目的:通過觀察桃核承氣湯對(duì)慢性腎衰竭大鼠血常規(guī)、腎功能、腎臟病理學(xué)形態(tài)、Wnt/β-catenin信號(hào)通路中的Axin影響,探討該方延緩慢性腎衰竭的作用機(jī)理,從而為臨床上治療慢性腎衰竭提供思路和客觀的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:采用5/6腎切除大鼠慢性腎衰動(dòng)物模型作為研究對(duì)象,將125只7周齡成年雄性Wistar大鼠喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為空白組、假手術(shù)組、模型組、尿毒清組、桃核承氣湯組。其中模型組、尿毒清組、桃核承氣湯這三組大鼠運(yùn)用5/6腎切除法復(fù)制慢性腎衰竭的模型,在腹腔水合氯醛注射麻醉后,切除大鼠左腎2/3腎組織并在一周以后切除大鼠右側(cè)腎臟;假手術(shù)組大鼠僅用鑷子剝除兩腎被膜。術(shù)后1-3天連續(xù)使用青霉素腹腔注射預(yù)防感染。這5組均在造模完成后,每天上午9點(diǎn)對(duì)每組大鼠分別給予不同藥物:空白、假手術(shù)和模型這三組大鼠使用等量的生理鹽水灌胃;尿毒清組大鼠運(yùn)用尿毒清顆粒混懸液進(jìn)行灌胃;桃核承氣湯組用桃核承氣湯飲片煎熬濃縮后進(jìn)行灌胃,連續(xù)灌胃56天后麻醉后處死,其間使用采血針在腹主動(dòng)脈取血用于大鼠紅細(xì)胞、血紅蛋白、血肌酐、尿素氮檢測(cè);并取左腎組織的一部分放置于凍存管中,進(jìn)行Western Blot法檢測(cè)左腎組織Wnt1、Axin、β-catenin的蛋白含量;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)Wnt1、Axin、β-catenin的mRNA表達(dá)情況;另一部分存放于多聚甲醛中,經(jīng)HE染色后用光鏡觀察五組腎組織病理變化。結(jié)果:(1)桃核承氣湯組與模型組對(duì)比,RBC、Hb的含量均有不同程度的升高(P0.05)。(2)血清Scr、BUN較模型組和尿毒清組降低(P0.05),其結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)Western Blot結(jié)果顯示,桃核承氣湯組相比模型組,左腎組織Wnt1、β-catenin的蛋白表達(dá)下降(P0.05),Axin表達(dá)水平上調(diào)(P0.05)。(4)實(shí)時(shí)熒光定量qPCR示桃核承氣湯組相比模型組與尿毒清組,Wnt1、β-catenin表達(dá)下調(diào)(P0.05),Axin表達(dá)水平上調(diào)(P0.05)。(5)腎組織HE染色顯示:空白組與假手術(shù)組左腎組織結(jié)構(gòu)正常;模型組左腎組織結(jié)構(gòu)紊亂,腎小球固縮,基膜增厚、腎間質(zhì)纖維增生,可見炎性細(xì)胞浸潤(rùn);桃核承氣湯較尿毒清組與模型組腎纖維化程度有明顯改善。結(jié)論:(1)桃核承氣湯通過運(yùn)用化瘀瀉濁的治法可以明顯改善慢性腎衰竭大鼠貧血狀態(tài)和腎功能,能減輕大鼠腎臟病理?yè)p傷。(2)桃核承氣湯能通過抑制5/6腎切除大鼠模型中Wnt/β-catenin信號(hào),下調(diào)Wnt1、β-catenin和上調(diào)Axin表達(dá),減慢腎纖維化的發(fā)展,從而延緩慢性腎衰竭進(jìn)程。
【學(xué)位單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【文章目錄】：
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中文摘要
Abstract
引言
第一部分 實(shí)驗(yàn)部分
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥品
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        1.4 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 分組與造模
        2.2 藥物配制與灌胃給藥
        2.3 觀察內(nèi)容
        2.4 標(biāo)本采集
        2.5 檢測(cè)方法
        2.6 統(tǒng)計(jì)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 一般情況觀察
        3.2 腎臟的肉眼觀察
        3.3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)
        3.4 Western blot檢測(cè)結(jié)果
        3.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果
        3.6 左腎組織HE染色觀察結(jié)果
第二部分 理論部分
    1 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)CRF的認(rèn)識(shí)
        1.1 CRF發(fā)生的病理機(jī)制
        1.2 CRF與腎纖維化
        1.3 Wnt/β-catenin信號(hào)通路與腎纖維化關(guān)系
        1.4 慢性腎衰竭分期
        1.5 慢性腎衰竭西醫(yī)治療措施
    2 從中醫(yī)角度探討慢性腎衰竭
        2.1 CRF的中醫(yī)病名
        2.2 CRF的基本病因
        2.3 CRF的基本病機(jī)
        2.4 桃核承氣湯方藥分析
        2.5 臨證加減
        2.6 桃核承氣湯治療慢性腎衰竭機(jī)理
第三部分 分析與討論
    1 桃核承氣湯治療CRF的立法依據(jù)
    2 CRF大鼠常見造模方法的優(yōu)缺點(diǎn)比較
    3 實(shí)驗(yàn)對(duì)照組的選擇
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析及意義
    5 實(shí)驗(yàn)的不足與展望
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷

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本文編號(hào)：2838101