青胡桃為胡桃科植物胡桃(Juglans regia L.)的新鮮或干燥幼果,具有清熱解毒、消腫止痛、烏發(fā)等功效,在民間主要用于治療牙痛,痛經(jīng),肝胃氣痛,癌癥痛,胃神經(jīng)痛,急、慢性胃痛,腹痛,須發(fā)早白等。青胡桃藥材收錄于2003版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》,但青胡桃藥材的含量測(cè)定項(xiàng)還尚未完善,青胡桃藥材的深度開(kāi)發(fā)利用受到限制。為了改變現(xiàn)狀,本課題以青胡桃藥材為研究對(duì)象,以《中國(guó)藥典》2015版第四部中藥材質(zhì)量控制通則為指導(dǎo),對(duì)青胡桃藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及結(jié)果如下:1.青胡桃藥材中總黃酮含量測(cè)定及抗氧化活性研究總黃酮類化合物為青胡桃的主要化學(xué)成分之一,此章節(jié)對(duì)青胡桃總黃酮提取方法進(jìn)行優(yōu)化。首先對(duì)顯色條件進(jìn)行優(yōu)化,再進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)考察,最后進(jìn)行3因素3水平正交實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,青胡桃總黃酮的最佳提取方法為:提取時(shí)間90min,溶劑濃度55%,料液比(g·m L~(-1))為1:30。應(yīng)用此方法測(cè)得貴州省10批不同產(chǎn)地青胡桃總黃酮含量在9.36~9.61%之間。以ABTS自由基清除能力和DPPH自由基清除能力做為指標(biāo),對(duì)青胡桃總黃酮抗氧化活性進(jìn)行評(píng)價(jià)。得出在一定濃度范圍內(nèi),青胡桃總黃酮含量與ABTS自由基和DPPH自由基的清除能力呈正相關(guān)。不同產(chǎn)地青胡桃對(duì)ABTS自由基和DPPH自由基清除能力的影響不顯著。2.青胡桃藥材的指紋圖譜研究此部分采用高效液相色譜法建立了貴州省青胡桃指紋圖譜的測(cè)定方法。應(yīng)用本方法對(duì)貴州省12批不同產(chǎn)地青胡桃藥材進(jìn)行測(cè)定,其中10批青胡桃藥材的相似度在0.9以上,只有兩批藥材出現(xiàn)稍微差異。得出貴州省青胡桃藥材具有較好的穩(wěn)定性,為貴州省青胡桃藥材的質(zhì)量控制、研究與開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。3.青胡桃質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究根據(jù)《中國(guó)藥典》2015版中相關(guān)規(guī)定,全面的對(duì)青胡桃藥材水分、灰分、浸出物及重金屬含量進(jìn)行測(cè)定;采用放大鏡對(duì)青胡桃性狀進(jìn)行研究;采用顯微鏡對(duì)其進(jìn)行顯微鑒別;采用紫外分光光度對(duì)其總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定。參考相關(guān)資料及相應(yīng)醫(yī)藥書(shū)籍,對(duì)青胡桃藥材的中藥屬性、主要功效和儲(chǔ)存方法進(jìn)行總結(jié)。綜合以上中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究結(jié)果,參照《中國(guó)藥典》2015年版相關(guān)通則,撰寫(xiě)貴州省青胡桃藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案,為大力開(kāi)發(fā)貴州省青胡桃藥材提供科學(xué)依據(jù)。4.青胡桃提取物的體外活性研究此部分采用響應(yīng)面法對(duì)青胡桃總黃酮含量與得膏率的平均權(quán)重進(jìn)行優(yōu)化,得最佳前處理?xiàng)l件為:提取時(shí)間75.27 min,溶劑濃度50.63%,料液比(g·m L-1)為1:32.07,總黃酮含量為9.84%,得膏率為28.07%,平均權(quán)重為18.95%。對(duì)乙醇,石油醚,乙酸乙酯和水制備的青胡桃萃取液進(jìn)行體外抗腫瘤活性、抗氧化活性研究。結(jié)果表明,在體外抗氧化研究中,青胡桃萃取液的抗氧化能力存在明顯差異。青胡桃萃取液清除DPPH、ABTS自由基能力大小順序?yàn)?乙醇提取物水萃取部分乙酸乙酯萃取部分石油醚萃取部分。青胡桃提取物對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制能力的排序?yàn)橐宜嵋阴ポ腿〔糠质兔演腿〔糠忠掖继崛∥锼腿〔糠?青胡桃提取物對(duì)人胃癌MKN45細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制能力的排序?yàn)槭兔演腿〔糠忠宜嵋阴ポ腿〔糠忠掖继崛∥锼腿〔糠�。青胡桃提取物�?duì)Hela細(xì)胞和MKN45細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制效果與給藥濃度均具有量效關(guān)系,呈現(xiàn)正相關(guān)。青胡桃提取物體外活性的初步篩選,為貴州青胡桃的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用與深入研究提供參考依據(jù)。
【學(xué)位單位】：貴州師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R284;O657.72
【部分圖文】：

