大麥芽為大麥發(fā)芽的穎果,具有降血脂、降血糖、抗氧化、抗腫瘤等多種生理和藥理作用。本文以不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽為研究對象,探究了不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽可溶性糖類成分變化;篩選出α-葡萄糖苷酶抑制活性最好可溶性的粗糖;并優(yōu)化了大麥芽糖類成分的提取條件以提高得率;根據(jù)α-葡萄糖苷酶抑制活性分離純化大麥芽低聚糖并對結(jié)構(gòu)進行鑒定;課題的主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:大麥模擬箱式發(fā)芽得到發(fā)芽3-7天的大麥芽,烘干(50℃)粉碎得到大麥芽粉末,分別采用水浸提(40℃) , Sevag法除蛋白,醇沉得粗糖。采用苯酚-硫酸法和DNS法測定發(fā)芽3-7天大麥芽粗糖可溶性總糖和還原糖含量,采用高效液相色譜等分析方法,對不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽可溶性糖類成分變化進行研究,結(jié)果為:可溶性總糖含量、多糖含量在發(fā)芽第4天均達到最大之后含量呈下降趨勢;除還原糖外低聚糖含量在發(fā)芽第4天達到最大,發(fā)芽5、6、7天不斷減少。對不同發(fā)芽天數(shù)的大麥芽可溶性粗糖進行α-葡萄糖苷酶抑制活性實驗。結(jié)果顯示:相同濃度下,發(fā)芽4天的大麥芽粗糖酶抑制率最高,0.5mg/mL時酶抑制率為29.1±1.8%。以提取時間、提取溫度、提取次數(shù)和液固比為變量,以粗糖得率為考察指標(biāo)進行單因素實驗,得到粗糖的最佳提取條件為:提取時間3小時、提取溫度40℃、提取次數(shù)為3次,液固比6:1。發(fā)芽4天大麥芽可溶性粗糖通過乙醇沉淀得到低聚糖和多糖,用阿卡波糖作為陽性對照進行α-葡萄糖苷酶抑制活性實驗,分別測定粗糖、低聚糖和多糖的酶抑制率,結(jié)果表明:在濃度相同時,低聚糖對α-葡萄糖苷酶的抑制率較高為42.2±3.1%(0.5mg/mL)。采用SephadexG-15柱層析法得到純化低聚糖,采用飛行時間質(zhì)譜法檢測低聚糖分子量為689.798 (M+Na) Da。采用比旋光度法測定低聚糖的比旋光度為+45°。采用薄層層析(TLC)和氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)測得低聚糖的單糖組成為葡萄糖。采用傅立葉紅外光譜(FT-IR)、高碘酸氧化-Smith降解、核磁共振波譜(NMR)、甲基化分析等,對低聚糖的糖鏈構(gòu)型進行研究。結(jié)果表明:該低聚糖為α-(1→3)類型糖苷鍵鏈接的葡聚四糖。
【學(xué)位單位】：天津科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R284;R285
【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 大麥芽的研究概況
    1.2 大麥芽的分類
        1.2.1 啤酒麥芽
        1.2.2 藥用麥芽
        1.2.3 不同長度大麥芽的用途
    1.3 大麥芽的生理活性
        1.3.1 助消化作用
        1.3.2 對哺乳期乳腺分泌的作用
        1.3.3 抗結(jié)腸炎作用
        1.3.4 抗氧化作用
        1.3.5 降血糖降血脂作用
        1.3.6 其他作用
    1.4 α-葡萄糖苷酶抑制劑與糖尿病的研究進展
        1.4.1 α-葡萄糖苷酶抑制劑與糖尿病的關(guān)系
        1.4.2 α-葡萄糖苷酶抑制劑的發(fā)展現(xiàn)狀
        1.4.3 α-葡萄糖苷酶抑制劑的種類
    1.5 本課題的研究目的、意義和主要內(nèi)容
2 材料與方法
    2.1 實驗材料、試劑與儀器
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 實驗儀器與設(shè)備
    2.2 大麥芽的培養(yǎng)
    2.3 大麥芽中粗糖的提取
        2.3.1 提取工藝流程
        2.3.2 大麥芽粗糖得率計算
        2.3.3 糖含量的測定
        2.3.4 分子量分布的測定
        2.3.5 單糖分析
    2.4 α-葡萄糖苷酶抑制劑篩選試驗方法的建立
        2.4.1 α-葡萄糖苷酶反應(yīng)體系實驗原理
        2.4.2 α-葡萄糖苷酶反應(yīng)體系實驗方法
    2.5 提取工藝優(yōu)化
        2.5.1 提取工藝優(yōu)化單因素實驗
    2.6 低聚糖的純化
        2.6.1 紫外光譜分析
        2.6.2 顏色反應(yīng)
    2.7 低聚糖結(jié)構(gòu)分析
        2.7.1 低聚糖比旋光度測定
        2.7.2 低聚糖紅外光譜(FT-IR)分析
        2.7.3 低聚糖核磁共振(NMR)分析
        2.7.4 低聚糖飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)分析
        2.7.5 低聚糖單糖組成分析
        2.7.6 低聚糖高碘酸氧化和smith降解
        2.7.7 甲基化分析
3 結(jié)果與討論
    3.1 大麥芽的培養(yǎng)
    3.2 不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽粗糖的得率
    3.3 不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽中糖的變化
    3.4 不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽單糖分析
    3.5 不同發(fā)芽天數(shù)多糖分析
    3.6 不同發(fā)芽天數(shù)大麥芽粗糖對α-葡萄糖苷酶抑制率的測定
    3.7 粗糖提取工藝優(yōu)化
        3.7.1 不同的提取次數(shù)對糖得率的影響
        3.7.2 不同提取時間對粗糖產(chǎn)量的影響
        3.7.3 不同提取溫度對粗糖得率的影響
        3.7.4 不同液固比對粗糖得率的影響
    3.8 粗糖的分離純化
    3.9 低聚糖的純化
    3.10 紫外光譜分析
    3.11 低聚糖的高效液相分析
    3.12 低聚糖粗品、低聚糖純品和阿卡波糖隨濃度的變化對酶的抑制作用
    3.13 顏色反應(yīng)
    3.14 低聚糖的結(jié)構(gòu)分析
        3.14.1 低聚糖比旋光度測定
        3.14.2 低聚糖紅外光譜分析
        3.14.3 低聚糖核磁共振分析低聚糖紅外光譜分析
        3.14.4 低聚糖飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)分析
        3.14.5 低聚糖單糖組成測定
        3.14.6 低聚糖高碘酸氧化和smith降解
        3.14.7 甲基化結(jié)果分析
4 結(jié)論
5 展望
6 參考文獻
7 攻讀碩士學(xué)位期間論文發(fā)表情況
8 致謝

【參考文獻】

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本文編號：2836475