目的:本課題擬在篩選瓜蔞最佳提取溶劑、明確瓜蔞皮-子的合理配比、優(yōu)化瓜蔞提取液醇沉工藝的基礎(chǔ)上,制備瓜蔞提取物,研究瓜蔞提取物的性狀、測(cè)定其中物質(zhì)含量,并探討瓜蔞提取物能否保護(hù)大鼠防止心肌缺血和再灌注損傷。方法:1)建立瓜蔞內(nèi)總有效成分定量分析方法。參照藥典瓜蔞片的制備方法(瓜蔞皮35%,瓜蔞子65%)分別選用水、60%乙醇和二氯甲烷提取,考察不同提取溶劑提取的藥液中有效成分含量及抗大鼠心肌缺血損傷的能力,確定最佳提取溶劑。2)考察不同配比提取物中有效成分含量及抗大鼠心肌缺血的能力,比較6種皮-子配比提取的藥液與瓜蔞的指紋圖譜共有模式的相似性,篩選出最佳皮-子比例。3)依據(jù)響應(yīng)面法原理,篩選出最佳醇沉工藝。4)制備瓜蔞提取物。采用高效液相色譜HPLC-PDAD等方法對(duì)瓜蔞提取物的性狀、檢查、指紋圖譜和含量測(cè)定加以研究。5)陽(yáng)性藥組大鼠灌胃復(fù)方丹參滴丸,假手術(shù)組灌胃生理鹽水,瓜蔞提取物作為試驗(yàn)組。心肌缺血大鼠模型制作方法為,將大鼠麻醉后將其心臟冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎,觀察心電圖變化;測(cè)定其血漿肌紅蛋白(Myoglobin,MYO-MB)、心肌肌鈣蛋白(Troponin-T,cTnT)、肌酸激酶同工酶質(zhì)量(Creatine Kinase-MB,CK-MB);采用光鏡檢查心肌組織變化并測(cè)定心肌梗死面積。結(jié)果:1)瓜蔞水提組和60%乙醇提組,總氨基酸含量高(P0.01),二氯甲烷提組總黃酮含量高(P0.01)。瓜蔞水提組與模型組比較,心電圖st段明顯降低(P0.01或P0.05);且可降低大鼠血漿CK-MB、cTnT、MYO含量(P0.05)。2)6種配比的瓜蔞提取物對(duì)心肌缺血大鼠血漿MYO、CK-MB、cTnT水平的影響與正常對(duì)照組比較,P0.01;皮-子比例為50:50時(shí)圖譜相似度為0.9363±0.0082,高于其他各組(P0.05或0.01)。3)藥液相對(duì)密度對(duì)綜合評(píng)分影響較大(P0.01)。隨著醇沉?xí)r間的延長(zhǎng),綜合評(píng)分有所增大,但影響較小。醇沉濃度和醇沉?xí)r間增加,綜合評(píng)分增大。當(dāng)相對(duì)密度為1.20,乙醇濃度為80%,醇沉?xí)r間為36h可得到的瓜蔞提取物的最佳綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)。4)瓜蔞提取物為棕黃色粉末狀物質(zhì),氣微甜,味微苦,極易溶于水。瓜蔞提取物含有多種核苷類(lèi)成分,其中腺苷含量最高,為0.82‰。5)與模型組比較,瓜蔞提取物高劑量組可明顯抑制大鼠心電圖st段抬高(P0.01或P0.05);瓜蔞提取物高劑量組可顯著降低大鼠血漿MYO和CK-MB指標(biāo)含量(P0.05);瓜蔞高劑量組能保護(hù)大鼠心肌組織防止受損并可減少梗死區(qū)面積和危險(xiǎn)區(qū)面積,P0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.結(jié)論:瓜蔞提取物制備溶劑為水,皮-子比例為50:50,醇沉法可用于瓜蔞提取物的精制。瓜蔞提取物具有一定的抗心肌缺血-再灌注損傷作用。
【學(xué)位單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類(lèi)】：R285.5
【部分圖文】：

準(zhǔn) 藥效學(xué)研究心肌缺血-再灌注損傷模型含藥血漿、心電圖1.血漿生化指標(biāo)檢測(cè)2.組間心電圖 st 段變化3.心肌組織形態(tài)學(xué)4.心肌梗死面積測(cè)定性狀：顏色、氣、味檢查：干燥失重?

t段變化

t段的影響注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2823269