目的:以自發(fā)性高血壓大鼠(Spontaneously hypertensive rat,SHR)為基礎,采用頸內(nèi)動脈月桂酸鈉注入法,聯(lián)合長期激怒法刺激誘導形成具備陰虛陽亢、瘀血阻絡證候特色的高血壓病合并腔隙性腦梗死(Hypertension-lacuna infarction comorbidity,HLIC)動物模型,并從行為學、形態(tài)學、功能、生化和分子多角度對動物模型進行評價。并在此基礎上探究復方七芍降壓片對HLIC陰虛陽亢、瘀血阻絡證的藥效作用,以期為復方七芍降壓片的臨床應用提供更多實驗依據(jù)。方法:1.HLIC陰虛陽亢、瘀血阻絡證動物模型建立與評價:將20只SHR隨機分為模型組及假手術組,每組10只,另10只Wistar Kyoto(WKY)大鼠設為空白對照組;模型組大鼠采用頸內(nèi)動脈月桂酸鈉注入法進行造模,假手術組采用頸內(nèi)動脈注入生理鹽水進行處理,空白對照組不做任何處理。每日觀察大鼠皮毛色澤、飲水飲食變化、大小便狀況以及是否出現(xiàn)煩躁易激惹等情況。于造模后第3天、第7天進行行為學測試,并于造模后第7天取大鼠血清、腦組織進行血脂、內(nèi)皮素-1(Endothelin-1,ET-1)、組織型纖溶酶原激活物抑制劑-1(Plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)、光學顯微鏡及透射電鏡等檢測。2.復方七芍降壓片對HLIC陰虛陽亢、瘀血阻絡證的干預作用:將40只SHR隨機分為模型組、西藥組(硝苯地平片+胞磷膽堿鈉片)、中藥組(復方七芍降壓片)及假手術組,每組10只,另10只WKY大鼠設為空白對照組;模型組、西藥組、中藥組大鼠采用頸內(nèi)動脈月桂酸鈉注入法進行造模,假手術組采用頸內(nèi)動脈注入生理鹽水進行處理,空白對照組不做任何處理。模型組、假手術組、空白對照組予以純凈水灌胃,西藥組予以硝苯地平片+胞磷膽堿鈉片灌胃,中藥組予以復方七芍降壓片灌胃。實驗期間每7天測量大鼠尾動脈收縮壓1次,干預處理14天后取大鼠血清、腦組織進行大鼠血清血脂、超敏C反應蛋白(Hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)、同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)、ET-1和PAI-1表達水平,以及腦組織內(nèi)ET-1、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、血栓烷(ThromboxaneA2,TXA2)合成酶CYP5A1和前列環(huán)素(Prostaglandin I2,PGI2)合成酶CYP8A1表達水平的測定。結果:1.HLIC陰虛陽亢、瘀血阻絡證動物模型建立與評價(1)在采用頸內(nèi)動脈月桂酸鈉注入法造模后,模型組大鼠出現(xiàn)精神緊張,易激惹,同時存在皮毛色黃無光澤,毛發(fā)脫落較多,眼角可見少量分泌物,小便量少色深黃,糞便為質地較干,顆粒較小等表現(xiàn)。(2)與空白對照組相比,模型組及假手術組大鼠血壓明顯升高,且造模后呈明顯上升趨勢。(3)模型組大鼠在姿勢反射試驗、肢體不對稱應用試驗及角落試驗里均存在明顯的神經(jīng)功能缺損表現(xiàn),而空白對照組及假手術組不存在神經(jīng)功能缺損表現(xiàn)。