【摘要】：低共熔溶劑(Deep Eutectic Solvents,DESs)是一種由氫鍵供體和氫鍵受體以一定化學(xué)計(jì)量比通過氫鍵形成的均一穩(wěn)定體系。作為一種新型的離子液體,DESs具有比傳統(tǒng)離子液體更為顯著的優(yōu)勢(shì),如合成簡(jiǎn)單、無毒或低毒、原子利用率高、生物可降解、原料豐富且價(jià)格低廉等。因此,DESs以其獨(dú)特的理化性質(zhì)廣泛應(yīng)用在合成、催化、電化學(xué)、中藥分離和提取等領(lǐng)域。本論文選擇丹參主要水溶性活性成分——丹酚酸B作為模型對(duì)象,研究了DESs體系對(duì)丹酚酸B的穩(wěn)定性、提取和藥代動(dòng)力學(xué)影響,以期為DESs在提取溶劑、藥物載體等方面的應(yīng)用提供基礎(chǔ)。本論文主要開展了以下工作:(1)比較了不同氫鍵供體的氯化膽堿類DESs對(duì)丹酚酸B穩(wěn)定性的改善作用,深入研究了DESs中氫鍵供體種類(乙二醇、1,2-丙二醇、甘油、1,4-丁二醇)、含水量、保存溫度和保存時(shí)間等對(duì)丹酚酸B穩(wěn)定性的影響;并通過高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)定性、定量分析了丹酚酸B及其降解產(chǎn)物;此外,通過分析降解產(chǎn)物含量的變化趨勢(shì),初步探討了DESs增強(qiáng)丹酚酸B穩(wěn)定性的機(jī)制。結(jié)果表明,無論是在室溫還是高溫條件下,丹酚酸B在DESs中比在水或乙醇中更穩(wěn)定,其中以氯化膽堿-甘油(摩爾比為1:2)作為溶劑時(shí)丹酚酸B的穩(wěn)定性最佳。優(yōu)化實(shí)驗(yàn)證明,影響DESs增強(qiáng)穩(wěn)定性能的主要因素是DESs中的含水量,其次是氫鍵供體的結(jié)構(gòu),影響最小的是氫鍵供體和季銨鹽的比例。(2)利用微波輔助提取法,評(píng)估了二十五種氯化膽堿類DESs分別對(duì)丹參中五種主要成分迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A、丹參酮IIA的提取效果,并篩選出較優(yōu)的提取溶劑;采用單因素和響應(yīng)面設(shè)計(jì)法優(yōu)化了氯化膽堿-1,2-丙二醇作為提取溶劑體系的組成比例、含水量,以及微波提取溫度、提取時(shí)間、微波功率和液固比等參數(shù),確定最佳的提取工藝參數(shù)為:80 vol%氯化膽堿/丙二醇(摩爾比1:1)-20 vol%水作為提取溶劑,微波功率為800 W,70℃提取11.11 min,固/液比為7 mg/m L。在該條件下,丹參中不同極性的活性成分均可以同時(shí)有效提取,且提取效果與傳統(tǒng)有機(jī)溶劑相當(dāng)或更優(yōu)。通過掃描電鏡觀察樣品經(jīng)不同方法提取后的微觀結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)采用微波輔助DESs提取時(shí),樣品組織細(xì)胞破壁程度高,這可能是提取效率較高的原因之一。(3)采用急性毒性實(shí)驗(yàn)研究了DESs的毒性,用氯化膽堿-甘油(ChCl-GL,摩爾比1:2)作為被測(cè)溶劑,小鼠灌胃給藥后,按寇氏法計(jì)算ChCl-GL(1:2)的半數(shù)致死劑量(LD50)。結(jié)果表明,ChCl-GL(1:2)的LD50為7733 mg/kg,95%置信區(qū)間為7130-8387 mg/kg。這表明ChCl-GL(1:2)基本無毒,有潛力作為相對(duì)安全的口服劑型應(yīng)用于臨床研究。(4)以丹酚酸B為模型藥物,通過評(píng)估DESs對(duì)丹酚酸B藥代動(dòng)力學(xué)的影響來考察DESs作為口服制劑藥物載體的可行性。將丹酚酸B分別溶解于ChCl-GL(1:2)和去離子水(參比)中,大鼠灌胃給藥后,采集不用時(shí)間點(diǎn)的血漿樣品;血漿樣品經(jīng)10%的鹽酸、乙酸乙酯沉淀蛋白,并以氯霉素為內(nèi)標(biāo),建立了測(cè)定大鼠體內(nèi)丹酚酸B血藥濃度的UPLC-MS分析方法。研究結(jié)果表明,丹酚酸B分別以ChCl-GL(1:2)和水作為溶劑時(shí),藥物吸收的藥時(shí)曲線變化趨勢(shì)基本一致;藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)顯示,以ChCl-GL(1:2)作為溶劑時(shí),丹酚酸B在大鼠血漿中的峰濃度為0.308±0.020 mg/L,略高于以水為溶劑時(shí)丹酚酸B的峰濃度(0.277±0.024 mg/L);以ChCl-GL(1:2)作為溶劑時(shí),丹酚酸B在大鼠血漿中的達(dá)峰時(shí)間為20 min,較丹酚酸B水溶液的達(dá)峰時(shí)間(30 min)縮短10 min。上述結(jié)果表明ChCl-GL(1:2)可能有助于藥物的透膜吸收,從而促進(jìn)丹酚酸B的吸收和清除。此外,以ChCl-GL(1:2)或水作為溶劑時(shí)丹酚酸B的體內(nèi)主要代謝產(chǎn)物基本一致。(5)研究了DESs對(duì)丹酚酸B在小鼠體內(nèi)的藥物組織分布影響。將健康小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和受試組,其中對(duì)照組和受試組分別給予溶解在水中的丹酚酸B和溶解在ChCl-GL(1:2)中的丹酚酸B,小鼠灌胃給藥后收集不同時(shí)間點(diǎn)的心、肝、脾、肺、腎、腦組織器官,并采用LC-MS法測(cè)定給藥后組織中的丹酚酸B含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,以DESs作為溶劑時(shí),溶劑效應(yīng)對(duì)丹酚酸B在小鼠體內(nèi)的組織分布有一定的影響,具體表現(xiàn)為:受試組中丹酚酸B在肝組織和肺組織中的達(dá)峰時(shí)間均為20 min,較對(duì)照組提前了10 min;且ChCl-GL(1:2)促進(jìn)丹酚酸B在肝組織中的分布,峰濃度為1.94±0.23μg/g,顯著高于對(duì)照組(1.02±0.05μg/g);但是,ChCl-GL(1:2)對(duì)丹酚酸B在腎組織中的分布基本沒有影響。總之,DESs可以促進(jìn)丹酚酸B的透膜作用,加速丹酚酸B在小鼠體內(nèi)的吸收和清除,但沒有改善丹酚酸B在肺組織和腎組織中的吸收量。此外,兩組中丹酚酸B在腦中的含量也低于檢測(cè)限,僅可以通過光譜和質(zhì)譜信息確定有微量的丹酚酸B存在,且兩組中均沒有檢測(cè)到丹酚酸B在心臟和脾臟中的分布。以上結(jié)果可以為DESs在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究及臨床應(yīng)用提供一定的參考。
【學(xué)位授予單位】：山西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R284;R285.5
【圖文】：

