【摘要】：目的:青光眼是世界第二致盲眼病,濾過性手術現(xiàn)今仍是臨床上治療青光眼主要的手術方式。而濾過泡瘢痕形成是青光眼濾過性手術失敗的主要原因,其病理改變主要是由于Tenon囊和球結膜之間成纖維細胞增生、膠原合成增加,導致結膜下組織纖維化及其瘢痕收縮。研究顯示,轉化生長因子(TGF)-β在青光眼術后濾過泡瘢痕形成中起著重要作用。雷公藤甲素(Triptolide,TP)是我國傳統(tǒng)中藥雷公藤的有效成分,具有多種藥理作用包括抗炎、免疫調節(jié)和抑制細胞增殖等。本研究探討雷公藤甲素對轉化生長因子(TGF)-β誘導人Tennon囊成纖維細胞(HTFs)收縮及產生細胞外基質(ECM)的影響。方法:Ⅰ型膠原三維凝膠培養(yǎng)人Tenon囊成纖維細胞,TGF-β及雷公藤甲素進行干預培養(yǎng)。通過測量三維凝膠的直徑來評估Tenon囊成纖維細胞的收縮變化;收集三維凝膠培養(yǎng)的Tenon囊成纖維細胞,通過免疫印跡法(Western blot)檢測肌球蛋白輕鏈磷酸化(MLC)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的變化并收集上清,通過ELISA法檢測細胞外基質纖維粘連蛋白(FN)的產生。結果:雷公藤甲素抑制TGF-β誘導的由Tenon囊成纖維細胞介導的Ⅰ型膠原三維凝膠的收縮,并呈現(xiàn)時間及計量依賴性。雷公藤甲素抑制了TGF-β誘導的三維凝膠培養(yǎng)的Tenon囊成纖維細胞內MLC磷酸化,而對細胞內α-SMA表達沒有影響。此外,雷公藤甲素還抑制了細胞外基質FN的產生。實驗濃度下的TP對細胞沒有毒性。結論:本研究顯示雷公藤有效成分雷公藤甲素(TP)能抑制Tenon囊成纖維細胞的收縮,其機制可能涉及對細胞內MLC磷酸化的抑制;此外雷公藤甲素還抑制了細胞外基質的產生。因此,雷公藤甲素可能通過影響細胞外基質的重塑而抑制青光眼濾過術后濾過道處結膜組織的瘢痕形成。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285
【圖文】：

TP 對未添加 TGF-β 的三維凝膠收縮沒有明顯作用（○）。圖 4.1B 為人 Tenon 囊成纖維細胞的介導的三位凝膠收縮三天時的實物照。圖4.1 不同濃度的TP 對三維凝膠培養(yǎng)人Tenon囊成纖維細胞收縮的影響○ 表示 None+TP ● 表示 TGF-β+TP

圖 4.2 TP 對三維凝膠培養(yǎng)人Tenon囊成纖維細胞收縮的影○表示 None+TGF-β ●表示 TGF-β+TP.3 TP 對三維凝膠培養(yǎng)的人 Tenon 囊成纖維細胞的毒將 4.1.1 中收集的培養(yǎng)上清用于細胞毒性檢測。結果顯示本實驗 TP 對三維凝膠培養(yǎng)的人 Tenon 囊成纖維細胞無毒性作用； 照（圖 4.3）。

賴作用膠培養(yǎng)人 Tenon 囊成纖維細胞分為對照組（無 TP /L 濃度 TP），添加 1 ng/ml TGF-β 后培養(yǎng)三天，每天膠原凝膠收縮程度。實驗結果顯示：添加 TGF-β 可纖維細胞介導的三維凝膠的收縮（○），這種作用隨時nmol/L 濃度 TP 培養(yǎng)后， TP 可明顯抑制 TGF-β 所誘，這種抑制作用在 2 天時具有統(tǒng)計學意義，其抑制作.2）。

【參考文獻】

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本文編號：2780791