【摘要】：背景和目的在公元1665年(清康熙年間)的《外科大成》中,記載的方劑“活血定痛湯”就是以紅花-乳香作為藥對(各三錢),治血出作痛,紅花長于活血化瘀,消散ve瘕;乳香有活血行氣止痛,消腫生肌之功效,兩藥“相須”“相使”。前期課題組研究顯示乳香的藥效物質(zhì)11-羰基-β-乳香酸(11-keto-β-boswellic acid,KBA)能改善腦缺血再灌注損傷(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI),β-乳香酸(β-boswellic acid,β-BA)能改善大鼠血瘀證。紅花活血化瘀作用的主要藥效成分羥基紅花黃色素A(hydroxy safflor yellow A,HSYA),在臨床上用于治療血液循環(huán)障礙性疾病,也有改善腦缺血再灌注損傷作用,但兩藥聯(lián)合使用的作用很少研究。因此,本課題擬從兩方面研究紅花-乳香的的協(xié)同作用,一方面研究HSYA聯(lián)合KBA保護腦缺血再灌注損傷引起的神經(jīng)損傷作用機制,另一方面研究HSYA聯(lián)合β-BA對血瘀證引起的血管內(nèi)皮損傷的改善作用及機制。以揭示HSYA-KBA和HSYA-β-BA的配伍機制。第一部分HSYA和KBA改善腦缺血再灌注引起的神經(jīng)損傷目的:1.探討HSYA和KBA對藥配伍是否能改善腦缺血再灌注引起的神經(jīng)損傷及協(xié)同作用機制。2.明確HSYA和KBA對藥配伍是否有協(xié)同減少體外氧糖剝奪PC12細胞的氧化應(yīng)激作用。方法:體內(nèi)研究中,我們選擇了線栓法來建立大鼠腦缺血再灌注模型,以進行缺血性腦梗死大鼠的相關(guān)研究。觀察給予HSYA和KBA后大鼠腦梗死面積的改變。體外研究選用了氧糖剝奪(OGD)誘導(dǎo)PC12細胞損傷模型,檢測丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的等抗氧化指標含量變化。結(jié)果:1.HSYA(100 mg/kg)和KBA(25 mg/kg)均分別能改善腦缺血再灌注損傷大鼠的腦梗死面積和神經(jīng)行為學(xué)評分,且合用組HSYA(50 mg/kg)+KBA(12.5 mg/kg)改善效果更好(P0.05)。2.MTT檢測結(jié)果顯示HSYA(10μM)、KBA(50μM)、合用組HSYA(5μM)、KBA(25μM)對OGD誘導(dǎo)損傷的PC12細胞均有抗凋亡作用(P0.05),且合用組HSYA(5μM)和KBA(25μM)作用更強(P0.05)。3.HSYA(10μM)、KBA(50μM)和合用組HSYA(5μM)、KBA(25μM)對OGD誘導(dǎo)的PC12細胞有抗氧化應(yīng)激損傷作用。HSYA(10μM)和KBA(50μM)能改善PC12細胞中氧化還原標志物SOD活力和MDA水平(P0.05),且合用組HSYA(5μM)和KBA(25μM)作用更強(P0.05)。結(jié)論:證實了HSYA和KBA對藥配伍在改善腦缺血再灌注引起的神經(jīng)損傷方面有協(xié)同增效的作用,且對OGD誘導(dǎo)的PC12細胞有協(xié)同抗凋亡和協(xié)同抗氧化應(yīng)激損傷作用。第二部分HSYA和β-BA改善血瘀證誘導(dǎo)的血管損傷目的:1.研究HSYA和β-乳香酸(β-BA)配伍是否能改善血瘀證所致的大鼠血液流變學(xué)異常、保護血管內(nèi)皮功能,兩者改善作用是否有協(xié)同性。2.探討HSYA和β-BA對OGD損傷的HUVEC細胞的保護作用以及對其NO生成的影響,探討其保護作用是否呈現(xiàn)協(xié)同性。方法:體內(nèi)研究采用血瘀證大鼠模型,給予HSYA和β-BA后,檢測全血粘度和凝血功能,以及血漿中ET-1和NO濃度,觀察其對大鼠血液流變學(xué)的影響以及血管內(nèi)皮功能的變化,并取頸動脈觀察病理變化。體外研究采用OGD損傷的HUVEC細胞,給予HSYA和β-BA后檢測其對細胞活性和細胞生成NO功能的影響。結(jié)果:1.對比空白對照組,血瘀證模型組的各項血流變學(xué)指標有明顯變化,全血粘度顯著升高,活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)、凝血酶原時間(PT)明顯縮短,纖維蛋白原(FIB)含量增加,血漿ET-1水平升高,血漿NO含量降低。對比模型組,HSYA(100 mg/kg)組、β-BA(100 mg/kg)、合用組HSYA(50 mg/kg)+β-BA(50mg/kg)全血粘度明顯降低,TT、APTT、PT顯著延長(P0.05),纖維蛋白原含量減少(P0.05),血漿ET-1水平降低,血漿NO水平升高(P0.05)。且合用組HSYA(50mg/kg)+β-BA(50 mg/kg)變化更顯著(P0.05)。2.MTT檢測結(jié)果顯示HSYA(10μM)、β-BA(50μM)、合用組HSYA(5μM)+β-BA(25μM)對OGD誘導(dǎo)損傷的HUVEC有抗凋亡作用,且合用組HSYA(5μM)和β-BA(25μM)作用更強(P0.05)。3.與OGD組相比HSYA(10μM)、β-BA(50μM)、合用組HSYA(5μM)+β-BA(25μM)能增加HUVEC細胞NO的生成(P0.05),且合用組HSYA(5μM)和β-BA(25μM)作用更強(P0.05)。結(jié)論:證實了HSYA和β-BA對藥配伍在改善血瘀證引起的血流變學(xué)異常方面有“相須”作用,兩藥聯(lián)用也能增強保護血管內(nèi)皮細胞的功能,且對OGD誘導(dǎo)的HUVEC細胞有協(xié)同抗凋亡和協(xié)同增強NO生成作用。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5
【圖文】：

