藥用植物有效成分的積累受到基因型和環(huán)境等因素的雙重調(diào)控。本研究選定閩北地區(qū)不同產(chǎn)地的三葉青為研究對象,以蘆丁作為黃酮活性成分的評價指標,分析了閩北8個不同產(chǎn)區(qū)三葉青蘆丁含量,并建立了閩北地區(qū)間三葉青的指紋圖譜。論文通過甲醇濃度、超聲功率、提取時間和料液比四個單因素試驗,確定了最優(yōu)蘆丁提取條件,利用HPLC法測定三葉青中蘆丁的含量,并研究了多種因素對蘆丁測定的影響。采用不同萃取劑、色譜柱、萃取方式分析建立了福建省閩北地區(qū)三葉青的HPLC指紋圖譜分析方法。為閩北地區(qū)間不同產(chǎn)地三葉青中蘆丁含量檢測和三葉青指紋圖譜的制定提供前期的實驗依據(jù)。主要研究結果如下:1、建立了提取三葉青中蘆丁的工藝條件。實驗結果表明:超聲波提取時間為20 min、甲醇濃度為60%、料液比為1:50 g/mL、超聲提取功率為324 W,為本試驗三葉青中蘆丁的提取最佳工藝條件。采用高效液相色譜法進行三葉青蘆丁含量的測定,其色譜條件為:安捷倫Allsphere ODS-2(250×4.6 mm,5μm)色譜柱;流動相為乙腈:0.1%磷酸水溶液(16:84);波長360 nm;柱溫40℃;流速1 mL/min;進樣量10μL。蘆丁濃度在5μg/mL到100μg/mL范圍內(nèi)時,峰面積(у)與蘆丁濃度(х)的回歸方程為Y=16.0853×X-19.0162,R=0.9992;三葉青樣品加標回收率為95.00%-99.56%,平均加標回收率為98.30%,RSD=1.53%(n=6)。結果表明,不同產(chǎn)地的三葉青中蘆丁含量為0.36-3.28 mg/g,閩北地區(qū)8個產(chǎn)地三葉青中蘆丁含量依次為:松溪縣花橋鎮(zhèn)邵武市金杭鎮(zhèn)武夷山市上梅鄉(xiāng)光澤縣司前鎮(zhèn)政和縣外屯鎮(zhèn)順昌縣洋口鎮(zhèn)蒲城縣富嶺鎮(zhèn)邵武市南武夷藥博園。2、利用高效液相色譜儀對三葉青樣品進行指標性成分檢測分析,構建了高效液相色譜指紋圖譜方法。實驗結果表明:采用甲醇40 mL,提取時間為20min,超聲功率為324 W進行超聲波提取三葉青中有效成分。利用高效液相色譜儀進行分離各個組分,色譜條件為:Agilent 5 TC-C18(2)(150×4.6 mm,5μm)色譜柱,0.1%磷酸-乙腈為流動相,360 nm波長檢測蘆丁,1 mL/min流量,40℃柱箱溫度。三葉青的指紋圖譜分析表明:8批不同產(chǎn)地的三葉青指紋圖譜的相似度在0.815-0.926之間,表明閩北三葉青藥材的指紋圖譜相似度良好,可以為閩北產(chǎn)區(qū)的三葉青種質(zhì)鑒定和質(zhì)量控制標準的制定提供一定的依據(jù)。
【學位單位】：福建農(nóng)林大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R284

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本文編號：2820013