【摘要】：目的:通過實驗研究,檢測感染后咳嗽大鼠肺組織中SP和NEP的mRNA含量及其蛋白表達,從基因水平研究芩百清肺濃縮丸對感染后咳嗽氣道神經(jīng)源性炎癥的干預作用。方法:1.采用煙熏聯(lián)合小劑量LPS鼻腔滴注法及辣椒素霧化吸入誘導模擬革蘭陰性菌感染的方法建立PIC動物模型大鼠。2.將SD大鼠隨機分為空白組、模型組、對照組(阿斯美組)和芩百組4組,灌胃給藥10天,測定造模后2min、治療后第5天及第10天咳嗽次數(shù),小動物呼吸機呼吸麻醉后取大鼠肺組織,PCR法檢測SP和NEP的mRNA含量,免疫組化法檢測SP和NEP的mRNA蛋白表達。結果:1.咳嗽次數(shù):治療后第5天:與本組造模后2min比較,對照組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);芩百組咳嗽次數(shù)明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與對照組比較,芩百組咳嗽次數(shù)減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。治療后第10天:與本組造模后2min比較,給藥組咳嗽次數(shù)減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與對照組比較,芩百組咳嗽次數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.肺組織中SP和NEP的mRNA含量:與空白組相比,模型組SP mRNA明顯增高(P0.05);與模型組相比,阿斯美組SP mRNA含量、芩百組SP mRNA含量明顯降低(P0.05);與阿斯美組相比,芩百組SP mRNA含量明顯降低(P0.05)。與空白組相比,模型組NEP mRNA含量明顯降低(P0.05);與模型組相比,阿斯美組NEP mRNA含量、芩百組NEP mRNA含量明顯升高(P0.05);阿斯美組與芩百組無明顯差異(P0.05)。3.肺組織中SP、NEP的mRNA蛋白表達:與空白組相比,模型組SP mRNA蛋白表達水平增高(P0.05);與模型組相比,阿斯美組SP mRNA蛋白表達水平、芩百組SP mRNA蛋白表達水平均明顯降低(P0.05);阿斯美組與芩百組SP mRNA蛋白表達水平無明顯差異(P0.05)。各組肺組織中NEP mRNA蛋白表達水平在組間無統(tǒng)計學差異(P0.05)。4.芩百組SP和NEP的相關性:芩百組SP mRNA含量和NEP mRNA含量的差異呈負相關,R值為-0.861,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);而蛋白表達無相關性(P0.05)。結論：1.芩百清肺濃縮丸能明顯減少感染后咳嗽大鼠的咳嗽次數(shù),改善咳嗽癥狀。2.芩百清肺濃縮丸能夠降低感染后咳嗽大鼠肺組織中SP mRNA含量和蛋白表達,增加NEP mRNA含量。并且芩百組SP mRNA含量與NEP mRNA含量存在負相關性。3.芩百清肺濃縮丸可能通過增加肺組織內NEP mRNA含量來降解SP活性的途經(jīng)減輕氣道神經(jīng)源性炎癥。
【學位授予單位】：黑龍江省中醫(yī)藥科學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5
【圖文】：

實驗流程圖

鼠咳嗽次數(shù)療后第五天：各給藥組與本組造模后 2min 比較，對照組差異無統(tǒng)計學芩百組咳嗽次數(shù)減少，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。與對照組比較，數(shù)減少，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。治療后第十天：給藥組與本組造�？人源螖�(shù)減少，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。與對照組比較，芩百組統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表 4、圖 2。表 4 各組大鼠不同時間點咳嗽次數(shù)比較 (X ±S)（n=10）造模后2min 給藥后第 3 天 給藥后第 5 天 給藥后第 7 天 給藥后7.31±0.617.89±0.43 8.14±0.59 7.82±1.26 8.33±32.13±7.49 31.51±6.89 30.03±6.04 27.82±3.97 25.03± 33.27±8.82 28.54±6.86 27.38±4.48 23.83±4.09 18.73±31.29±8.27△23.89±5.57●▲#21.38±3.13●▲#19.12±3.14●△▲17.11±組造模后 2min 比較，●P＜0.05；與本組給藥后第 5 天比較，△P＜0.05；與模型組同時間比較，時間比較，#P＜0.05。

SP的擴增曲線(左)和熔解曲線(右)

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