每個(gè)因素對(duì)總黃酮提取的影響順序?yàn)樘崛r(shí)間（A）>溶劑濃度（B）>料液比（C）。三因素三水平優(yōu)化水平組合為 A3B2C2，本實(shí)驗(yàn)青胡桃總黃酮最佳提取方法為精密稱取青胡桃藥材（100 目）2 g，以液料比 30:1 加入 55%乙醇溶液，超聲功率300 W，超聲時(shí)間 90 min，提取 2 次，室溫放冷后以 55%乙醇溶液補(bǔ)重，離心后過(guò)濾，合并上層濾液。表 2-5 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析Table 2-5 Analysis of orthogonal experimental results源 III 型平方和 df 均方 F Sig. 顯著性校正模型 13.429a6 2.238 121.125 0.008 **截距 426.147 1 426.147 23062.687 0.000 **A 7.843 2 3.921 212.227 0.005 **B 4.173 2 2.086 112.915 0.009 **C 1.413 2 0.706 38.234 0.025 *誤差 0.037 2 0.018總計(jì) 439.613 9校正的總計(jì) 13.466 8注：**表示極顯著水平（p＜0.01）；*表示顯著水平（p＜0.05）

圖 3-1 250、260、270、280 nm 波長(zhǎng)色譜圖Fig. 3-1 Chromatograms of 250、260、270、280 nm在選定 250、260、270、280 nm 四個(gè)波長(zhǎng)及全波長(zhǎng)條件下進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，掃描結(jié)果如圖 3-1 所示，在 250 nm 下，色譜峰較多且響應(yīng)值高。故選擇 250 nm作為青胡桃指紋圖譜測(cè)定的檢測(cè)波長(zhǎng)。3.3.2 流動(dòng)相的選擇為了最大程度的分離青胡桃藥材譜圖中各色譜峰，以甲醇-水、甲醇-0.1%甲酸水作為流動(dòng)相考察，結(jié)果如圖 3-2 所示，發(fā)現(xiàn)甲醇-0.1%甲酸水作為流動(dòng)相色譜峰分離度更好，故選擇甲醇-0.1%甲酸水作為流動(dòng)相。

圖 3-1 250、260、270、280 nm 波長(zhǎng)色譜圖Fig. 3-1 Chromatograms of 250、260、270、280 nm在選定 250、260、270、280 nm 四個(gè)波長(zhǎng)及全波長(zhǎng)條件下進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，掃描結(jié)果如圖 3-1 所示，在 250 nm 下，色譜峰較多且響應(yīng)值高。故選擇 250 nm作為青胡桃指紋圖譜測(cè)定的檢測(cè)波長(zhǎng)。3.3.2 流動(dòng)相的選擇為了最大程度的分離青胡桃藥材譜圖中各色譜峰，以甲醇-水、甲醇-0.1%甲酸水作為流動(dòng)相考察，結(jié)果如圖 3-2 所示，發(fā)現(xiàn)甲醇-0.1%甲酸水作為流動(dòng)相色譜峰分離度更好，故選擇甲醇-0.1%甲酸水作為流動(dòng)相。
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5 謝�；�，牟繼平;胡桃科各屬的木材解剖[J];廣西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);1995年04期

6 邱小敏;龍光日;;胡桃科一奇特樹(shù)種——單葉化香樹(shù)[J];植物雜志;1991年03期

7 汪勁武;胡桃科植物絮語(yǔ)[J];植物雜志;1994年04期

8 鞏紅冬;謝鵬祿;;甘肅胡桃科有毒植物資源調(diào)查研究[J];園藝與種苗;2015年05期

9 朱東升;;胡桃科植物生物活性研究進(jìn)展[J];海峽藥學(xué);2010年10期

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6 梅瑞;青龍衣最佳抗腫瘤提取方法的篩選與急毒研究及胡桃醌對(duì)胃癌的作用評(píng)價(jià)[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2018年

7 李大馨;東京楓楊化學(xué)成分及其抗腫瘤活性研究[D];天津大學(xué);2007年

8 崔保松;青錢柳葉的化學(xué)成分研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

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