【摘要】：目的:觀察不同濃度橄欖苦苷及不同作用時間對體外卵巢癌SKOV3細胞增殖的影響,以及橄欖苦苷對裸鼠皮下卵巢癌SKOV3細胞移植瘤生長的影響,探討橄欖苦苷抗卵巢癌的可能作用機制。方法:將卵巢癌SKOV3細胞培養(yǎng)后分別接種在5個96孔板上,4個實驗組各自加入藥物濃度為100、200、400、800ug/ml的橄欖苦苷刺激,另設(shè)1個對照組(未加藥干預(yù))。采用CCK-8檢測法分別測定24H、48H、72H三個時間點不同藥物濃度的SKOV3細胞增殖抑制情況。建立卵巢癌SKOV3細胞裸鼠背部皮下荷瘤的模型,將20只荷瘤成功的裸鼠隨機分成2組,橄欖苦苷組:50mg·10ml·kg-1腹腔內(nèi)注射,生理鹽水組:按0.9%氯化鈉注射液10ml·kg-1腹腔內(nèi)注射。兩組均隔天給藥1次,連續(xù)給藥8周,自由攝水和進食,標(biāo)準(zhǔn)SPF飼料。每周測量并記錄裸鼠的腫瘤體積及體重各1次。處死裸鼠后,完整分離出腫瘤組織,計算腫瘤的相對增殖率,采用Western blot法分別檢測兩組腫瘤組織促凋亡因子Bax、抗凋亡因子Bcl-2的表達水平。結(jié)果:體外實驗中,同對照組相比,100、200、400、800ug/ml的橄欖苦苷濃度對SKOV3細胞的增殖均有抑制作用,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);不同時間點中,800ug/ml的橄欖苦苷對細胞的抑制作用最強(P0.05);在800ug/ml的藥物濃度下,細胞生長緩慢,在24h、48h兩個時間點比較,細胞增殖差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),而24h和72h兩個時間點比較,細胞增殖有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);同一濃度下,隨著藥物作用時間的延長,抑制率變化無明顯差異(P0.05)。體內(nèi)實驗中,橄欖苦苷組裸鼠移植瘤體積明顯小于生理鹽水組(P0.05);橄欖苦苷組的相對腫瘤增殖率為70.3%;與生理鹽水組相比,橄欖苦苷組Bax蛋白表達上調(diào),而Bcl-2蛋白表達下調(diào)。結(jié)論:橄欖苦苷能抑制體外卵巢癌SKOV3細胞的增殖,對體內(nèi)卵巢癌SKOV3細胞裸鼠皮下移植瘤的生長有抑制作用,可通過誘導(dǎo)細胞凋亡和抑制細胞增殖,發(fā)揮抗卵巢癌的作用,其機制可能與增強凋亡促進因子Bax的表達、抑制抗凋亡因子Bcl-2的表達有關(guān),也可能與調(diào)控癌細胞的原癌基因或抑癌基因有關(guān),具體機制有待進一步研究,橄欖苦苷可能成為具有潛在應(yīng)用前景的輔助抗卵巢癌新藥。
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

橄欖苦苷濃度分別為 100、200、400、800ug/mL 時中，對 SKOV3 細胞增殖均具有抑制作用，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜度隨濃度的增大而增強，其中 800ug/ml 濃度的橄欖苦苷對細胞強；在同一濃度中，100、200、400ug/ml 的濃度下，SKOV3 細胞時間延長，細胞數(shù)量 OD 值變化有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。在 80濃度下，細胞生長緩慢，在 24h、48h 兩個時間點比較，細胞數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)差異（p＞0.05），在 24h、72h 兩個時間點比較，細 OD 值有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）,在 48h、72h 兩個時間點比較， OD 值差異無統(tǒng)計學(xué)差異（p＞0.05）。同一濃度下，隨著藥物作用變化無明顯差異（P＞0.05）。細胞生長曲線與抑制率見圖 1 和細胞OD

2組裸鼠移植瘤體積的生長曲線

裸鼠皮下移植瘤體切面

【參考文獻】

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本文編號：2801127