(4)與空白對照組比較,假手術組及模型組大鼠血清總膽固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平均明顯升高,但在高密度脂蛋白膽固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平上各組之間無明顯差異。(5)模型組大鼠血清ET-1、PAI-1水平較空白對照組相比均升高,與假手術組無明顯差異。(6)HE染色:空白對照組、假手術組:神經(jīng)元數(shù)量較多,細胞形態(tài)完整,細胞核大且呈圓形,細胞核內(nèi)可見完整核仁。模型組:深穿支動脈管腔狹窄,部分管腔內(nèi)可見血栓形成,管腔閉塞,血管周圍伴有炎性細胞浸潤;血管周圍可見部分神經(jīng)元胞核固縮,嗜酸性濃染,核仁消失,細胞結構不清,周圍有炎性細胞浸潤。(7)透射電鏡結果:模型組大鼠腦內(nèi)深穿支動脈內(nèi)皮受損,細胞膜斷裂不連續(xù),并可見到血管外周基質水腫,血管腔被擠壓變形,血管周圍組織間隙增寬;部分深穿支動脈可見血管內(nèi)皮與血管基膜出現(xiàn)分離;有的部位可見到星形膠質細胞腫脹,并伴有足突水腫,核內(nèi)染色質聚集、邊集,部分線粒體出現(xiàn)空泡樣變;偶可見到壞死神經(jīng)元,其細胞形態(tài)結構已分辨不清,核內(nèi)染色質聚集成塊狀,核仁消失,可見線粒體腫脹空化。大腦中動脈無明顯受損表現(xiàn),其血管內(nèi)膜結構完整,可見到連續(xù)性緊密聯(lián)接,血管外周基質也無明顯水腫表現(xiàn)。2.復方七芍降壓片對HLIC陰虛陽亢、瘀血阻絡證的干預作用:(1)經(jīng)過7天的喂養(yǎng)及灌胃,假手術組及模型組大鼠尾動脈收縮壓呈明顯上升趨勢,而西藥組及中藥組大鼠尾動脈收縮壓均較給藥前明顯下降,且下降幅度大致相當。經(jīng)過14天的喂養(yǎng)及灌胃處理,各組大鼠血壓較前一次測量值均無明顯變化,這提示無論是西藥干預還是中藥干預都可獲得良好且穩(wěn)定的降壓效果,且降壓效果大致相當。(2)經(jīng)過14天相應藥物干預處理后,西藥組及中藥組大鼠血清TC、TG、LDL-C水平較模型組均有降低,且中藥組降低幅度較西藥組更大。而就統(tǒng)計結果來看,在血清HDL-C水平上各組大鼠與空白對照組之間無明顯差異。(3)經(jīng)過14天相應藥物干預處理后,西藥組及中藥組大鼠腦組織內(nèi)皮型一氧化氮合酶及PGI2合成酶CYP8A1在表達陽性目標數(shù)及陽性目標積分光密度值上均較模型組升高,且升高幅度大致相當;而西藥組及中藥組大鼠腦組織TXA2合成酶CYP5A1及ET-1在表達陽性目標數(shù)及陽性目標積分光密度值上均較模型組降低,且降低幅度大致相當。(4)經(jīng)過14天相應藥物干預處理后,西藥組及中藥組大鼠血清hs-CRP、ET-1及Hcy水平均較模型組降低,且兩組下降幅度相當;而在血清PAI-1水平上,中藥組較模型組、西藥組均降低。結論:(1)采用SHR聯(lián)合頸內(nèi)動脈月桂酸鈉注入法及長期激怒法所構建的動物模型,符合HLIC陰虛陽亢、瘀血阻絡的臨床發(fā)病特點及病理改變,證明該方法成功制備了HLIC陰虛陽亢、瘀血阻絡證動物模型。(2)復方七芍降壓片可通過降低血壓、調(diào)節(jié)脂質代謝紊亂、抑制縮血管物質在腦中的表達、促進擴血管物質在腦組織中的表達等途徑,發(fā)揮保護腦中小動脈和微動脈的血管內(nèi)皮功能、抑制凝血系統(tǒng)的過度激活、減輕血管局部炎癥反應等保護靶器官的作用。
【學位單位】：湖南中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5;R-332
【部分圖文】：

