦屏障(Blood brain barrier,BBB)進(jìn)入腦組織,對(duì)CIRI早期NVU損傷的不同病理環(huán)節(jié)具有選擇性作用。本研究探討天麻酚性成分D、H對(duì)CIRI早期NVU的保護(hù)作用及時(shí)效性特點(diǎn),并探討其NVU保護(hù)作用的可能機(jī)制。方法:通過(guò)線栓法復(fù)制大鼠(Middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型,各組動(dòng)物于腦缺血2h再灌注2h、24h,采用Longa改良后的5分法對(duì)模型大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀進(jìn)行神經(jīng)病學(xué)評(píng)分、采用TTC染色法檢測(cè)腦梗死體積、采用EB滲透法測(cè)定腦組織EB含量,采用透射電鏡觀察NVU超微結(jié)構(gòu)(BBB、神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞)的變化,以評(píng)價(jià)天麻酚性成分D、H對(duì)NVU的保護(hù)作用;Western-Blot法檢測(cè)模型大鼠缺血側(cè)腦組織中NVU各組成成分標(biāo)志蛋白表達(dá)水平的變化,以探討其保護(hù)作用的可能機(jī)制。結(jié)果:1.天麻酚性成分D、H對(duì)MCAO/R模型大鼠NVU的保護(hù)作用大鼠腦缺血2h再灌注2h:天麻酚性成分D、H對(duì)模型大鼠神經(jīng)病學(xué)評(píng)分、腦梗死體積均無(wú)明顯影響,能降低模型大鼠缺血側(cè)腦組織EB的滲出含量。大鼠腦缺血2h再灌注24h:天麻酚性成分D、H均能降低模型大鼠的神經(jīng)病學(xué)評(píng)分、減小腦梗死體積以及減少缺血側(cè)腦組織EB的滲出含量;并且能減輕模型大鼠NVU超微結(jié)構(gòu)的破壞程度,表現(xiàn)為:BBB損傷減輕、血管腔和基底膜形態(tài)未完全被破壞,星型膠質(zhì)細(xì)胞足突水腫明顯減輕;神經(jīng)元損傷減輕,細(xì)胞核常染色質(zhì)均勻、異染色質(zhì)減少,核膜有凹陷;膠質(zhì)細(xì)胞損傷均減輕,細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞減輕,周圍組織水腫減輕。2.天麻酚性成分D、H對(duì)MCAO/R模型大鼠NVU保護(hù)作用的機(jī)制大鼠腦缺血2h再灌注2h:各組大鼠缺血側(cè)腦組織Occludin、Claudin-5、MAP-2、GFAP和CD68的表達(dá)均無(wú)明顯變化。大鼠腦缺血2h再灌注24h:天麻酚性成分D、H能明顯升高模型大鼠缺血側(cè)腦組織Occludin、Claudin-5的表達(dá)水平、降低GFAP的表達(dá)水平、有升高M(jìn)AP-2表達(dá)的趨勢(shì)。天麻酚性成分H還能明顯降低CD68的表達(dá)水平。結(jié)論:天麻酚性成分D、H在腦缺血2h再灌注24h時(shí)對(duì)MCAO/R模型大鼠NVU有保護(hù)作用。其機(jī)制可能與其上調(diào)BBB標(biāo)志蛋白Occludin和Claudin-5的表達(dá)水平、下調(diào)星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白GFAP的表達(dá)水平有關(guān);成分H對(duì)NVU保護(hù)作用的機(jī)制可能還與下調(diào)小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志蛋白CD68的表達(dá)水平有關(guān)。
【學(xué)位單位】：云南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R285.5
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文索引表
引言
第一部分 天麻酚性成分D、H對(duì)MCAO/R模型大鼠神經(jīng)血管單元的保護(hù)作用
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
    3. 數(shù)據(jù)處理
    4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5. 討論
    6. 小結(jié)
第二部分 天麻酚性成分D、H對(duì)MCAO/R模型大鼠神經(jīng)血管單元的保護(hù)作用機(jī)制
    1. 實(shí)驗(yàn)材料
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
    3. 數(shù)據(jù)處理
    4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5. 討論
    6. 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
參與項(xiàng)目
致謝

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本文編號(hào)：2855022