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田薊苷促進(jìn)大鼠腦卒中后血管新生的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2020-06-09 18:59
【摘要】:目的:本研究旨在通過建立大鼠MCAO(Middle Cerebral Artery Occlusion)模型,探究田薊苷對(duì)大鼠腦卒中后缺血區(qū)血液循環(huán)的影響和對(duì)血管新生的促進(jìn)作用及可能機(jī)制,為后期進(jìn)一步研究田薊苷對(duì)缺血性腦卒中的保護(hù)作用及機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:(1)制作MCAO模型。(2)神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分及分組、給藥,得分在6~14分的大鼠為造模成功,將之隨機(jī)分為:模型組(生理鹽水灌胃)與田薊苷小(4 mg/kg)、中(8 mg/kg)、大(16 mg/kg)劑量組,假手術(shù)組(生理鹽水灌胃)僅進(jìn)行頸外動(dòng)脈結(jié)扎。(3)利用TTC(Triphenyl Tetrazolium Chloride)染色對(duì)大鼠腦梗死面積進(jìn)行檢測(cè)。(4)利用乳膠灌注的方法對(duì)缺血側(cè)皮層維持血流灌注的血管數(shù)目進(jìn)行檢測(cè)。(5)利用免疫熒光(IF,Immuno fluorescence)的方法對(duì)田薊苷給藥后梗死灶周邊微血管密度和ki67標(biāo)記的新生血管數(shù)目等進(jìn)行檢測(cè)。(6)利用免疫印跡(WB,Western Blot)的方法對(duì)VEGF、Ang-1、p-Src/Src、p-Erk/Erk等蛋白在腦組織表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:(1)MCAO造模7天后,與模型組相比,田薊苷中劑量和大劑量給藥組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分有顯著降低(P0.05,P0.01)。(2)TTC染色對(duì)腦梗死面積測(cè)定結(jié)果顯示,模型組梗死面積為全腦的27.96%,田薊苷中劑量給藥組為11.73%,大劑量給藥組給藥組為6.04%,較模型組梗死面積有明顯降低(P0.01,P0.01)。(3)田薊苷給藥7天后,中劑量組和大劑量組大鼠缺血皮層中能維持血流灌注的血管數(shù)目高于模型組,且保存的血管中微小血管所占比例較模型組有顯著增加。(4)IF結(jié)果顯示田薊苷中劑量組和大劑量組梗死周邊區(qū)血管所占面積比均高于模型組,且ki67標(biāo)記的血管數(shù)目較模型組有顯著升高(P0.01,P0.01)。(5)WB結(jié)果顯示,對(duì)比模型組,田薊苷中劑量組和大劑量組VEGF、Ang-1、p-Src、p-Erk蛋白表達(dá)顯著上調(diào)(P0.05)。結(jié)論:田薊苷能有效促進(jìn)腦卒中后血管新生,其機(jī)制可能是通過調(diào)節(jié)VEGF信號(hào)通路下游的p-Src、p-Erk等蛋白實(shí)現(xiàn)。
【圖文】:

流程圖,流程


田薊苷的制備流程

示意圖,大鼠,示意圖,造模方法


圖 3 大鼠 MCAO 示意圖Fig.3 MCAO schematic of rats造模方法[47]:雄性 SD 大鼠于手術(shù)前 12 小時(shí)禁食。稱重后選用體重在 260間的大鼠進(jìn)行麻醉(按 0.35ml/kg 的劑量腹腔注 10%的水合氯醛)。大鼠麻醉仰臥位置于手術(shù)操作臺(tái)上,,用安爾碘進(jìn)行術(shù)周消毒。于大鼠頸部正中切口約
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R285.5;R-332

【參考文獻(xiàn)】

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3 戴佩e(cuò)

本文編號(hào):2705105


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