林蛙又稱雪蛤,是一種藥用價值極高的兩棲動物。雌蛙輸卵管干制品是一種名貴的中藥材和滋補保健品----林蛙油,具有“補腎益精,養(yǎng)陰潤肺”的功效。藥理學(xué)研究表明,林蛙油具有促進動物生長發(fā)育,抗疲勞,抗應(yīng)激,增強免疫力,防治小兒哮喘,抗腫瘤,抗抑郁等藥效。林蛙油的基礎(chǔ)研究比較薄弱,化學(xué)成分復(fù)雜,且含量較低,因此對林蛙油有效成分的研究進展緩慢。林蛙油主產(chǎn)于吉林省長白山一帶,為長白山地區(qū)傳統(tǒng)的道地藥材。本論文收集了林蛙油各主產(chǎn)區(qū)27批樣品,覆蓋了主產(chǎn)區(qū)林蛙油的主要來源。主要對林蛙油質(zhì)量評價方法,以及有效成分衍生物進行了系統(tǒng)的研究。首先測定了長白山林蛙主產(chǎn)區(qū)的27批林蛙油的膨脹系數(shù)、醇浸出物、總水分、總灰分等理化指標,結(jié)果顯示,27批樣品的膨脹系數(shù)有一定的差異,但均符合藥典規(guī)定,理化指標的測定結(jié)果為進一步優(yōu)化林蛙油的產(chǎn)地加工技術(shù)和檢驗檢測分析提供了參考。此外,本文通過薄層層析色譜和指紋圖譜的研究,完善了林蛙油的質(zhì)量控制體系。此外,本文通過對林蛙油中止咳有效成分1-甲基海因柱前衍生化法的研究,改善了2015年版《中國藥典》一部哈蟆油標準中的色譜條件,提高了檢測靈敏度。本文亦對林蛙油的抗疲勞譜效關(guān)系進行了研究,通過建立小鼠抗疲勞動物模型,篩選出林蛙油石油醚萃取物具有較好的抗疲勞活性,同時檢測了三種主要抗疲勞生化指標,即血乳酸、血清尿素氮和肝糖原,進一步探討了林蛙油石油醚萃取物的抗疲勞作用機制。隨后,對不同批次的林蛙油石油醚萃取物的19個共有峰峰面積與林蛙油抗疲勞能力的藥效數(shù)據(jù)進行關(guān)聯(lián)度分析,得到關(guān)聯(lián)度,從而得到各個色譜峰與抗疲勞藥效之間的關(guān)系。灰色關(guān)聯(lián)度分析結(jié)果顯示,指紋圖譜中各峰所代表的化學(xué)成分與抗疲勞作用均有一定的關(guān)聯(lián)(P0.65),表明石油醚萃取物的抗疲勞作用是其化學(xué)成分共同作用的結(jié)果。根據(jù)關(guān)聯(lián)度的大小,確定各成分對抗疲勞藥效貢獻的大小順序為:325154178,并指認出17號峰為7-酮基膽甾醇。為了擴展林蛙油中有效止咳活性成分的研究,本文對其中的止咳活性化學(xué)成分衍生物1-甲基海因布洛芬和1-甲基海因阿司匹林進行了合成并做了藥效學(xué)研究。1-甲基海因布洛芬和1-甲基海因阿司匹林的合成均通過1-甲基海因亞甲基胺和布洛芬及阿司匹林的羧基結(jié)合成酰胺制得。通過核磁共振氫譜和碳譜以及單晶結(jié)構(gòu)解析對所合成的1-甲基海因布洛芬和1-甲基海因阿司匹林化學(xué)結(jié)構(gòu)進行了表征,進而進行了抗炎和止咳藥效學(xué)實驗。實驗結(jié)果表明,1-甲基海因布洛芬,1-甲基海因阿司匹林的止咳、抗炎活性優(yōu)于單獨的1-甲基海因和布洛芬或阿司匹林,為止咳抗炎前體藥物的開發(fā)提供了一定參考。
【學(xué)位單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R284;R285.5
【部分圖文】：

2.3 實驗結(jié)果薄層層析圖譜中,與對照品斑點相應(yīng)的位置上，供試品均顯示相同顏色的斑點(圖2.1)。圖 2.1 不同產(chǎn)地林蛙油的薄層色譜鑒別1：膽甾-5-烯-3β,7β-二醇對照品；2-7：林蛙油供試品2.4 討論膽甾-5-烯-3β,7β-二醇是林蛙油中主要的甾體類化學(xué)成分，在 105℃條件下與10%硫酸乙醇反應(yīng)顯藍色，效果明顯，因而本文以膽甾-5-烯-3β,7β-二醇為對照品，測定其他 27 批不同產(chǎn)地林蛙油樣品。最終確定，27 批各主產(chǎn)區(qū)樣品在此條件下，均顯示出與對照品相同顏色斑點，并且分離度較好。第 3 節(jié) 林蛙油中雌二醇及甾體類化合物含量測定林蛙油中的化學(xué)成分復(fù)雜，研究基礎(chǔ)比較薄弱，雖然已有一些關(guān)于林蛙油中的化學(xué)成分報道

雌二醇標準曲線

雌二醇對照品溶液HPLC色譜圖
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本文編號：2841704