【摘要】：目的:觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激-凋亡途徑在大鼠跟腱腱病中的作用,通過檢測細胞凋亡指數(shù)及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78、eIF2α、CHOP在大鼠跟腱腱病中的表達,探討大鼠跟腱腱病發(fā)生的可能機制及鄭氏一號新傷藥對大鼠跟腱腱病的預(yù)防效果。方法:將8周齡SPF級SD大鼠96只,隨機分為空白對照組(C組)、單純跳躍組(J組)、單純敷藥組(M組)和跳躍敷藥組(JM組),每一組又根據(jù)取材時間不同分為4W、6W、8W組,每組8只。將J組與JM組進行電刺激跳躍法造模,M組與JM組第4周開始外敷鄭氏一號新傷藥干預(yù),觀察大鼠生命體征變化,記錄大鼠有效跳躍次數(shù)。HE染色觀察跟腱組織形態(tài)學變化,Tunel法檢測細胞凋亡指數(shù),Western Blot檢測大鼠跟腱組織GRP78、eIF2α、CHOP蛋白表達。結(jié)果:(1)有效跳躍次數(shù)結(jié)果:J組與JM組大鼠有效跳躍次數(shù)均呈下降趨勢,前5周J組與JM組大鼠有效跳躍次數(shù)基本一致,無顯著差異(P0.05);第6周開始JM組大鼠有效跳躍次數(shù)明顯優(yōu)于J組,存在顯著性差異(P0.05)。(2)HE染色結(jié)果:C組、M組大鼠在第4、6、8周時跟腱組織形態(tài)結(jié)構(gòu)基本一致,膠原纖維未見紊亂,軟骨細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常;J組大鼠第4周時可見跟腱膠原纖維排列稍欠規(guī)則,結(jié)構(gòu)稍顯松散;第6周時出現(xiàn)明顯的病理改變,可見部分膠原纖維斷裂、炎性細胞浸潤及新生毛細血管長入;第8周時腱纖維排列稀疏,出現(xiàn)大面積纖維斷裂情況;外敷鄭氏一號新傷藥干預(yù)后,JM組大鼠跟腱組織形態(tài)結(jié)構(gòu)與J組存在顯著差別,跟腱組織病理變化明顯改善。(3)TUNEL細胞凋亡學結(jié)果:C組與M組大鼠跟腱組織細胞凋亡指數(shù)不同時間段無顯著差異,J組細胞凋亡指數(shù)明顯升高,在第4、6、8周與C組、M組、JM組均存在顯著性或非常顯著性差異;外敷鄭氏一號新傷藥干預(yù)后,JM組細胞凋亡指數(shù)較J組明顯降低,與C組、M組間無顯著性差異。(4)Western Blot結(jié)果:J組大鼠跟腱組織GRP78蛋白的表達在第4周后顯著升高,6周時達最高峰,后呈緩慢下降趨勢;eIF2α第4周后呈急劇升高趨勢,且與C組存在非常顯著性差異(P0.01),6周后呈緩慢下降趨勢;CHOP蛋白的表達自第4周開始呈持續(xù)上升趨勢,8周后其表達量與C組存在顯著性差異(P0.05);外敷鄭氏一號新傷藥干預(yù)后,JM組大鼠跟腱組織GRP78、eIF2α、CHOP蛋白的表達相應(yīng)下調(diào),與J組相比各時間段均有所下降,與C組、M組均無顯著差異。結(jié)論:(1)鄭氏一號新傷藥干預(yù)對大鼠跟腱腱病的形成具有一定的預(yù)防作用。(2)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及其介導(dǎo)的凋亡反應(yīng)參與了大鼠跟腱腱病的過程,ERS介導(dǎo)了大鼠跟腱腱病的細胞凋亡,可能是跟腱腱病的發(fā)病機制之一。(3)外敷鄭氏一號新傷藥可明顯下調(diào)大鼠跟腱組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78、eIF2α、CHOP的表達,有效調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激-凋亡反應(yīng),抑制腱細胞凋亡,從而發(fā)揮了預(yù)防跟腱腱病的作用。
【學位授予單位】：成都體育學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5
【圖文】：

UPR信號通路介導(dǎo)的ERS［87］

圖 2 ERS 誘導(dǎo)的促凋亡途徑[101]（1）CHOP 介導(dǎo)的凋亡通路轉(zhuǎn) 錄 因 子 CHOP ， 又 被 稱 為 生 長 停 滯 及 DNA 損 傷 誘 導(dǎo) 基 因 153（growth-arrest-and DNA-damage-inducibie gene 153，GADD153），是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

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本文編號：2738834