【摘要】：目的:建立不同產(chǎn)地和品種石韋的HPLC指紋圖譜,通過相似度分析、聚類分析(HCA)、主成分分析(PCA)和一測多評分析(QAMS)對石韋的質(zhì)量進行鑒定、分類和評價。此外,初步探索有柄石韋最佳提取方法抗泌尿結(jié)石活性成分與其化學(xué)指紋圖譜的關(guān)聯(lián)性,為中藥的質(zhì)量控制和藥效評價提供科學(xué)依據(jù)。方法與結(jié)果:本學(xué)位論文首先利用HPLC色譜分析技術(shù),建立42批不同產(chǎn)地和品種石韋樣品的特征指紋圖譜,得到20個共有指紋圖譜特征峰;采用國家藥典委員會推薦的“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)2004 A”和SPSS 19.0統(tǒng)計分析軟件分別進行模式識別分析(相似度分析、HCA、PCA);此外,通過綠原酸(chlorogenic acid)對芒果苷(mangiferin)、蘆丁(rutin)、山萘酚(kaempferol)的相對校正因子(RCFs)進行QAMS,并利用外標(biāo)法(ESM)驗證QAMS應(yīng)用于石韋質(zhì)量評價的可行性。其結(jié)果表明,HPLC指紋圖譜結(jié)合相似度分析、HCA、PCA和QAMS可為石韋藥材的真?zhèn)舞b別和質(zhì)量控制提供科學(xué)的質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)。此外,QAMS通過與ESM比較,確定了其對石韋質(zhì)量評價的可行性。本學(xué)位論文還利用1%乙二醇自來水飲水和2%氯化銨灌胃誘導(dǎo)大鼠泌尿系草酸鈣結(jié)石形成,通過EDTA絡(luò)合滴定法和鉻酸鉀氧化甲基紅催化光度法,測定大鼠尿液、血清和腎組織中鈣(Ca2+)、鎂(Mg2+)、草酸(Ox)的物質(zhì)的量濃度,從而優(yōu)化有柄石韋不同提取方法對大鼠泌尿系結(jié)石的影響,篩選出具有最佳療效的提取方法。其結(jié)果表明,1%乙二醇和2%氯化銨可成功誘導(dǎo)大鼠泌尿系結(jié)石形成,并且有柄石韋水回流提取可有效降低鈣的濃度,從而抑制結(jié)石形成,為石韋的進一步開發(fā)利用提供理論和實驗依據(jù)。此外,在優(yōu)化有柄石韋提取方法抗泌尿系結(jié)石的藥效學(xué)基礎(chǔ)上,建立10批不同產(chǎn)地有柄石韋水回流提取HPLC指紋圖譜,得到74個特征峰的相對峰面積值,進一步通過各峰的相對峰面積值分別與大鼠尿液、血清、腎組織中鈣、鎂、草酸物質(zhì)的量濃度建立灰色關(guān)聯(lián)度(GRD)模型,通過關(guān)聯(lián)系數(shù),計算其關(guān)聯(lián)度;并利用多元線性回歸分析(OMLR)驗證灰色關(guān)聯(lián)度分析(GRA)在譜效關(guān)系中可行性,從而建立有柄石韋抗泌尿結(jié)石的譜效關(guān)系研究。其實驗結(jié)果表明,通過GRA和OMLR,確定有柄石韋水回流提取物中的某一成分(43號峰)具有較高的抗泌尿系結(jié)石活性。結(jié)論:HPLC指紋圖譜結(jié)合相似度分析、HCA、PCA和QAMS為石韋藥材的鑒定、分類和質(zhì)量評價提供了科學(xué)依據(jù)。此外,石韋的抗泌尿系結(jié)石活性與HPLC指紋圖譜的結(jié)合,為“譜效學(xué)”關(guān)系研究提供了有廣闊的應(yīng)用前景。
【圖文】：

用 0.45 μm的濾膜過濾，即得樣品溶液，分別精密吸取 20 μL 注入高效液相色譜儀檢測，如圖2-1。圖 2-1 不同提取溶劑石韋的 HPLC 指紋圖譜Fig. 2-1 The different P. lingua solvents of HPLC fingerprint.

結(jié)果表明 70%乙醇超聲提取時指紋圖譜的相對峰面積較大，分離度較好，故選用 70乙醇超聲提取石韋樣品。2.3.1.2 提取時間的選擇分別精密精密稱取同一批次（C1）藥材粉末 1.0 g，置磨口錐形瓶中，，加入 7乙醇 25 mL，稱重，分別超聲 1 h、1.5 h、2 h，冷卻至室溫后，過濾得提取液，在空干燥器中（70 °C，12 h）干燥至干膏，并用 50%甲醇稀釋至 0.10 g mL-1，用 0.45 μ的濾膜過濾，即得樣品溶液，分別進樣檢測，見圖 2-2。
【學(xué)位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R284.1;O657.72

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