第一章 綜述言3 年，英國 Leicester 大學(xué) Abbott 教授的團(tuán)隊(duì)研究了尿素與一系列季銨混合物，并將其命名為低共熔溶劑[1]。DESs 是由氫鍵受體（常為季銨與氫鍵供體（多元醇、多元酸、金屬鹽和尿素等）以一定化學(xué)計(jì)量比（氫鍵、共價(jià)鍵等）形成的均一穩(wěn)定體系，且形成的 DESs 熔點(diǎn)低于中最常見的季銨鹽是氯化膽堿(Choline Chloride, ChCl)。目前，DESs世界學(xué)者的一致認(rèn)可，是當(dāng)前綠色化學(xué)化工領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)課題之一章數(shù)量呈遞X椙魘芠2-6]。如圖 1.1 所示，從 Abbott 教授首次合成 DESsSs 的研究開始逐年呈指數(shù)上升趨勢(shì)。

25 2.3 90℃時(shí)，不同 劑中丹酚酸 B 及其代謝產(chǎn)物的色譜圖。（a）降解前；（b）在時(shí)；（c）在 ChCl-GL（1: 2）中降解 12 小時(shí)。其中（1）咖啡酸、（2）丹參 、（34）迷迭香酸、（5）紫草酸同分異構(gòu)體、（6）紫草酸、（7）丹酚酸 A、（8）丹酚酚酸 E、（10）原紫草酸Figure 2.3 Chromatogram of salvianolic acid B and its degradation products in differen90°C. (a) before degradation, (b) degradation in water for 12 h, (c) degradation in ChCl12 h. The salvianolic acid B and its degradation products were determined as (1) CAF, PRO, (4) ROS, (5) LITI, (6) LIT, (7) SAA, (8) SAB, (9) SAE, (10) PLIT

43圖 3.1 不同種類 DESs 的提取效果（提取溫度為 50.0℃，時(shí)間為 10 min，功率為 800 W，固液比為 5 mg/mL）Figure 3.1 Effect of different types of DESs (temperature = 50.0℃, time = 10.0 min, microwave power = 800 W, solid/liquid ratio = 5 mg/mL)

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

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本文編號(hào)：2768132