有統(tǒng)計學意義(P<0.05、P<0.01)；與假手術組相比，則無明顯差異(P＞0.05，P＞0.05表 6 各組大鼠血清 ET-1、PAI-1 含量（x s，n=10）組別 ET-1（mmol/L） PAI-1（mmol/L）空白對照組3.742±0.8228.800±1.135假手術組 5.299±0.731○○10.636±1.309○○模型組 5.258±0.855○○10.669±1.281○○：與空白對照組比較○P＜0.05，○○P＜0.01；與假手術組比較●P＜0.05，●●P＜0.01。.6 各組大鼠腦組織 HE 染色結果空白對照組、假手術組：神經(jīng)元數(shù)量較多，細胞形態(tài)完整，細胞核大且呈圓形，細內(nèi)可見完整核仁，見圖 1-A，圖 1-B。模型組：深穿支動脈管腔狹窄，部分管腔內(nèi)可栓形成，管腔閉塞，血管周圍伴有炎性細胞浸潤；血管周圍可見部分神經(jīng)元胞核固縮酸性濃染，核仁消失，細胞結構不清，周圍有炎性細胞浸潤，見圖 1-C。

如圖 2-B；有的部位可見到星形膠質細胞腫脹，并、邊集，部分線粒體出現(xiàn)空泡樣變，如圖 2-C；偶可見到分辨不清，核內(nèi)染色質聚集成塊狀，核仁消失，可見線粒動脈無明顯受損表現(xiàn)，其血管內(nèi)膜結構完整，可見到連續(xù)明顯水腫表現(xiàn)，如圖 3。

圖 2 模型組大鼠腦基底節(jié)區(qū)電鏡結果形及血管外周基質水腫，放大倍數(shù)×200000；C.星形膠質足突水腫、核內(nèi)染色×10000；D.壞死神經(jīng)元，放大倍數(shù)×

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 劉丹;曾勇;譚元生;;復方七芍降壓片對自發(fā)性高血壓大鼠炎癥水平及白細胞黏附跨動脈壁浸潤的影響[J];中醫(yī)藥導報;2015年24期

2 鄭劍勇;吳文秀;蘇依所;黃秀敏;;成人血脂異常與高血壓的相關性分析[J];中國慢性病預防與控制;2015年12期

3 雍蘇南;王順民;張穩(wěn);譚元生;;養(yǎng)陰柔肝、化瘀息風法對自發(fā)性高血壓大鼠血管重塑的影響[J];中國中醫(yī)急癥;2015年10期

4 馮進;譚元生;;中醫(yī)藥干預高血壓病血管重塑的研究進展[J];中醫(yī)藥導報;2015年04期

5 李菁;米樹華;賈淑杰;周蕓;王陽;;高血壓患者血壓變異性與冠狀動脈病變嚴重程度的相關性研究[J];中國醫(yī)藥;2015年01期

6 王乃玲;楊中良;;老年原發(fā)性高血壓患者血壓變異與血栓前狀態(tài)的關系[J];中國老年學雜志;2014年20期

7 端木傳高;;老年性高血壓病合并腔隙性腦梗死的治療體會[J];中西醫(yī)結合心血管病電子雜志;2014年10期

8 譚元生;曾勇;張穩(wěn);劉丹;;論高血壓病中醫(yī)優(yōu)勢證型[J];遼寧中醫(yī)雜志;2014年03期

9 黃煒強;;老年高血壓患者血壓變異性與主動脈瓣鈣化的相關性研究[J];實用心腦肺血管病雜志;2013年07期

10 周雙陸;顏昌福;李春惠;趙星;;老年原發(fā)性高血壓合并腔隙性腦梗塞與血壓變異性的相關性研究[J];中國冶金工業(yè)醫(yī)學雜志;2013年02期

相關碩士學位論文 前1條

1 張小龍;大鼠微梗死模型的復制和雌激素的腦血管保護作用[D];河北醫(yī)科大學;2003年

本文編號：2816953