【摘要】：昆蟲(chóng)藥材是中藥材動(dòng)物藥材的重要組成部分,斑蝥是傳統(tǒng)的昆蟲(chóng)藥材,藥典收載品種芫青科昆蟲(chóng)南方大斑蝥Mylabris phalerata Pallas或黃黑小斑蝥Mylabris cichorii Linnaeus是斑蝥素提取的主要來(lái)源;隨著斑蝥素的需求量越來(lái)越大,尋找斑蝥素的新資源也是從事動(dòng)物藥研究和開(kāi)發(fā)的科技工作者必須思考的問(wèn)題,該論文根據(jù)以上思路設(shè)計(jì)了整個(gè)論文的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。論文選擇了北方常見(jiàn)但鮮有研究的品種綠芫菁來(lái)開(kāi)展了以下幾方面研究:1.藥典斑蝥品種資源初步調(diào)查該調(diào)查是結(jié)合課題組承擔(dān)的國(guó)家林業(yè)局全國(guó)陸生野生動(dòng)物第二次調(diào)查來(lái)開(kāi)展的。主要目的是借用該機(jī)會(huì)訓(xùn)練研究生的實(shí)驗(yàn)樣本采集技能。調(diào)查結(jié)果顯示,在玉林市興業(yè)縣和南寧市共12個(gè)地區(qū)調(diào)查到了大斑芫菁及眼斑芫菁分布,且數(shù)量較大。2.綠芫菁昆蟲(chóng)斑蝥素提取該部分將綠芫菁與藥典收載的兩個(gè)品種做了比較。2015版藥典中對(duì)大斑芫菁和眼斑芫菁的提取方法采用氯仿超聲提取法,本論文使用藥典規(guī)定的超聲提取法,但溶劑為丙酮。為確定兩種溶劑提取率的差異,對(duì)比對(duì)綠芫菁斑蝥素提取效率影響,本試驗(yàn)按照2015版藥典含量測(cè)定方法對(duì)綠芫菁和藥典收載的兩個(gè)品種進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn),對(duì)比二者出峰情況、峰面積和提取率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)綠芫菁斑蝥素含量為0.932%(大斑芫菁斑蝥素的含量為1.014%,眼斑芫菁斑蝥素含量為0.9%),中國(guó)藥典規(guī)定斑蝥素含量不低于0.35%,由此可見(jiàn)綠芫菁可作為斑蝥素潛在的來(lái)源。3.UPLC-QTOF-MS高分辨質(zhì)譜定性分析通過(guò)UPLC-QTOF-MS高分辨質(zhì)譜定性分析綠芫菁,共得到144個(gè)成分;所有數(shù)據(jù)采用Mass Lynx 4.1(Waters Corporation,Milford,MA,USA)軟件進(jìn)行分析處理,其中包含很多同分異構(gòu)體。再次經(jīng)過(guò)UNIFI圖譜庫(kù)比對(duì)和查閱參考文獻(xiàn),共鑒別分出49種成分,并得到其名稱。其中,就目前分析推測(cè)出的物質(zhì)來(lái)看,綠芫菁所含的活性物質(zhì)較為豐富,這些物質(zhì)的作用和影響,有待未來(lái)更深入的研究。由于對(duì)斑蝥藥材成分分析方面的研究報(bào)道少,缺少更深入的照?qǐng)D譜來(lái)對(duì)比分析,使得綠芫菁藥材中仍有大量物質(zhì)成分僅僅通過(guò)質(zhì)譜還無(wú)法鑒定,今后還需要結(jié)合多種方法來(lái)開(kāi)展研究和探索。4.斑蝥素和部分衍生物抗腫瘤、抗菌活性分析廣西是鼻咽癌高發(fā)的地區(qū),該論文主要選取了高分化鼻咽癌細(xì)胞(CNE1)和低分化鼻咽癌細(xì)胞(CNE2)再同時(shí)選取了宮頸癌細(xì)胞(HELA)、人前列腺癌細(xì)胞系(DU145)開(kāi)展了抗腫瘤、抗菌活性分析。選擇一株人胚腎細(xì)胞系(293T)正常細(xì)胞株作為對(duì)比。通過(guò)MTT法和CCK8法,選取四種綜合對(duì)比研究較少的甲基斑蝥胺、斑蝥素、去甲斑蝥素和去甲斑蝥酸鈉,對(duì)所選四株腫瘤細(xì)胞進(jìn)行體外抑制實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,斑蝥素、去甲斑蝥素和去甲斑蝥酸鈉對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用明顯,且IC50值均小于17,但對(duì)人體正常細(xì)胞均有一定危害,其中斑蝥素最為顯著。甲基斑蝥胺對(duì)四種腫瘤細(xì)胞的抑制效果不明顯,其對(duì)人正常細(xì)胞的危害均小于同濃度下斑蝥素、去甲斑蝥素和去甲斑蝥酸鈉。斑蝥素及衍生物在抑菌方面一直少有報(bào)道。針對(duì)臨床常見(jiàn)的一些耐藥菌,本文開(kāi)展了部分抑菌研究。實(shí)驗(yàn)中選取斑蝥素、去甲斑蝥素、去甲斑蝥酸鈉和甲基斑蝥胺四種,針對(duì)變形桿菌(Proteusbacillus vulgaris)、腸道沙門氏菌(Salmonella enterica)、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)、枯草桿菌(Bacillus subtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichiacoli)六種常見(jiàn)臨床耐藥性細(xì)菌進(jìn)行抑菌活性測(cè)試,實(shí)驗(yàn)結(jié)果均為陰性。
【學(xué)位授予單位】：廣西師范學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：O657.63;R284;R285
【圖文】：

圖 1-1 斑蝥素目（Coleoptera）芫菁科（Meloidae）的昆蟲(chóng)蝥素，故被我國(guó)及西方醫(yī)學(xué)運(yùn)用已有一定歷考查了我國(guó) 5 省區(qū)內(nèi)的芫菁資源，并對(duì)這 含量進(jìn)行了測(cè)定[18]。袁鋒等選取陜西省分布探索其內(nèi)部斑蝥素含量，同時(shí)對(duì)含斑蝥素類的研究報(bào)道表明，大斑芫菁和眼斑芫菁以及是比較廣泛的，從北方到南方均有分布，產(chǎn)這五個(gè)地區(qū)；斑蝥成蟲(chóng)喜歡吃荔枝、龍眼和錄的含有斑蝥素的昆蟲(chóng)一共有 14 屬 150 余蟬科（Fulgoridae）的 3 屬；擬天牛科（

所以實(shí)驗(yàn)選用230nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。色譜柱為安捷倫公司的C18色譜柱（250mm×4.6mm，5.0μm）；流動(dòng)相為甲醇：水=23:77；流速為1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為230mm，見(jiàn)圖3-1；斑蝥素的理論板數(shù)應(yīng)當(dāng)大于等于3000（按斑蝥素峰值計(jì)算）；柱溫為35℃；進(jìn)樣量為10μL。圖 3-1 綠芫菁的紫外吸收光譜圖

圖 3-3 綠芫菁含量測(cè)定譜圖表 3-9 樣品含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果序號(hào) 斑蝥素峰面積 平均峰面積 含量（%） 平均含量1 252.243255.1940.9272 258.595 0.9000.933 254.744 0.969表 3-10 藥典方法下樣品含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果序號(hào) 斑蝥素峰面積 平均峰面積 含量（%） 平均含量1 173.241174.4400.8032 178.735 0.7910.793

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2780746