【摘要】：目的:多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是世界上第二大常見的血液系統(tǒng)的惡性腫瘤,MM的主要臨床表現(xiàn)為不明原因骨痛、腎功能不全等。研究表明,骨髓微環(huán)境與MM的發(fā)生發(fā)展有著密不可分的聯(lián)系,其是由基質(zhì)細胞、成骨細胞、破骨細胞以及生長因子、細胞因子等組成。目前臨床常見的治療藥物有硼替佐米、沙利度胺等,但是在治療后會伴隨一系列不良反應(yīng)且復(fù)發(fā)率高。因此,我們急切地希望尋找到治療MM及調(diào)節(jié)MM骨髓微環(huán)境更為安全、有效的藥物。黃葵膠囊臨床上常用于治療慢性腎炎,以黃蜀葵花入藥,研究表明,其黃酮類成分能夠促進成骨細胞的分化。因此,我們分別探究了黃葵膠囊對MM的作用、黃蜀葵花單體對MM的作用及其對骨髓微環(huán)境的調(diào)節(jié)作用。方法:我們首先在動物水平上研究黃葵膠囊和蛋白酶體抑制劑硼替佐米(BTZ)對5TMM3VT骨髓瘤模型小鼠的生存時間的調(diào)節(jié)作用。其次運用現(xiàn)代中藥化學分離純化的技術(shù)方法對黃蜀葵花進行了黃酮類成分的分離,共得到9個化合物,并分別從MM細胞、成骨細胞誘導、破骨細胞誘導等多個方面對它們進行驗證篩選。通過MTT法檢測9個黃蜀葵單體對MM細胞增殖的影響。通過茜素紅染色法檢測黃蜀葵單體對小鼠胚胎成骨前體細胞MC3T3-E1細胞向成骨細胞誘導分化的影響。通過抗酒石酸酸性磷酸酶試劑盒檢測黃蜀葵花單體單體對小鼠巨噬細胞白血病細胞Raw264.7細胞向破骨細胞誘導分化的影響�；谵D(zhuǎn)錄組測序方法對黃蜀葵單體在MM細胞、破骨細胞、成骨細胞三個層面上進行了機制研究;并借助Western blot法對差異基因進行了驗證。結(jié)果:我們首先發(fā)現(xiàn)黃葵膠囊對骨髓瘤小鼠具有顯著的抗腫瘤活性,與單用BTZ相比,黃葵膠囊能夠顯著延長小鼠的生存時間;其次,我們從黃蜀葵花分得了9個黃酮類化合物,分別是金絲桃苷(HK-2)、楊梅素-3'-O-β-D-葡萄糖苷(HK-3)、槲皮素-3-葡萄糖苷(HK-4)、Floramaroside F(HK-7)、楊梅素-3-O-β-D-葡萄糖苷(HK-8)、二氫楊梅素(HK-9)、木犀草素-3-O-(3-乙酰氧基-6-對羥基桂皮酰氧基)-葡萄糖苷(HK-11)、8-(2"-pyrolidione-5"-yl)-quercetin(HK-B10)、8-(2"-pyrolidione-5"-yl)-quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside(HK-E3)。在體外研究中,我們發(fā)現(xiàn)黃蜀葵花單體HK-11對MM細胞(ARP1、H929)增殖具有一定的抑制作用;HK-2、HK-3、HK-B10、HK-11能夠促進成骨細胞前體細胞MC3T3-E1向成骨細胞誘導分化。HK-8、HK-E3對破骨細胞前體細胞Raw264.7向破骨細胞誘導分化同樣具有顯著的抑制作用;通過轉(zhuǎn)錄組測序,我們分別發(fā)現(xiàn)了一些差異基因,通過檢測發(fā)現(xiàn)HK-11有效抑制MM細胞中β-catenin的表達;HK-8、HK-E3能明顯抑制破骨細胞誘導過程中NFATC1和BTK的表達。結(jié)論:鑒于體外和體內(nèi)的多維研究,我們發(fā)現(xiàn)其中黃蜀葵單體HK-11能夠抑制MM細胞的增殖,同時對成骨細胞分化具有顯著的促進作用。這說明黃蜀葵單體成分對MM的骨髓微環(huán)境的調(diào)節(jié)具有良好的選擇性及體內(nèi)外抗腫瘤活性,有望為抗多發(fā)性骨髓瘤藥物提高一個新的選擇。
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285
【圖文】：

第邋章黃葵膠呭在Ｃ５７ＢＬ／ＫａＬｗＲｉｊ小鼠５ＴＭＭ３ＶＴ模型中抗竹毮瘤作用研究．０５）。而值得關(guān)注的是，在黃葵膠囊與ＢＴＺ聯(lián)合用藥后，該組小鼠的生驗組又顯著延長0＜０．０１），說明黃葵膠囊和ＢＴＺ可能具有協(xié)同治１０0１邐逡逑Ｉ邐一邋Ｃｏｎｔｒｏｌ逡逑

第邋章黃葵膠呭在Ｃ５７ＢＬ／ＫａＬｗＲｉｊ小鼠５ＴＭＭ３ＶＴ模型中抗竹毮瘤作用研究．０５）。而值得關(guān)注的是，在黃葵膠囊與ＢＴＺ聯(lián)合用藥后，該組小鼠的生驗組又顯著延長0＜０．０１），說明黃葵膠囊和ＢＴＺ可能具有協(xié)同治１０0１邐逡逑Ｉ邐一邋Ｃｏｎｔｒｏｌ逡逑

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本文編號：2755618