- 23 -SYA 對腦梗死面積的影響（*P<0.05 用藥組與 MCAO組比較，#P<0.05BA組比較，n=6）能缺損評分評估理組大鼠在實驗后進行改良神經(jīng)功能缺損評分評估（m NSS大鼠未出現(xiàn)神經(jīng)功能損傷癥狀，m NSS 評分為 0 分；大腦組神經(jīng)功能缺損癥狀嚴重，m NSS 評分為（14.59 1.21）分同給藥組大鼠神經(jīng)功能缺損減輕（P < 0.05），且聯(lián)合給藥組。KBA 組 m NSS 評分為（12.72 0.56）分，HSYA 組 m .78）分，合用組 m NSS 評分為（11.26 0.45）分。對比兩個低，有統(tǒng)計學(xué)意義（#P<0.05，n=6）。見圖 3

sham MCAO KBA HSYA KBA+HSYA圖 1 各組大鼠腦組織 TTC 染色Fig.1 Representative TTC staining of the cerebral infarct in the rat brain圖 2 KBA-HSYA 對腦梗死面積的影響（*P<0.05 用藥組與 MCAO組比較，#P<0.05 合用組與

SY 對大鼠改良神經(jīng)功能缺損評分（m NSS）的影響（*P<0.05 用藥組與 合用組與 HSY 或者 KB 組比較，n=6） 和 KBA 對 PC12 細胞活性的影響 4 所示，OGD 損傷后 PC12細胞存活率與 Control 組相比明顯、 HSYA、HSYA聯(lián)合 KBA 預(yù)處理組，與 OGD 組相比 PC12 細（P < 0.05），HSYA聯(lián)合 KBA 組與單用組相比效應(yīng)更強（P <

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1 劉啟鋒;劉明;劉玉河;陸南;;腦缺血再灌注損傷機制研究進展[J];中華神經(jīng)外科疾病研究雜志;2006年06期

2 王宇歆;馬濤;李鳳娟;楊成民;;缺血再灌注損傷機制及其對策的初步探討[J];中國輸血雜志;2010年S1期

3 陶平;雌激素防治缺血再灌注損傷的研究現(xiàn)狀(文獻綜述)[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;2003年05期

4 胡佳樂;血管性缺血再灌注損傷的基礎(chǔ)與臨床[J];海軍醫(yī)學(xué)雜志;2003年03期

5 怡悅;續(xù)命湯預(yù)防腦缺血再灌注損傷[J];國外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊);2005年05期

6 謝明劍,薛偉新,岑家福;腦缺血再灌注損傷的中醫(yī)藥研究概況[J];華夏醫(yī)學(xué);2005年05期

7 魯力;張俐;;骨骼肌缺血再灌注損傷機制研究進展[J];中國中醫(yī)骨傷科雜志;2005年06期

8 文靜;鐘森;董繼萍;陳麗娜;;腦缺血再灌注損傷中醫(yī)藥防治研究進展[J];中國中醫(yī)急癥;2007年06期

9 王燕榮;愛民;謝軍;周建秀;李蘭誠;丹丹;;蒙藥防治缺血再灌注損傷的研究進展[J];中國民族醫(yī)藥雜志;2007年08期

10 張幫健;劉進;;抗壞血酸在缺血再灌注損傷中的保護機制[J];實用醫(yī)院臨床雜志;2009年05期

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1 王宇歆;馬濤;李鳳娟;楊成民;;缺血再灌注損傷機制及其對策的初步探討[A];中國輸血協(xié)會第五屆輸血大會論文專集（摘要篇）[C];2010年

2 吳艷;李春英;賈旭峰;何穎;;椒苯酮胺對腦缺血再灌注損傷的保護作用[A];中國藥理學(xué)會第十一次全國學(xué)術(shù)會議�？痆C];2011年

3 莫書榮;李德劍;;諾迪康對離體豚鼠心臟缺血再灌注損傷的保護作用[A];中國生理學(xué)會第五屆全國心血管、呼吸和腎臟生理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2005年

