【摘要】：帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一種神經(jīng)退行性疾病,主要表現(xiàn)為運動的普遍減慢(運動遲緩)以及靜止性震顫或僵硬等其他癥狀。另外還有一些的非運動癥狀包括嗅覺喪失,睡眠障礙,情緒障礙,過度流涎以及便秘等。在過去的一個多世紀里,對PD發(fā)病機制的研究已經(jīng)取得了一定的進步,主要有以下幾個方面比如炎癥、路易小體沉積等。目前針對PD的治療只能暫時緩解癥狀,并不能延緩疾病進展。國內(nèi)外也已經(jīng)開展了多種中藥單體的抗PD活性評價,但對具有神經(jīng)保護的單體的探索仍處在基礎階段,仍然存在大量具有潛在作用的單體有待發(fā)掘。落新婦苷(Astibin,AST)屬于二氫黃酮醇苷類化合物,其主要來源是虎耳草科落新婦屬種的根莖,百合科菝葜屬菝葜的根莖以及胡桃科黃杞屬黃杞葉。已有研究表明落新婦苷可以抑制巨噬細胞中一氧化氮(NO)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的產(chǎn)生,并且還有研究表明落新婦苷通過抑制Jak3/Stat3信號通路進而改善咪喹莫特誘導的牛皮癬樣皮膚損傷以及通過激活CREB/BDNF信號通路改善阿爾茨海默病小鼠模型中的學習和記憶缺陷。本課題研究了落新婦苷對1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氫吡啶(MPTP)誘導的帕金森病小鼠運動能力、多巴胺能神經(jīng)元數(shù)量、酪氨酸羥化酶的表達以及潛在信號通路的影響。首先,我們在落新婦苷給藥結束后采用爬桿實驗和懸掛實驗對帕金森病模型小鼠的運動能力進行評估;采用高效液相色譜法(HPLC)衡量紋狀體內(nèi)多巴胺、血清素及其代謝物含量的變化;同時采用蛋白印跡法(WB)檢測紋狀體內(nèi)酪氨酸羥化酶(TH),α-突觸核蛋白以及潛在通路PI3K-Akt相關分子的表達變化;并結合免疫熒光共標法(IF)檢測中腦黑質致密部多巴胺能神經(jīng)元的數(shù)量和膠質細胞(小膠質細胞和星形膠質細胞)的激活情況。行為學實驗結果表明落新婦苷提高了MPTP誘導的帕金森病小鼠的運動能力。HPLC結果表明落新婦苷可減少MPTP誘導的紋狀體多巴胺、二羥苯乙酸、高香草酸、血清素和5-羥吲哚乙酸含量的降低。IF結果表明落新婦苷可減少黑質紋狀體多巴胺能神經(jīng)元的丟失,并減少黑質區(qū)膠質細胞的過度激活。WB結果表明落新婦苷在MPTP處理后抑制α-突觸核蛋白過度表達并激活紋狀體中的PI3K-Akt通路。落新婦苷還阻止了MPTP誘導的紋狀體總超氧化物歧化酶和谷胱甘肽活性的降低。這些結果表明落新婦苷通過激活PI3K-Akt信號通路抑制神經(jīng)膠質增生,α-突觸核蛋白過度表達和與帕金森綜合征相關的氧化應激,進而改善多巴胺能神經(jīng)元的微環(huán)境,減少其死亡。這些實驗結果提示落新婦苷對帕金森病小鼠具有神經(jīng)保護作用。
【圖文】：

1.3 落新婦苷的研究依據(jù)落新婦苷（Astilbin, AST）屬于二氫黃酮醇苷類化合物，分子量是 450.408，其化學結構式如圖1-1。其主要植物來源包括虎耳草科落新婦屬植物的根莖，百合科菝葜屬植物光葉菝葜的根莖以及胡桃科黃杞屬植物黃杞葉。這些年來，研究人員對中藥單體——落新婦苷展開了深入的研究，發(fā)現(xiàn)其具有缺血再灌注損傷保護，鎮(zhèn)痛、抗菌，，降糖降脂，抗氧化等藥理活性 [55, 56]。體外研究表明落新婦苷顯著抑制巨噬細胞中一氧化氮（NO）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的產(chǎn)生 [57]。另外體內(nèi)實驗表明落新婦苷通過抑制 Jak3/Stat3 信號通路進而改善咪喹莫特誘導的牛皮癬樣皮膚損傷 [58]。還有研究表明落新婦苷通過激活 CREB/BDNF 信號通路改善阿爾茨海默病小鼠模型中的學習和記憶缺陷 [59]。以上關于落新婦苷的研究提示了其可能具有神經(jīng)保護作用。圖 1-1 落新婦苷（Astilbin，AST）的結構Fig.1-1 Chemical structure of Astilbin (AST)通過文獻調研，并未發(fā)現(xiàn)關于落新婦苷和 PD 的報道。本課題通過一系列的實驗驗證落新婦苷對 PD 小鼠的神經(jīng)保護作用。我們通過行為學衡量 PD 小鼠的運動功能，通過免疫熒光共標實驗檢測中腦黑質多巴胺能神經(jīng)元的數(shù)量以及膠質細胞的激活狀況，通過高效液相色譜法（HPLC）衡量紋狀體內(nèi)多巴胺

（3）實驗的分組以及給藥的方案：將小鼠隨機分為三組，每組15只，每天早上八點半稱量小鼠的體重，九點之后進行腹腔注射。實驗給藥的方案如下（圖2-1）：（A）空白對照組（NS）：連續(xù)12天腹腔注射生理鹽水，其注射體積為 0.1ml/10g體重。2.1.4
【學位授予單位】：江南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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本文編號：2710277