4 朱賢富;;腦缺血再灌注損傷機制的研究現(xiàn)狀[A];中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 于吉人;嚴盛;劉小孫;鄭樹森;;尿胰蛋白酶抑制劑減輕移植腸的缺血再灌注損傷[A];2004年浙江省外科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2004年

6 黃賢華;黃常亮;宋微微;方偉;楊芳炬;;迎春花對腦缺血再灌注損傷小鼠的保護作用[A];第十屆全國中藥藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

7 劉德強;趙德化;盛寶恒;;呋喃二氫吡啶Ⅰ對離體兔心缺血再灌注損傷的保護作用[A];第二屆全國心功能學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];1990年

8 劉建修;;缺血再灌注損傷發(fā)生機制及防治最新進展[A];江西省第四次中西醫(yī)結(jié)合心血管學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2008年

9 黃唯佳;陳壽權(quán);李惠萍;程俊彥;趙初環(huán);李章平;王明山;王萬鐵;王衛(wèi);;家兔腦缺血再灌注損傷時血栓素B_2/6-酮-前列腺素F_(1α)的變化及醒腦靜的保護作用[A];2005急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會暨《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第四屆組稿會論文匯編[C];2005年

10 高立建;謝榮愛;田建會;;四氫生物喋呤在新西蘭兔缺血再灌注損傷中的保護作用[A];中國心臟大會（CHC）2011暨北京國際心血管病論壇論文集[C];2011年

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3 ;抗呆I號可恢復(fù)腦缺血再灌注損傷細胞功能[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

4 張中橋;黃芪對腦缺血再灌注損傷有神經(jīng)保護作用[N];中國醫(yī)藥報;2006年

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6 張茨;扭轉(zhuǎn)的睪丸切還是�！t(yī)生有新說[N];健康報;2005年

7 陳可冀 馬曉昌;傳統(tǒng)血瘀證的現(xiàn)代分類[N];健康報;2002年

8 史載祥;血瘀證研究現(xiàn)狀及展望[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

9 劉凌;詮釋血瘀證[N];上海中醫(yī)藥報;2004年

10 記者 樊丹;血瘀證檢測實現(xiàn)可視化[N];中國中醫(yī)藥報;2010年

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1 黃薇園;功能MRI動態(tài)監(jiān)測大鼠急性缺血性腦卒中缺血再灌注損傷及其與預(yù)后相關(guān)的實驗研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 王震;不同藥物干預(yù)心、腎缺血再灌注損傷的作用與機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 凡進;自噬在脊髓缺血再灌注損傷過程中作用機制的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

4 楊偉;miR-208a在心肌缺血再灌注損傷中作用及相關(guān)機制的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2016年

5 姚勇剛;MG53對腦缺血再灌注損傷的保護作用及其機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2016年

6 侯帥;腦缺血再灌注損傷中線粒體縫隙連接蛋白43對神經(jīng)血管單元的保護作用及丹參多酚酸干預(yù)[D];吉林大學(xué);2016年

7 劉桂勇;右美托嘧啶對腎缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究[D];武漢大學(xué);2015年

8 邢澤剛;受體相互作用蛋白3及經(jīng)典程序性壞死信號通路在腦缺血再灌注損傷中的作用研究[D];華中科技大學(xué);2015年

9 高翔;甘氨酸—氮氧自由基綴合物對缺血再灌注損傷的保護作用及其內(nèi)在機制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2017年

10 張騁;TSGL-Ig在肝缺血再灌注損傷中的作用和機制研究[D];浙江大學(xué);2017年

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1 朱志會;羥基紅花黃色素A和乳香酸對腦缺血再灌注損傷神經(jīng)與血瘀證血管的保護作用及機制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2017年

2 李盼;肢體缺血后適應(yīng)對缺血再灌注損傷小鼠腦保護作用及機制研究[D];河北大學(xué);2015年

3 蒲舉;遠隔缺血后適應(yīng)對腦缺血再灌注損傷及相關(guān)VEGF、MMP-9表達的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2015年

4 王富明;針刺對腦缺血再灌注損傷大鼠外周血清SOD、MDA、miRNA-126及VEGF表達的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

5 趙層閃;化濁解毒活血通絡(luò)法對腦缺血再灌注損傷大鼠模型VEGF表達及微血管密度的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 曲欣;解偶聯(lián)蛋白2通過線粒體介導(dǎo)參與高血糖加重腦缺血再灌注損傷的實驗研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

7 程浩;1β-羥基土木香內(nèi)酯對腦缺血再灌注損傷的保護作用研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

8 吳建龍;p38MAPK信號通路參與雌二醇減輕皮瓣缺血再灌注損傷機制的初步研究[D];蘇州大學(xué);2015年

9 李婷婷;安菲博肽對小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護作用及其機制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 吳加元;Omi切割Hax-1加劇腦缺血再灌注損傷的機制研究[D];蘇州大學(xué);2015年

本文編號：2757164